Experimental dry socket: microscopic and molecular evaluation of two treatment modalities

Abstract

PuRPOsE: To evaluate two treatment modalities of dry socket in rats and to discuss the first findings of the molecular analysis in this experimental model. METHOds: 84 rats underwent a tooth extraction were divided in 4 groups: I-uninfected socket (control), II-infected socket without any treatment, III-infected socket treated with irrigation of 2% sodium iodide and 3% hydrogen peroxide solution, IV-infected socket submitted to curettage, irrigation with physiological saline solution and fulfilled with metronidazole paste as base. The groups were subdivided in postoperative sacrifice periods: 6/15/28 days. A quantitative and a qualitative microscopic analysis was performed. Also, a quantitative analysis was performed using a RealTimePCR to evaluate the genes expression in the wound healing: Collagen Type I/COL-I, vascular endothelial growth factor/VEGF, osteocalcin/OCN, alkaline phosphatase/ALP, runt-related transcription factor 2/ RUNX2 and tumor necrosis factor alpha/TNF-α. REsuLTs: The group I showed higher bone formation, followed by groups IV, III, II respectively. The group II presented higher inflammatory infiltrate and the wound healing was delayed compared with other groups. It was obtained a significant positive correlation between bone neoformation and the expression of OCN and RUNX2, inflammatory infiltrate with TNF-α and a negative correlation between bone neoformation and TNF-α. CONCLusION: No significant difference was found between the treatments. Key words: Wound Healing. Dry Socket. Hydrogen Peroxide. Sodium Iodide. Metronidazole. Rats. REsuMO OBJETIVO: Avaliar duas modalidades de tratamento da alveolite em ratos e discutir os primeiros achados de uma análise molecular neste modelo experimental. MéTOdOs: 84 ratos foram submetidos a uma extração dentária e foram divididos em quatro grupos: I-alvéolo não infectado (controle), II-alvéolo infectado sem tratamento, III-alvéolo infectado tratado com irrigação de iodeto de sódio a 2% e solução de peróxido de hidrogênio a 3%, IV-alvéolo infectado submetido à curetagem, irrigação com solução salina fisiológica e preenchimento com pasta a base de metronidazol. Os grupos foram subdivididos em períodos de sacrifício pós-operatório: 6/15/28 dias. Uma análise quantitativa e qualitativa microscópica foi realizada. Além disso, uma análise quantitativa foi realizada utilizando RealTimePCR para avaliar a expressão de genes no reparo alveolar: o colágeno tipo I / COL-I, o fator de crescimento endotelial vascular / VEGF, osteocalcina / OCN, fosfatase alcalina / ALP, fator de transcrição runt relacionados 2 / RUNX2 e fator de necrose tumoral alfa / TNF-α. REsuLTAdOs: O grupo I mostrou maior formação óssea, seguido pelos grupos IV, III, II, respectivamente. O grupo II apresentou maior infiltrado inflamatório e a cicatrização foi atrasada em comparação com outros grupos. Foi obtida uma correlação positiva entre a neoformação óssea e a expressão de OCN e RUNX2, infiltrado inflamatório com TNF-α e uma correlação negativa entre a neoformação óssea e TNF-α. CONC...

Kinetics of gene expression of alkaline phosphatase during healing of alveolar bone in rats

“…However, when it comes to the assessment of enzyme activity, these molecular data should be interpreted with caution. 19 Numerous authors 4,16,20,21 have assumed that there is a 1:1 ratio between the measured mRNA and the expression of the associated protein, but relatively recent studies have shown that this relation between transcription and translation is almost always invalid, and follows complex mathematical modelling. 17,19 Considering the high specificity and sensitivity of qRT-PCR and its limited use in studies specifically related to alveolar bone repair, we developed the present study to assess expression of the ALP gene during the process.…”

“…These data do not support those of previous studies, the results of which showed a significant decrease in ALP gene expression during the later stages. 4,21 There is strong evidence that the ALP enzyme manifests itself more intensively during the early stages of formation of bony tissue, with a significant decrease during the final phases of repair. 13,22,23 A Chinese group found dissociation between the peak of ALP activity and the point of maximum mRNA expression of the ALP enzyme.…”

Caracterização morfométrica e molecular do papel de citocinas pró e anti-inflamatórias no processo de reparo ósseo alveolar em condições homeostáticas e infecciosas

“…Sabendo da importância dessas moléculas no processo de reparo ósseo alveolar, nosso próximo passo foi analisar a expressão de diferentes citocinas anti-e pró-inflamatórias (Rodrigues 2007;Cardoso 2009;Cardoso, Ferreira Junior et al 2011). A alta expressão de IL10 modularia esse processo inflamatório transitório.…”

“…Sendo assim, a IL-10 tem sido descrita como um regulador negativo da osteoclastogênese (Shin, Lee et al 2006;Evans and Fox 2007 desordens locais e/ou sistêmicas podem perturbar e até mesmo atrasar o processo de reparo ósseo alveolar. Dentre esses problemas está a alveolite, uma complicação que ainda tem uma grande incidência pós-exodontia (Blum 2002;Rodrigues 2007;Cardoso 2009;Cardoso, Rodrigues et al 2010;Cardoso, Ferreira Junior et al 2011;Rodrigues, Cardoso et al 2011;Dodson 2013). Na literatura, o primeiro relato de alveolite consta desde 1896 (BLUM 2002, apud Crawford 1896) e por ser uma patologia odontológica ainda persistente e com discordância de tratamentos, ainda há estudos recentes buscando um consenso para a forma mais precisa e segura de sua prevenção e tratamento (Rodrigues 2007;Cardoso 2009;Cardoso, Rodrigues et al 2010;Cardoso, Ferreira Junior et al 2011;Rodrigues, Cardoso et al 2011;Dodson 2013 (Rodrigues 2007;Cardoso 2009;Cardoso, Ferreira Junior et al 2011;Rodrigues, Cardoso et al 2011).…”

“…Enfim, no nosso modelo experimental de indução de alveolite, apesar de ter sido utilizado a mesma metodologia aplicada em estudos anteriores em ratos (Rodrigues 2007;Cardoso 2009;Cardoso, Ferreira Junior et al 2011;Rodrigues, Cardoso et al 2011), a presença da alveolite experimental não demonstrou alterações clínicas e nem alterou, de maneira significativa, a cinética do reparo ósseo alveolar. Nos camundongos mesmo com o aumento das células inflamatórias e uma tendência à redução do tecido ósseo, a alveolite não foi de fato muito agressiva, desencadeando apenas efeitos pontuais e discretos durante o reparo ósseo alveolar.…”