Vitrificação de ovócitos imaturos de bovinos utilizando etilenoglicol associado à trehalose e polivinilpirrolidona

Abstract

Avaliaram-se os efeitos da vitrificação de ovócitos imaturos de bovinos utilizando o etilenoglicol (EG) associado à trehalose e à polivinilpirrolidona (PVP). Utilizaram-se ovócitos provenientes de ovários de vacas abatidas em matadouro, distribuídos aleatoriamente em três tratamentos (T). TI - ovócitos não desnudados e não congelados, TII - ovócitos vitrificados com cumulus oophorus e TIII - ovócitos desnudados vitrificados. A percentagem de ovócitos recuperados e ovócitos com morfologia normal após a vitrificação foi diferente entre TII e TIII (92,2 e 72,6%; 79,0 e 63,6%, respectivamente). Os ovócitos normais foram cultivados à 38,5ºC em atmosfera de 5% de CO2 por 24 horas. Após o cultivo, os ovócitos foram fecundados e os embriões cultivados in vitro por sete dias. Foram encontradas diferenças entre tratamentos quanto às taxas de maturação nuclear, fecundação e clivagem (83,9, 70,0 e 44,0%; 17,5, 23,7 e 5,1%; 0,0, 0,0 e 0,0% para os tratamentos I, II e III, respectivamente). Apenas no TI foram obtidas mórulas e blastocistos (21,4%). Os procedimentos de vitrificação, segundo os protocolos utilizados, não são indicados para a criopreservação de ovócitos imaturos de bovinos.

Congelação de ovócitos desnudados ou não, maturos e imaturos de bovinos, utilizando o Etileno Glicol pelo método convencional

“…A taxa de recuperação dos ovócitos desnudados foi de 97,5% para os imaturos (T 4 ) e 93,2% para os maturados in vitro (T 6 ). Considerando os desnudados imaturos, a taxa de recuperação obtida neste estudo foi semelhante à obtida por Bem et al (1993), que encontraram 94,1% usando o método convencional, e superior à encontrada por Souza et al (2003), que recuperou 79,0% dos ovócitos usando a vitrificação, o que pode ter provocado danos mais acentuados, impedindo a visualização dos ovócitos. A perda de ovócitos desnudados durante a reidratação é decorrente da lise celular, ocorrendo total perda de citoplasma e permanecendo apenas o resquício da membrana plasmática e da zona pelúcida, o que dificulta sua identificação.…”

“…Apesar disso, alguns pesquisadores têm obtido resultados satisfatórios com ovócitos criopreservados. Otoi et al (1995) obtiveram 27,8, 63,4 e 86,6% de fecundação para COC imaturos, COC maduros congelados sem sacarose e ovócitos não-congelados, respectivamente, enquanto Suzuki et al (1996) obtiveram 33,3% de fecundação para COC congelados imaturos, em 1,8 mol L -1 de EG.…”