An experimental rabies vaccine produced with a new BHK-21 suspension cell culture process: use of serum-free medium and perfusion-reactor system

Development of a suspension packaging cell line for production of high titre, serum-resistant murine leukemia virus vectors

“…For example, bulk production of viral vaccines is currently obtained by suspension cultures grown in large volumes and at high cell density by the use of perfusionreactors and fermenters. 20,21 In this study, a T-lymphoblastoid and a B-lymphoblastoid cell line were tested for their ability to produce MLV particles. A suspension amphotropic packaging cell line that produces high-titre, serum-resistant virus vectors was established and partially characterised in terms of optimum vector production and evaluated for cell growth and viral vector production.…”

BHK 21 C13 cells for Aujeszky’s disease virus production using the multiple harvest process

“…Today most of virus production processes are based on serum containing medium. To overcome the disadvantages associated with the use of serum, different serum-free or protein-free media were developed for cultivation of cell lines or virus production like influenza virus (Merten et al 1996), poliovirus (Merten et al 1997) and rabies virus (Perrin et al 1995;Kallel et al 2002). This approach could be considered in our further experiments of the ADV production since a serumfree medium which supported cell growth of the BHK21/BRS cells in T-and spinner flasks was developed (Merten et al 1999).…”

“…Baby Hamster Kidney cells (BHK 21) have been widely used in biotechnological production of therapeutics and veterinary vaccines, such as rabies (Perrin et al 1995;Kallel et al 2002) and foot and mouth disease (Radlett et al 1985).…”

Expressão gênica empregando pseudopartículas em células de mamíferos (HEK 293T e Huh 7.0) cultivadas em diferentes meios de cultura livres de soro.

“…Por outro lado, estratégias alternativas de expressão gênica têm surgido, algumas se utilizando de diferentes vírus para a produção de partículas semelhantes às partículas virais (TAN, 2006 Os SFM já estão sendo utilizados na produção de anticorpos monoclonais, vacinas e outros produtos biológicos (GERIN et al, 1999;HAYTER et al, 1992;MERTEN et al, 1994;PERRIN et al, 1995) ou ainda cultivos de células com outras finalidades (DENK; WUNDERLICH; KNORR, 1998;RUNGE et al, 2000;SAKODA et al, 1998).…”

“…Os protocolos mais comumente usados para adaptar células para meios livres de soro (SFM) incluem adaptação direta e sequencial (SCHRODER et al, 2004;SINACORE et al, 2000). Após o processo de adaptação é essencial a avaliação do desempenho das linhagens nos diferentes meios de cultura, quantificando os nutrientes remanescentes, como a glicose e a glutamina, os metabólitos formados, como o lactato e amônio, além da concentração do produto de interesse, se for o caso (FRESHNEY, 2005).Por outro lado, estratégias alternativas de expressão gênica têm surgido, algumas se utilizando de diferentes vírus para a produção de partículas semelhantes às partículas virais (TAN, 2006 Os SFM já estão sendo utilizados na produção de anticorpos monoclonais, vacinas e outros produtos biológicos (GERIN et al, 1999;HAYTER et al, 1992;MERTEN et al, 1994;PERRIN et al, 1995) ou ainda cultivos de células com outras finalidades (DENK; WUNDERLICH; KNORR, 1998;RUNGE et al, 2000;SAKODA et al, 1998).No caso do aspecto científico, a substituição do soro conduziria a uma melhor qualidade e reprodutibilidade dos dados experimentais (BALLS et al, 2006;COECKE et al, 2005; HARTUNG et al, 2002). Além disso, o desenvolvimento dos SFM e de proteína animal são de extrema importância não só para aumentar a segurança dos produtos biológicos produzidos para terapia e vacinação, como também para minimizar as etapas downstream de extração e purificação dos produtos, barateando o processo.…”