Avaliação de diferentes técnicas de coloração para esfregaços obtidos por punção biópsia aspirativa testicular de bovinos

Abstract

Os corantes Panótico Rápido e Giemsa são frequentemente utilizados para a avaliação de células de linhagem espermatogênica, porém nenhuma destas colorações foi desenvolvida especificamente para o processamento tintorial desse tipo celular. Como até presente não existe consenso na literatura sobre qual das técnicas de coloração permite a melhor visualização das células germinativas testiculares, o objetivo deste estudo foi determinar a melhor coloração para esfregaços obtidos por punção biópsia aspirativa testicular (PBA) de bovinos. Foram selecionados 25 machos bovinos adultos, que sofreram PBAs em ambos os testículos (n=50 punções biópsia aspirativas, perfazendo um total de 100 esfregaços testiculares). O conteúdo de cada PBA foi utilizado para a confecção de no mínimo 2 esfregaços em lâminas foscas de vidro que posteriormente foram corados utilizando dois métodos distintos: Panótico Rápido (G1, n=50 esfregaços) ou Giemsa (G2, n=50). Para avaliação da qualidade dos esfregaços as células da linhagem espermatogênica foram contabilizadas e comparadas entre os dois grupos experimentais. A facilidade e nitidez de visualização proporcionada por cada uma das técnicas foi comparada atribuindo-se uma nota de 1 a 3 (1: ruim; 2: regular; 3: boa). A coloração Panótico Rápido permitiu a identificação de maior quantidade de espermatócitos secundários (p=0,0042) e células inflamatórias (p=0,0318), apresentando ainda efeito significativo sobre a qualidade de leitura dos esfregaços (p=0,0087). Embora ambas as colorações permitam a identificação e visualização das estruturas da linhagem espermatogênica, o Panótico Rápido permitiu melhor visualização e avaliação das células testiculares.

Modified diff-quick staining for canine sperm morphology

“…11 The reason for the poor staining of stallion and dog sperm compared to other species (e.g. human 17,18 cat, Clique ou toque aqui para inserir o texto., 19 and bull 20 ) is not well known, but it has been hypothesized that structural changes in contents of the acrosome among species may be responsible for those differences. 21 In addition, authors suggested that the overestimation of detached heads in diff-quick stained slides is associated with poor delineation and staining of the cranial pole of the head 11 that caused the identification of these sperm as 'normal' detached heads.…”