Canine Placenta Recellularized Using Yolk Sac Cells with Vascular Endothelial Growth Factor

Abstract

Regenerative medicine has been growing because of the emergent need for tissues/organs for transplants and restorative surgeries. Biological scaffolds are important tools to try to solve this problem. The one used in this reserach was developed by an acellular biological scaffold from canine placenta with a rich source of cellular matrix. After decellularization, the cellular matrix demonstrated structural preservation with the presence of important functional proteins such as collagen, fibronectin, and laminin. We used cells transduced with vascular endothelial growth factor (VEGF) to recellularize this scaffold. It was succeeded by seeding the cells in nonadherent plaques in the presence of the sterelized placenta scaffold. Cells were adhered to the scaffold when analyzed by immunocytochemistry and scanning electron microscopy, both showing sprouting of yolk sac VEGF (YSVEGF) cells. This recellularized scaffold is a promissory biomaterial for repairing injured areas where neovascularization is required.

>b<Padronização dos processos de recelularização de >i<scaffolds>/i< biológicos provenientes de placentas caninas>/b<

“…Uma vez que estudos comprovaram a eficácia do processo em cultivo in vitro em placas não-aderentes (FRATINI et al, 2018), para este ensaio de recelularização, foram utilizados fragmentos de placentas esterilizadas com dois tipos de células-tronco mesenquimais (CTM): células de medula óssea canina (CMOC) e células de polpa de dente canina (CPDC).…”

“…Neste contexto, verificamos que as placentas caninas descelularizadas cultivadas com as CMOC e CPDC para recelularização pelo período de 7 e 14 dias, apresentaram adesão aos scaffolds placentários, validando o processo de recelularização assim como já observado no cultivo com células progenitoras provenientes do saco vitelino canino transduzidas com fator de crescimento endotelial vascular (FRATINI et al, 2018). Os scaffolds placentários demonstraram quimiotaxia pelos dois tipos celulares em cultivo em placas não-aderentes, favorecendo a interação célula/matriz.…”

“…A esterilidade das placentas descelularizadas foram testadas em meio de cultura com meio mínimo essencial alfa (MEM) com 10% de soro bovino fetal (SFB) e incubados a 37 ° C com 5% de CO2 por 24 horas (Fig. 1e, f), conforme padronizado pelo nosso grupo (FRATINI et al, 2018…”

“…5, Fig. 6 -C, H e L respectivamente), fatores estes que corroboram para a interação célula/matriz (FRATINI et al, 2018). Além disso, a interação das células com os scaffolds tiveram expressão positiva dos marcadores de células-tronco mesenquimais: CD31 + , CD90 + e CD105 + (DOMINICI et al, 2006;WENCESLAU et al, 2011).…”

“…Estas, quando aplicados in vitro, atuam na interação das suas propriedades da MEC com a proliferação de células-tronco progenitoras endoteliais derivadas de saco vitelino transduzidas com fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), demonstrando o potencial de recelularização em placentas caninas descelularizadas (FRATINI et al, 2018).…”