Ocorrência de genes tad associados à formação de biofilme em isolados de Pasteurella multocida de pulmões de suínos com pneumonia

Abstract

Os atuais sistemas de criação intensiva de suínos aumentam a pressão de seleção microbiana propiciando a disseminação de doenças respiratórias. A bactéria Pasteurella multocida é associada a diversas patologias respiratórias em animais submetidos a esse tipo de criação, causando grandes perdas econômicas. A formação de biofilme foi descrita in vitro em P. multocida e fatores analisados indicaram a facilitação na colonização dos tecidos, aumentando a resistência às defesas do hospedeiro e aos antibióticos. Os objetivos deste trabalho foram analisar a ocorrência de P. multocida em pneumonias de suínos e na microbiota de pulmões sem lesão e a ocorrência dos genes do lócus tad nestes isolados. Foram analisados 70 isolados de P. multocida de pulmões, sendo sessenta e sete com lesão e três sem lesão. Isolados do sorotipo A ocorreram principalmente em pulmões com lesões (85,71%), enquanto em pulmões sem lesão observou-se somente o sorotipo D. Os genes tadA, tadB, tadC, tadD, tadE tadF e tadG estavam presentes em 89,55% dos isolados de pulmões com lesões. Os genes tadA, tadB e tadC estavam presentes em todos os isolados de pulmões sem lesão, porém os genes tadD, tadE, tadF e tadG estavam presentes em 0%, 33,3%, 33,3% e 66,6%, dos isolados sem lesão, respectivamente. Neste trabalho observou-se a associação da ocorrência dos genes tadD, tadE e tadF em isolados de P. multocida e a presença de lesões em pulmões.

Evaluation of the biofilm formation capacity of Pasteurella multocida strains isolated from cases of fowl cholera and swine lungs and its relationship with pathogenicity

“…Biofilm formation may also function as a survival mechanism under adverse conditions in less virulent strains or with P. multocida involved in secondary infections. For example, P. multocida can colonize swine lungs in the form of biofilms, causing lesions that are generally difficult to tre- at because of the blockade of antimicrobial action and the monocyte phagocytic system (Donlan & Costerton 2002, Moraes et al 2014. Despite these results, the correlation of biofilm formation capacity with the pathogenicity of a given strain should be further evaluated in future studies with a larger number of strains classified as strong biofilm producers.…”

“…Pasteurella multocida is a Gram-negative bacillus that causes economic losses associated with numerous respiratory diseases in poultry farms (Moraes et al 2014) and, in some cases, the processing of animal products (Ribeiro et al 2012). P. multocida causes fowl cholera (FC) as well as progressive atrophic rhinitis, pneumonia and serositis in swine, hemorrhagic septicemia in cattle and pasteurellosis in rabbits , Ferreira et al 2012, Wilkie et al 2012.…”

“…The major bacteria with known potential for biofilm formation include representatives of the genera Pseudomonas, Vibrio, Salmonella and E. coli (Freeman et al 2009, Rajagopal et al 2013. Recent studies suggest that P. multocida can also form biofilms, including in swine lungs (Ross 2006, Rajagopal et al 2013, Moraes et al 2014. However, such studies are rare compared with those involving other organisms.…”

“…The genes of the tad locus have been described as bacterial adhesion markers. Homologous regions of the biosynthesis locus play an important role in biofilm formation, colonization and pathogenesis of other Pasteurellaceae members and some Gram-negative bacteria (Tomich et al 2007, Moraes et al 2014).…”

“…To amplify the tadD gene, we used the PCR protocol described by Furian et al (2016). The amplification of the tadB, tadE and tadG genes was adapted from the protocol described by Moraes et al (2014). The reaction mix was composed of 2. µL of 10X buffer, 0. µL of dNTPs (1 mM -Ludwig Biotec; Alvorada, Rio Grande do Sul, Brazil), 0. µL of primers (2 pmol -Invitrogen; Carlsbad, CA, USs), 1.5 U of GoTaq ® Hot Start Polymerase (Promega; Madison, Wisconsin, USs), 1.2 µL of MgCl 2 (2 mM -Promega) and 17.5 µL of ultra-pure water.…”