EFEITO DA ADIÇÃO DE TROLOX E GLUTATIONA REDUZIDA NA VIABILIDADE in vitro DE ESPERMATOZOIDES DE CÃES

Abstract

Com o objetivo de avaliar o efeito da adição dos antioxidantes Trolox e Glutationa reduzida (GSH) na viabilidade in vitro de espermatozoides criopreservados de cães, amostras de sêmen foram colhidas de animais das raças Buldogue Francês (n=1), Basset Hound (n=2) e Rottweiler (n=1), por meio de manipulação digital. A seguir, procedeu-se à avaliação macroscópica e microscópica e divisão do volume de sêmen em alíquotas, de acordo com os experimentos e grupos experimentais, utilizando-se diferentes concentrações de Trolox (200 e 300 M/L) ou GSH (2 e 5 M/L). As amostras foram envasadas em palhetas (0,25 mL), criopreservadas em máquina de congelação e armazenadas em nitrogênio líquido. Após descongelação a 37 o C (60 seg) e incubação durante 60 minutos, constatou-se que os resultados de motilidade, vigor e espermatozoides com acrossomas íntegros evidenciaram diferença significativa (P<0,05) apenas entre os tempos de incubação, nos três experimentos. No Exp. 2, a adição de 2 e 5 M/L de GSH (G2 e G3) determinou maior (P<0,05) porcentual de células sem estresse oxidativo. Concluiu-se que GSH, nas concentrações de 2 e 5 M/L, pode ser adicionada ao diluente de criopreservação do sêmen de cães.

Effect of Addition Palmitic Acid and Vitamin E to the Tris-Egg Yolk Diluter in Canine Semen Cryopreservation

“…Outro estudo [23] revelou que o diluidor Tris--gema acrescido de Trolox foi um meio eficiente para manter os valores de VG espermáticos criopreservados superiores a 2,5, porém também sem diferença significativa entre as diferentes concentrações do antioxidante (100 e 200 µM). Além disso, os autores mostraram que houve redução significativa na longevidade das células espermáticas em função do tempo no teste TTR, corroborando com nossos resultados.…”

Influence of the Addition of Vitamin E in Extenders in the Quality of Fresh Semen Diluted, Refrigerated and Frozen Semen in Dogs of French Bulldog Breed

“…O vigor é uma característica que descreve a qualidade da motilidade espermática [18], avaliado antes da curva e refrigeração, o diluente 2 apresentou melhores resultados quando comparado ao diluente 4, diferindo dos resultados anteriores [19] onde os meios TRIS e ACP 106® foram eficientes em conservar o vigor espermático no escore 4 (1 a 5), pós-descongelação. Os valores obtidos no presente trabalho, para vigor foram inferiores ao já descrito na literatura [19], mas similares aos observados em outra pesquisa [15]. Vale destacar que a motilidade e o vigor espermáticos são parâmetros suscetíveis a influências externas como temperatura ambiente, condicionamento do animal para a colheita de sêmen, frequência das colheitas de sêmen e idade [9], o que explicaria a divergência dos resultados obtidos nos relatos de diversos autores.…”

“…Com relação aos resultados dos 4 diluentes utilizados após a descongelação, a motilidade e o vigor não houve influência significativa com a adição do antioxidante, nos diluentes TRIS ou ACP ® . Os resultados do presente estudo foram superiores a outro relato [2] que observou em relação à motilidade espermática médias de 17,33 ± 5,92%, 14,67 ± 4,03%, 21,42 ± 4,98% e 13,92 ± 4,40% para os respectivos grupos controle e suplementados com vitamina E nas mesmas concentrações descritas acima, já os valores obtidos no presente trabalho, para vigor foram inferiores à outra pesquisa [19], mas similar a outro estudo [15].…”