Does the tumour microenvironment alter tumorigenesis and clinical response in transmissible venereal tumour in dogs?

Abstract

The canine transmissible venereal tumour (CTVT) is a transmissible cancer that is spread naturally between dogs, with the ability to develop and evade the immune system, despite strict immune surveillance of the host. Furthermore, molecular signalling between cells of the immune system and the tumour microenvironment appear to influence the behaviour and development of the tumour. Thus, this study aimed to quantify the expression of genes related to the immune system such as IL-6, IFN-γ, and TGF-β, as well as angiogenic factors (VEGF, CXCR4), in CTVT cells in vivo and in vitro (primary culture), correlating with the clinical response of the animals treated with vincristine. As expected, the most prevalent subtype was plasmacytoid cells, although lymphocytic cells were also found, indicating the possibility of polyclonality. When we compared the gene expressions of IFN-γ and IL-6, we mostly found low expression, concluding that MHC expression was probably not occurring in tumour cells, and no activation of immune cells to eliminate the tumour. The TGF-β gene was normal in the majority of animals but demonstrated decreased expression in vincristine resistant animals, leading to the hypothesis that the concentration of tumour-derived TGF-β was affecting and even suppressing the real TGF-β expression, favouring tumour proliferation and progression in these cases. VEGF expression was extremely high, demonstrating its angiogenic role in tumour growth, while CXCR4 was decreased, possibly because of CTVT's low metastatic potential. Thus, we concluded that the tumour microenvironment, together with the immune system of the host, influences CTVT, presumably altering its tumorigenesis and the animal's clinical response to treatment.

Tumor venéreo transmissível canino com resistência quimioterápica e metástase esplênica - Relato de caso

“…Neste estudo a análise histologica do tumor mostrou alta celularidade imersa em delicado tecido estromal, caracterizando a fase de progressão (Figura 4). A qualidade e a quantidade de estroma observado nos TVTCs naturais classificados histologicamente em fase de progressão foi diferente daqueles classificados em fase de regressão, que mostraram depósito expressivo de colágeno em substituição ao parênquima tumoral colapsado (Ballestero et al 2018;Duzanski 2017). Foi observado também uma baixa expressão de moléculas de MHC (4,4 ± 2% classe I e 11 ± 4,1% classe II) na analise imunoistoquimica (Figura 6), corroborando com estudos experimentais que descrevem que aproximadamente 5% das células do TVTC expressam MHC I ou II durante a fase de progressão (Hsiao et al 2002;Hsiao et al 2008;Pérez et al 1998).…”

“…Embora uma fase de crescimento seguida de estabilização seja observada, a remissão espontânea em cães naturalmente acometidos pelo tumor não é documentada em estudos com acompanhamento clínico (Rogers 1997). Ainda, foi observada resistência quimioterápica no tumor classificado em fase de regressão (Ballestero et al 2018).…”

“…Os isolamentos das culturas do TVTC seguiram conforme descrito em estudos prévios (Ballestero et al 2018;Flórez et al 2016…”

“…Uma vez que o MHC é fundamental na rejeição imunológica de cânceres transmissíveis (Murgia et al 2006;Sengupta et al 2010), a baixa expressão de moléculas do MHC I e II no tumor observada neste caso pode ter inibido o reconhecimento e a ação imune antitumoral, sendo determinante no momento da progressão do tumor e na formação de metástase para o baço. Além disso, fatores como microambiente tumoral e expressão gênica podem ter regulado o comportamento agressivo do TVTC (Ballestero et al 2018). O TVTC é classificado como plasmocitóide, quando no mínimo 60% das células neoplásicas apresentam-se ovóides, com menor relação núcleo: citoplasma e núcleo excêntrico; linfocitóide, quando pelo menos 60% das células tumorais são arredondadas, mostram maior relação núcleo:citoplasma, núcleo redondo e central, assemelhando-se a linfócitos; ou misto, quando ambos os tipos celulares estão presentes (Amaral et al 2004;Flórez et al 2012).…”

“…Apesar da população tumoral ser considerada sensível a vincristina (Calvert et al 1982;Hantrakul et al 2014), há resistência em alguns casos, que parece ocorrer devido à superexpressão de glicoproteína-P pelas células tumorais, uma molécula que age no efluxo da droga (Floréz et al 2017). Além disso, as células imunes que integram o microambiente tumoral têm sido estudadas e podem exercer influência na resposta clínica ao tratamento (Ballestero et al 2018). Outros mecanismos que se acredita estar relacionados ao comportamento maligno do tumor incluem mudanças em genes pró e anti-apoptótico da família BCL-2 e sistemas de reparo de DNA, associados à família TP53.…”