Analysis of pH-dependent protein interactions with gel filtration medium

Golovchenko, N. P.; Kataeva, Irina; Akimenko, V. K.

doi:10.1016/0021-9673(92)80229-n

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“…Técnicas como a eletroforese em gel de poliacrilamida-sódio dodecil sulfato (SDS-PAGE) (Schimidt, Poll, 1991;Schimidt, Markwijk, 1993;Gallagher et al, 1994) a cromatografia de exclusão molecular (SEC) (Deeslie, Cheryan, 1991), a HPLC capilar (Davis, Lee, 1992), a HPLC de troca de iônica (AE-HPLC) (Dizdaroglu, 1985) e a HPLC de exclusão molecular (SE-HPLC) empregando coluna TSK G-2000 SW (Lemieux et al, 1991) e coluna Superose -12HR 10/30 (Golovchenko et al, 1992;Visser et al, 1992) podem ser utilizadas para o fracionamento dos peptídeos de hidrolisados protéicos.…”

Section: Perfil Peptídico Dos Hidrolisados Protéicosunclassified

“…Também utilizando SE-HPLC, porém com uma coluna Superose-12HR 10/30, Visser et al (1992) e Golovchenko et al (1992) FIGURA 1 -Perfil cromatográfico do hidrolisado P1 a 230 nm. F1: grandes peptídeos (> 7 resíduos de aminoácidos); F2: médios peptídeos (4 a 7 resíduos de aminoáciods); F3: di-e tripeptídeos; F4: aminoácidos livres.…”

Section: Perfil Peptídico Dos Hidrolisados Protéicosunclassified

“…Neste sentido, várias técnicas cromatográficas têm sido descritas na literatura, mas estas apresentam inúme-ros inconvenientes, tais como interações entre o soluto e a fase estacionária e a ineficiência em separar os pequenos peptídeos (Lemieux et al, 1991;Schimidt, Poll, 1991;Davis, Lee, 1992;Golovchenko et al, 1992;Visser et al, 1992). Silvestre et al (1994a) desenvolveram um método eficiente para fracionamento e quantificação dos peptídeos, empregando uma coluna cromatográfica de exclusão molecular contendo o complexo poli (2-hidroxietilaspartamido)-sílica (PHEA), que lhes possibilitou separar peptídeos com massas moleculares menores do que 1000Da, sendo este método empregado no presente trabalho.…”

Section: Introductionunclassified

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Ação da pancreatina na obtenção de hidrolisados protéicos de soro de leite com elevado teor de oligopeptídeos

Biasutti¹,

Afonso²,

Lopes³

et al. 2008

Rev. Bras. Cienc. Farm.

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Section: Perfil Peptídico Dos Hidrolisados Protéicosunclassified

Section: Introductionunclassified

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Ação da pancreatina na obtenção de hidrolisados protéicos de soro de leite com elevado teor de oligopeptídeos

Biasutti¹,

Afonso²,

Lopes³

et al. 2008

Rev. Bras. Cienc. Farm.

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“…O principal método refere-se à eletroforese em gel de poliacrilamida -dodecil sulfato de sódio, SDS-PAGE (Schmidt & Poll, 1991;Perea et al, 1993;Gallagher et al, 1994); cromatografia de exclusão molecular, SEC (Vallejo-Cordoba et al, 1986;Deeslie & Cheryan, 1988;Adachi et al, 1991;Zhang et al, 1992;Parrado et al, 1993); CLAE de troca de ligante, CLAE-TL (Ford et al, 1986;Armstead & Ling, 1991;Aubry et al, 1992); e CLAE-EM (Chobert et al, 1988;Lemieux & Amiot, 1989;Visser et al, 1992). Entretanto, o emprego dessas técnicas tem demonstrado uma série de inconvenientes, tais como interações secundárias (eletrostáticas ou hidrofóbicas) entre os solutos e a fase estacionária (Kopaciewicz & Regnier, 1982;Golovchenko et al, 1992) e a ineficiência para separar pequenos FIGURA 1 -Perfil cromatográfico do hidrolisado H4 (4%, pH 1,9, 37ºC, 5h) a 230 nm. F1: grandes peptídeos (> 7 resíduos de aminoácidos); F2: médios peptídeos (4 a 7 resíduos de aminoáciods); F3: di-e tripeptídeos; F4: aminoácidos livres.…”

Section: Fracionamento Por Cromatografia Líquida De Alta Eficiência -unclassified

Otimização da hidrólise da caseína para elevar o teor de pequenos peptídeos: emprego da pepsina

Carreira¹,

Silva²,

Morais³

et al. 2003

Ciênc. agrotec.

