Isolation and characterization of Leptospira interrogans from pigs slaughtered in São Paulo State, Brazil

Abstract

With the aim of isolating Leptospira spp., blood serum, kidney, liver and genital tract of 137 female swine (40 sows and 97 gilts) and also urine samples from 22 sows were collected in a slaughterhouse in the State of São Paulo, from April 2003 to August 2004. Four isolates were obtained from animals that presented microagglutination test (MAT) titers ≥ 100 for the serovar Pomona and one was obtained from an animal negative by MAT in which Leptospira was isolated from the liver and reproductive tract. The presence of leptospiral DNA was investigated by PCR, and positive results were found in kidneys of 11 females, liver of two, genital tract of two and urine of one of them. Nephrosis, interstitial multifocal nephritis, moderate to severe changing, hyalines cylinders and hemorrhagic focuses, hepatic and uterine horns congestion were histological lesions observed in higher frequency in animals positive for leptospira. The silver impregnation (Warthin Starry) confirmed the presence of spirochetes in renal tubules of four females with positive leptospira cultures from kidneys. The serogroup of the five isolates was identified as Pomona by cross agglutination with reference polyclonal antibodies. Molecular characterization of the isolates was carried out by variablenumber tandem-repeats analysis. All the isolates revealed a pattern distinct from the L. interrogans Pomona type strain, but identical to a previously identified pattern from strains isolated in Argentina belonging to serovar Pomona.

Characterization of Leptospira interrogans serovar Pomona isolated from swine in Brazil

“…Isolates GR5, GR6, KR9, KF10 and KR11 were first described by Miraglia et al [14]. The L. interrogans serogroup Pomona serovar Pomona reference strain 13A (1937, Australia) and L. interrogans serogroup Pomona serovar Kennewicki reference strain LPF (1985, Brazil) were used in this study as internal and quality controls.…”

Pesquisa de leptospiras e de anticorpos contra leptospiras em animais e humanos de propriedades rurais nos biomas brasileiros Pantanal e Caatinga

“…O presente estudo obteve isolados de L. interrogans sorogrupo Pomona, e resultado semelhante ao encontrado, mas em suínos, foi descrito por Miraglia et al (2008), os quais realizaram a caracterização molecular dos isolados pela análise Multiple Locus Variable Number Tandem Repeat Analysis (MLVA), a qual também revelou padrão semelhante ao de L. interrogans sorogrupo Pomona sorovar Pomona estirpe GR6.…”

“…De fato, como o procedimento de tipificação das estirpes isoladas empregado só identificou a espécie das quatro estirpes e o sorogrupo de duas, não foram identificados os sorovares das mesmas, sendo necessário o emprego dos procedimentos clás-sicos para a identificação dos antígenos de superfície de natureza lipopolissacarídica, tais como a prova de absorção cruzada de aglutininas ou conjuntos de anticorpos monoclonais como já foi realizado em diversas localidades do Brasil, identificando em algumas ocasiões sorovares autóctones, só registrados até o presente unicamente no Brasil (SANTA ROSA; SULZER; CASTRO, 1972;VASCONCELLOS et al, 2001;DEL-BEM et al, 2002;MARVULO et al, 2002;CORRÊA et al, 2004;FREITAS et al, 2004;OLIVEIRA et al, 2005;AHMED et al, 2006;FAGUNDES et al, 2008;MIRAGLIA et al, 2008;ZACARIAS et al, 2008).…”

“…A coleção de antígenos utilizada no presente estudo não continha tal sorovariedade. É possível que tenham ocorrido reações cruzadas e que Bananal esteja presente infectando populações em áreas pantaneiras, posto que a presença de sorovariedades autóctones não são raras e já foram relatadas em estudos anteriores (SANTA ROSA; SULZER; CASTRO, 1972;VASCONCELLOS et al, 2001;DELBEM et al, 2002;MARVULO et al, 2002;CORREA et al, 2004;FREI-TAS et al, 2004;OLIVEIRA et al, 2005;AHMED et al, 2006;FAGUNDES et al, 2008;MIRAGLIA et al, 2008;ZACARIAS et al, 2008).…”

“…Em suínos, Miraglia et al (2008) Pelo fato da leptospirose ser uma zoonose cuja cadeia epidemiológica está associada às condições climáticas, sendo que um maior número de casos usualmente ocorre durante os períodos chuvosos e em locais onde há grandes coleções de água doce, partiu--se da hipótese de que existiria diferença significativa na ocorrência de anticorpos contra Leptospira spp. entre os biomas Pantanal e Caatinga, uma vez que o primeiro é uma planície temporariamente inundável, com precipitação média no período das águas de 629 mm e precipitação média na seca de 75 mm, e o segundo, um ambiente onde a seca é mais acentuada, com precipitação média de 285 mm no período das águas e precipitação média de 9 mm na seca (INMET, 2014).…”