Testes do pH do exsudato para sementes de milho

Abstract

BÁRBARA FRANÇA DANTAS 2 , CARLOS ALBERTO ARAGÃO 3 , JOÃO PESSOA ARAÚJO-JUNIOR 4 , JOÃO DOMINGOS RODRIGUES 5 , CLÁUDIO CAVARIANI 6 , JOÃO NAKAGAWA 6RESUMO -Durante a germinação das sementes, os carboidratos de reserva são degradados pela atividade de α-amilase. A identificação de mRNA é uma ferramenta fundamental para a definição da cinética de síntese de a-amilase. Objetivou-se padronizar a metodologia do RT-PCR para identificar o mRNA do gene de α-amilase em sementes de milho. Após três dias de germinação das cultivares Saracura-BRS 4154 e CATI-AL34, extraiu-se o RNA total pelo método do tiocianato de guanidina-fenol-clorofórmio, com algumas modificações. A partir do RNA total extraído foi obtido cDNA com utilização de "random primers". A amplificação por PCR de uma porção do gene da α-amilase foi realizada com os "primers": "sense" -CGACATCGACCACCTCAAC; "antisense" -TTGACCAGCTCCTGCCTGTC; gelatina; DMSO e 1,25 unidades de Taq DNA polimerase por reação e completados com água tratada com DEPC. Os ciclos para a amplificação foram 94 o C durante 4 minutos, seguidos por 34 ciclos de 94 o C durante 1 minuto, 42 o C durante 1 minuto e 72 o C durante 1,5 minutos e, finalmente, 72 o C por 5 minutos. O produto do RT-PCR apresentou uma banda de 249 pares de base (pb) bem definida, para as duas cultivares estudadas, não ocorrendo bandas inespecíficas. A técnica do RT-PCR mostrou ser uma metodologia eficiente para a identificação da expressão de α-amilase durante a germinação das sementes e pode ser usado para estudo qualitativo e quantitativo da cinética de síntese dessa enzima em experimentos de germinação.Termos para indexação: Zea mays, sementes, α-amilase, RT-PCR. RT-PCR PATTERNING FOR α-AMYLASE MESSENGER RNA IDENTIFICATION IN GERMINATING MAIZE SEEDSABSTRACT -During germination the seed reserve carbohydrates are degraded by α-amylase activity. The identification of mRNA is a very important tool for definition of α-amylase synthesis kinetics. This study aimed to adapt a PT-PCR methodology for α-identification of amylase mRNA in germinating maize seeds. After three days germination of Saracura BRS4154 and CATI AL34 maize cultivars, the total RNA was isolated by the guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction method, with some modifications. The cDNA was obtained from the total RNA, using random primers. The α-amylase gene PCR amplification was carried out with cDNA, primers (sense -CGACATCGACCACCTCAAC; antisense -TTGACCAGCTCCTGCCTGTC); gelatina; DMSO and 1,25 units of Taq DNA polimerase per reaction and complete with DEPC water. The amplification cycles were 94 o C/4 minutes, 34 cycles of 94 o C /1 minute, 42 o C/1 minute

Potencial Fisiológico De Sementes De Peltogyne Confertiflora (Mart. Ex Hayne) Benth. Por Testes Bioquímicos / Physiological Potential of Seeds of Peltogyne Confertiflora (Mart. Ex Hayne) Benth. By Biochemical Tests

“…No teste de pH do exsudato massal pelo método colorimétrico foram utilizadas duas soluções indicadoras, a primeira sendo uma solução de fenolftaleína composta de 1g de fenolftaleína dissolvida em 100 mL de álcool absoluto, e a adição de 100 mL de água destilada e fervida, e a segunda, uma solução de carbonato de sódio composta de 8,5 g/L de água destilada e fervida (CABRERA; PESKE, 2002). Para este teste, as sementes também foram colocadas para embeber seguindo o procedimento acima descrito e pelos mesmos períodos.…”

Estimativa da viabilidade de sementes de Brachiaria brizantha cv. MG-4 utilizando o teste do pH do exsudato

“…Todavia, Andrade (1994), apresentou uma adaptação do teste para Brachiaria decumbens, caracterizando eficiência do método. Além disso, presume-se que a aplicação do teste possa ser uma possibilidade, mediante aos estudos em sementes de milho (Santana et al, 1998;Cabrera & Peske, 2002), café (Figueiredo, 2000;Hilst, 2009), soja (Amaral & Peske, 1984;Santos et al, 2011;Theodoro, 2013), trigo (Amaral & Peske, 2000); além das espécies florestais (Araldi & Coelho, 2015;Matos, 2017;Viana, 2017;Ribeiro, 2018;Vasconcelos et al, 2019;Ferreira et al, 2020).…”