Análise das mutações C282Y e H63D no gene da proteína HFE em pacientes com hiperferritinemia

Abstract

A hemocromatose hereditária (HH) é uma doença autossô-mica recessiva caracterizada pela sobrecarga de ferro em alguns tecidos, como coração, fígado, pâncreas, hipófise e articulações, estando as mutações C282Y e H63D do gene da proteína HFE diretamente relacionadas na etiologia dessa doença. O objetivo deste trabalho foi detectar a freqüência das mutações genéticas H63D e C282Y em um grupo de pacientes com histórico de hiperferritinemia persistente, na cidade de Natal/RN, Brasil. Foram investigados 183 pacientes de ambos os sexos, na faixa etária compreendida entre 15 a 70 anos, nos quais foram investigadas as presenças das mutações C282Y e H63D. Adicionalmente também foram obtidos dados clí-nicos e informações sobre etilismo e dieta com sobrecarga de ferro desses pacientes. Para realização do estudo genético, inicialmente foram obtidas amostras de DNA genômico a partir de sangue periférico, as quais foram posteriormente submetidas a uma amplificação dos genes C282Y e H63D por meio da reação em cadeia de polimerase utilizado primers específicos. Em seguida, os produtos de amplificação foram submetidos à digestão com as enzimas de restrição Bcl1 e Snab1, possibilitando a detecção das mutações H63D e C282Y respectivamente. Paralelamente também foi investigado um grupo de 60 pessoas sadias, de ambos os sexos, sem hiperferritinemia, visando avaliação da freqüência das mutações H63D e C282Y em nossa região. Dos pacientes investigados, 94 (51,4%) apresentaram ausência de mutação, e 48,6% algum tipo de mutação: 9 casos (5,0%) C282Y heterozigoto mutado, 2 (1,1%) C282Y homozigoto mutado; 56 (31%) H63D heterozigoto mutado, 16 (8,7%) H63D homozigoto mutado e 6 (3,3%) duplo heterozigoto mutado (H63D/C282Y). Embora não tenha sido observada diferença significativa entre os sexos com relação à presença ou não das mutações estudadas tanto no grupo controle como nos pacientes, foi constatada maior concentração de ferritina sérica no sexo masculino. Devido à alta prevalência da HH em nossa região, o diagnóstico molecular precoce da HH torna-se indicado, principalmente em portadores de hiperferritinemia, em virtude da eficácia e baixo custo do tratamento, evitando com isso o surgimento das manifestações clínicas, aumentando também a qualidade e a expectativa de vida desses pacientes. Palavras-chave:Hemocromatose hereditária; mutação H63D; mutação C282Y; gene da proteína HFE; hiperferritinemia. AbstractHereditary hemochromatosis (HH) is a recessive autosomal disease characterized by iron overload in some tissues, including of the heart, liver, pancreas, hypophysis and joints, with C282Y and H63D mutations in the HFE protein gene being directly related to the etiology of this disease. The aim of this paper was to detect the frequencies of H63D and C282Y genetical mutations in a group of patients with a history of persistent hyperferritinemia in the city of Natal, Brazil. A total of 183 male and female patients, with ages ranging from 15 to 70 years, were investigated for the presence of C282Y and H63D mutations. Additionally, clinic...