Assessment of in vitro methodologies to determine topical and transdermal delivery of the flavonoid quercetin

Abstract

To be effective against the oxidative damages induced by UVB irradiation in the skin, the drug needs to release from the formulation in which it was incorporated and reach the skin layers where the ROS are generated. Thus, it is very important the development of a robust and sensitive methodology to extract and quantify in different skin layers the antioxidant agent delivered from topical formulations. Therefore, in the present work suitable methods to extract and quantify quercetin in skin samples and receptor phase after in vitro penetration studies were developed. The results demonstrated that the recovery from two different layers of skin, the SC and [E+D], using two different methods of quantification (DPPH• assay and HPLC, respectively), was 93.8 % when the quercetin spiked dose was 50 µg/mL, 100.4 % when it was 100 µg/mL and 89.9 % for 250 µg/mL and the average recovery of the quercetin extraction from receptor phase when dichloromethane was used as extractor solvent was 96%. These results demonstrate that the described methods have a potential application to in vitro skin penetration studies of quercetin, since it showed to be accurate and sensitive.<br>Para ser efetiva contra os danos oxidativos induzidos pela radiação UVB na pele, é necessário que o ativo seja liberado da formulação na qual foi incorporado e alcance as camadas da pele onde são geradas as EROS. Desta forma, torna-se de grande importância o desenvolvimento de métodos eficazes e sensíveis para extrair e quantificar, nas diferentes camadas de pele, o agente antioxidante liberado de formulações tópicas. No presente trabalho foram desenvolvidos métodos adequados para extrair e quantificar a quercetina em amostras de pele e na fase receptora após estudos de penetração cutânea in vitro. Os resultados demonstraram que a recuperação das camadas de pele, EC e [E+D], quando do uso de duas diferentes metodologias de quantificação (ensaio de DPPH• e CLAE, respectivamente), foi de 93,8 % quando aplicada uma dose de 50 µg/mL de quercetina, 100,4 % para 100 µg/mL e 89,9 % para 250 µg/mL e a recuperação média da extração da quercetina da fase receptora, quando do emprego de diclorometano como solvente extrator, foi de 96 %. Tais resultados demonstram que os métodos descritos têm grande potencial de aplicação em estudos de penetração in vitro já que apresentaram exatidão e sensibilidade

Topical Formulations Containing Pimenta pseudocaryophyllus Extract: In Vitro Antioxidant Activity and In Vivo Efficacy Against UV-B-Induced Oxidative Stress

“…The leaves of P. pseudocaryophyllus present high concentrations of polyphenolic compounds such as tannins and flavonoids (11,12), which suggests that it might have the ability to act as an antioxidant. Corroborating, it was reported that the antioxidant activity (AA) could be used to evaluate the functional activity of topical functionalized formulations (13,14) and the release of antioxidant components from these formulations (15,16).…”

Avaliação da fotoestabilidade e penetração cutânea de fotoprotetores contendo associações de filtros solares, trans-resveratrol e beta-caroteno

“…A escolha da solução receptora para o estudo foi feita com base em alguns estudos da literatura (BRINON et al, 1999;GODWIN, 2002;HAYDEN et al, 2005;JIANG et al, 1996;POTARD et al, 1999;SIMEONI;BENSON, 2004;VICENTINI et al, 2009) para assegurar máxima solubilização das substâncias estudadas. Ao final do experimento, a quantidade do ativo encontrada na solução receptora não deve exceder 10% do seu nível de saturação (SCCS, 2010 …”

“…Foram aplicadas 16 fitas adesivas sucessivamente, sendo que a primeira fita foi desprezada, por conter excesso de formulação. A quantidade de fitas a ser utilizada na técnica de tappe stripping (16 fitas) foi padronizada com base na total remoção do EC, indicada pelo brilho na face exposta da pele (LOPES et al, 2010;VICENTINI et al, 2009 …”

“…Entretanto, de uma maneira geral, as concentrações das substâncias em estudo encontradas na E+D e no EC foram bastante significativa para todas as formulações avaliadas com relação a alguns estudos da literatura (DAL BELO et al, 2009;LOPES et al, 2010;POTARD et al, 1999;SIMEONI;BENSON, 2004;VICENTINI et al, 2009).…”

“…Embora pequenas porcentagens de trans-resveratrol e beta-caroteno tenham sido encontradas na E+D (< 20%) com relação ao total retido, as quantidades encontradas foram significativas em se tratando de estudos de retenção cutânea de polifenóis e carotenóides (DAL BELO et al, 2009;LOPES et al, 2010;VICENTINI et al, 2009 atividade antioxidante e na proteção da pele contra o UV (CHO et al, 2007;LIN et al, 2003;LIN et al, 2005;OFFORD et al, 2002;STEENVOORDEN, BEIJERSBERGEN VAN HENEGOUWEN, 1997). Assim, os benefícios da utilização de antioxidantes em associação é justificado, mesmo que isso leve à redução da sua retenção cutânea.…”