A soja é a principal matéria-prima para a produção do óleo utilizado na alimentação humana, e na conversão ao biodiesel. Para a produção de biodiesel, uma importante operação prévia é a desacidificação do óleo através da remoção de ácidos graxos livres. Um dos métodos mais vantajosos para a promoção da desacidificação é a extração líquido-líquido realizada à temperatura ambiente e pressão atmosférica. Objetivou-se com este estudo promover a otimização do processo de desacidificação. Foram realizadas análises de peróxido e saponificação, densidade, viscosidade, índice de refração e teor de água na matéria-prima coletada em uma indústria de biodiesel do estado. A desacidificação foi realizada em delineamento fatorial 2³ para avaliar o efeito do teor de água, da mistura do óleo/solvente, e da temperatura sobre o percentual de remoção de ácidos graxos livres e coeficiente de partição. Observou-se que o óleo de soja analisado atende aos padrões de qualidade estabelecidos pela legislação, e o teor de água foi a variável mais influente no processo de desacidificação, reduzindo a capacidade de extração do solvente. Este estudo se tratou de uma pesquisa experimental e laboratorial de natureza quantitativa, onde as condições do ensaio foram controladas utilizando planejamento fatorial de 23. Concluindo com os resultados que a porcentagem de água foi uma variável influente inversamente, onde em menores porcentagens conseguiu-se extrair maiores quantidades de ácidos graxos livres, objetivando uma extração mais eficaz.