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RESUMO -Visando à produção de hidrolisados de caseína para uso como suplemento dietético, estudou-se a otimização das condições hidrolíticas, empregando-se a pepsina para elevar os teores de di e tripeptídeos. Os hidrolisados foram fracionados pela CLAE de exclusão molecular, seguida da quantificação dos peptídeos nas frações cromatográficas pelo método rápido da Área Corrigida da Fração. Pelos resultados obtidos, infere-se que a obtenção do melhor perfil peptídico, para uso em dietas especiais, depende da definição de alguns parâmetros, tais como, pH, relação enzima:susbtrato e temperatura. Além disso, o custo envolvido na preparação deve ser considerado. TERMOS PARA INDEXAÇÃO:Suplemento dietético, hidrólise enzimática, caseína, peptídeos, pepsina. OPTIMIZATION OF CASEIN HYDROLYSIS TO INCREASE SMALL PEPTIDE CONTENTS: USE OF PEPSINABSTRACT -With the aim of producing casein hydrolysates for dietary use, the optimization of the hydrolysis conditions, using pepsin, for increasing di-and tripeptide c ontents was studied. The hydrolysates were fractionated by size-exclusion HPLC and the rapid Correct Fraction Area method was used for quantifying the peptides. The results showed that in order to have the best peptide profile for special diets, certain parameters, such as pH, enzyme:substrate ratio and temperature need to be fixed. Also, the production costs must be taken into account. INDEX TERMS:Dietary supplement, enzymatic hydrolysis, casein, peptides, pepsin. INTRODUÇÃOO interesse pelos hidrolisados protéicos aumentou nos últimos anos, uma vez que foi mostrado que preparações contendo pequenos peptídeos, especialmente di e tripeptídeos, provenientes da hidrólise parcial de proteínas são absorvidas mais rápida e completamente do que uma mistura equivalente de aminoáci-dos livres (Hara et al., 1984; Kheohane et al., 1985;Grimble et al., 1986).A introdução na dieta de hidrolisados ricos em pequenos peptídeos pode ser importante, no sentido de propiciar melhor utilização das proteínas, principalmente em determinadas situações como a que ocorre em indivíduos com alergias a determinadas proteínas ou com intolerância alimentar, nos casos de deficiência enzimática (Chataud et al., 1988;González-Tello et al., 1994).Os hidrolisados protéicos têm sido utilizados em países desenvolvidos na fabricação de alimentos especiais para diversos grupos, tais como os recém-nascidos prematuros, as crianças com diarréia, gastroenterite, má-absorção e fenilcetonúria e ainda para pessoas com alergia a determinadas proteínas, visto que o decrésci-mo no tamanho dos peptídeos tem relação direta com a diminuição da imunogenicidade (Freitas et al., 1993).

show abstract

“…1992;Davis, Lee, 1992;Visser et al, 1992;Zhang et al, 1992;Gallagher et al, 1994;Parrado et al, 1993;Perea et al, 1993). Entretanto, estas técnicas têm apresentado série de inconvenientes, tais como, interações secundárias (eletrostáticas ou hidrofóbicas) entre os solutos e a fase estacionária e a ineficiência para separar pequenos peptídeos (Verneuil et al, 1990;Lemieux et al, 1991;Golovchenko et al, 1992). Outros autores, como Lemieux, Amiot (1989) e Davis, Lee (1992), respectivamente, relataram a dificuldade de separar os peptídeos de acordo com o tamanho da cadeia, tendo observado superposição de pesos moleculares, utilizando a SE-HPLC ou a HPLC capilar.…”

Section: Fracionamento Por Se-hplcunclassified

Perfil peptídico de hidrolisados enzimáticos de leite em pó desnatado

Soares

Silva

Lopes

et al. 2004

Rev. Bras. Cienc. Farm.

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INTRODUÇÃODesde 1940, os hidrolisados enzimáticos de proteínas vêm sendo utilizados com finalidades terapêuticas para a recuperação ou a manutenção do estado nutricional de pacientes com restrições protéicas ou de aminoácidos em sua dieta. Desta forma, estas preparações enzimáticas têm sido utilizadas, tanto como suplemento em dietas para idosos e desportistas, como na fabricação de alimentos especiais para recém-nascidos prematuros, crianças com diarréia, gastroenterites, síndromes de má-absorção, fenilcetonúria (PKU) e outros erros inatos do metabolismo (Takase et al., 1979;Smithers, Bradford, 1991;Freitas et al., 1993;Frokjaer, 1994;Mahan, Stump, 1998;Clemente, 2000;Mira, Marquez, 2000). Ressalta-se, ainda, o crescente interesse tecnológico pelos hidrolisados enzimáticos protéicos, uma vez que a hidrólise enzimática pode contribuir para a melhoria das propriedades funcionais das proteínas (Cândido, 1998; Leónil et al., 2000).

show abstract

Analysis of pH-dependent protein interactions with gel filtration medium

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Ação da pancreatina na obtenção de hidrolisados protéicos de soro de leite com elevado teor de oligopeptídeos

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Otimização da hidrólise da caseína para elevar o teor de pequenos peptídeos: emprego da pepsina

Perfil peptídico de hidrolisados enzimáticos de leite em pó desnatado

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