Avaliação da expressão de genes de reparo de danos em fita dupla no DNA em pacientes com leucemia mielóide crônica com e sem uso de imatinibe

Abstract

Linha de pesquisa: Farmácia cínica e vigilância sanitáriaIntrodução: A leucemia mieloide crônica (LMC) origina-se a partir de um distúrbio clonal onde ocorre expansão clonal maciça das células da linhagem mieloide. A doença progride através de fases distintas: crônica, acelerada e blástica, onde o clone leucêmico vai perdendo progressivamente a capacidade de diferenciação. A anormalidade genética característica da LMC, o cromossomo Filadélfia (Ph), resulta de uma translocação recíproca entre os braços longos dos cromossomas 9 e 22, gerando uma oncoproteína BCR-ABL com atividade tirosina quinase ativada constitutivamente. Atualmente, o tratamento de escolha para pacientes na fase crônica da doença é o inibidor de tirosina quinase (ITK) mesilato de imatinibe. O imatinibe normaliza os mecanismos de regulação da proliferação celular, diminuindo a atividade mitogênica e induzindo direta ou indiretamente a morte da célula progenitora leucêmica por apoptose. Apesar do impacto gerado pelo tratamento com o imatinibe na LMC promovendo uma melhora na sobrevida dos pacientes, as evidências apontam que a leucemia residual pode persistir mesmo nos melhores respondedores e que as terapias dirigidas à TK BCR-ABL não são curativas, uma vez que não conseguem erradicar as CTH, assim, esses pacientes são expostos a um longo período de terapia medicamentosa. Nesse contexto e com base em resultados preliminares encontrados por nosso grupo, em que os ITK apresentaram potencial dano ao DNA, além de serem passíveis de levar a alterações cromossômicas, podendo contribuir para uma evolução da LMC, nos propomos a avaliar a expressão de genes relacionados ao reparo de danos em fita dupla no DNA dos pacientes com LMC e a influência do uso crônico do imatinibe sobre a expressão desses genes. Os resultados contribuirão para um melhor entendimento sobre a evolução, bem como para o monitoramento terapêutico da doença. Objetivos: Avaliar a expressão de genes relacionados às vias de reparo de danos em fita dupla no DNA em pacientes com leucemia mieloide crônica com e sem uso de imatinibe e associar com os parâmetros clínicos laboratoriais e scores de risco (Sokal, Hasford e EUTOS). Métodos: Trata-se de um estudo transversal com 80 pacientes com diagnóstico clínico e molecular de LMC, sendo 50 pacientes em tratamento com imatinibe (400 mg/dia) e 30 pacientes sem uso do imatinibe (ao diagnóstico). Os mesmos serão selecionados aleatoriamente, correspondendo a 50% dos pacientes atendidos no Serviço. O grupo controle será composto de 50 indivíduos saudáveis. Os pacientes serão provenientes do ambulatório do Serviço de Hematologia do Hospital Universitário Walter Cantídio. As coletas sanguíneas serão realizadas no período de junho de 2017 a dezembro de 2018, onde será colhido 1 tubo de 4 mL de sangue periférico contendo EDTA como anticoagulante para avaliação da expressão dos genes ATM, BRCA1, RAD 51, XRCC5, XRCC6 e LIG4, por meio de reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qPCR). Os dados clínicos e laboratoriais, bem como as informaçõ...