Genotipicação de Clostridium perfringens isolados de frangos de corte através da PCR múltipla

Abstract

Clostridium perfringens (Cp) é uma bactéria aneróbica gram positiva que, além de provocar gangrena gasosa e enterotoxemia em humanos e animais, constitui-se na principal causa de enterite necrótica em aves de criações intensificadas. A identificação dos isolados foi realizada pela reação de lecitinase em ágar TSC-gema de ovo, colônias com dupla hemólise em ágar sangue desfibrinado de eqüino, coloração de Gram e provas bioquímicas. Das amostras analisadas, 171Cp foram isolados em jejuno e íleo de frangos de corte provenientes de um frigorífico da região de Pará de Minas-MG. Cp foi isolado em 62 (49,6%) de 125 amostras de conteúdo lumenal de jejunos e em 109 (87,2%) de igual número de íleos dos frangos de corte. Utilizando-se a técnica da PCR múltipla para genotipicacão das estirpes de Cp, de acordo com os genes para as toxinas principais e letais (cpa, cpb, etx e iA), da toxina cpb2 (cpb2) e enterotoxina (cpe), as estirpes de Cp isoladas foram classificadas em cinco tipos toxigênicos (A-E). Das 62 estirpes de Cp isoladas do jejuno, foram obtidos 42/62 (67,7%) tipo A, 1/62 (1,6%) tipo A com produto de amplificação para o gene da toxina beta2, 0/62 (0%) tipo B, 17/62 (27,4%) tipo C, 1/62 (1,6%) tipo D. Das 109 amostras de Cp isolados do íleo das aves foram obtidos 62/109 (56,9%) tipo A, 3/109 (2,7%) tipo A com produto de amplificação para o gene da toxina beta2, 1/62 (0,9%) tipo B, 38/109 (34,9%) tipo C, 1/109 (0,9%) tipo D. Cp A (60,8%) e Cp C (32,2%) foram os tipos toxigênicos predominantes em conteúdo intestinal de frango de corte. Cinco (2,9%) das 171 amostras de Cp isolados não foram tipificadas. Não foram detectados os genes codificadores das toxinas iota (iA) e enterotoxina (cpe) em nenhuma das 171 estirpes de Cp caracterizados.

Genotyping and antimicrobial susceptibility of Clostridium perfringens isolated from Tinamidae, Cracidae and Ramphastidae species in Brazil

“…Unfortunately, this lack of data hinders any comparisons, as there are only sporadic case reports about this microorganism (MCORIST & REECE, 1992;ASAOKA et al, 2004;HAGEN & BILDFELL, 2007;URIBE et al, 2008). The detection of C. perfringens type A corroborates previous studies involving birds and other species, including humans, as this genotype is the most commonly isolated from stool samples and from the environment (CRESPO et al, 2007;GOMES et al, 2008;VAN ASTEN et al, 2010;SIQUEIRA et al, 2012). The absence of strains positive for the enterotoxin-encoding gene (cpe) is Ciência Rural, v.44, n.3, mar, 2014. not surprising because these strains are rarely found in avian samples (CRESPO et al, 2007;GOMES et al, 2008) although they are common in isolates from dog and human feces (MARKS et al, 2011;SANZ et al, 2011;SILVA et al, 2013b).…”

“…Despite the large number of samples, C. perfringens was found in only a few animals, raising the possibility that it is not commonly part of the microbiota of these three families, in contrast with domestic avian species (CRESPO et al, 2007;GOMES et al, 2008). This suspicious are stronger to Cracidae once the isolation frequency of this group were lower than for Tinamidae and Ramphastidae (P<0.001).…”

PRESENCE OF Clostridium perfringens IN BROILER FROM CHICKEN FARMS IN RIBEIRÃO PRETO-SP / Presença de Clostridium perfringens em frangos de corte provenientes de aviários da região de Ribeirão Preto – SP.

“…In contrast Gomes et al (2008), in a national study, reported the presence of C. perfringens in 68.4% of the samples from a slaughterhouse in Pará de Minas-MG.…”

“…Several papers in literature report on the frequency of this microorganism in the intestines of birds (CRAVEN et al, 2001;DE CESARE et al, 2009;GOMES et al, 2008;MANFREDA et al, 2006;SVOBODOVÁ et al, 2007;TSCHIRDEWAHN et al, 1991), but there are only few studies in Brazil on this subject.…”

Clostridium perfringens em rações e águas fornecidos a frangos de corte em granjas avícolas do interior paulista: Brasil

“…favoreçam o crescimento e a produção em doses elevadas das toxinas clostridiais (GOMES ET AL, 2008). Esse microrganismo, especialmente os tipos A e C, é responsável pela enterite necrótica, doença bacteriana que em infecções subclínicas, provoca redução na absorção dos nutrientes e, conseqüentemente, menor ganho de peso e piora na conversão alimentar (SCHOCKEN-ITURRINO & ISHI, 2000).…”