Ruptura da barreira hematoencefálica após injeção de droga gliotóxica no tronco encefálico de ratos wistar

Abstract

, Dominguita Luhers Graça 5 RESUMO -O brometo de etídio (BE) determina desaparecimento astrocitário local, com ruptura da glia limitans e suposto dano na barreira hematoencefálica (BBB). Este estudo visou avaliar a integridade da BBB após injeção de solução de BE a 0,1% (grupo E) ou de salina a 0,9% (grupo C) na cisterna pontis de ratos Wistar. Fragmentos do tronco encefálico foram coletados das 24 horas aos 31 dias pós-injeção para estudo ultraestrutural e marcação imuno-histoquímica para a GFAP. Alguns animais receberam carvão coloidal por via intravenosa nos mesmos períodos. Nos ratos do grupo C, não houve sinal de perda astrocitária, nem extravasamento vascular de carvão no sítio da injeção. No grupo E, o desaparecimento astrocitário começou às 48 horas e algumas áreas estavam ainda destituídas de processos astrocíticos 31 dias após. Extravasamento de partículas de carvão nas lesões foi visto de 48 horas até 7 dias, não sendo detectada qualquer alteração ultra-estrutural das junções oclusivas pela falta de astrócitos perivasculares.PALAVRAS-CHAVE: astrócitos, barreira hematoencefálica, sistema nervoso central, brometo de etídio, gliotóxico, ratos.Blood-brain barrier breakdown following gliotoxic drug injection in the brainstem of Wistar rats Blood-brain barrier breakdown following gliotoxic drug injection in the brainstem of Wistar rats Blood-brain barrier breakdown following gliotoxic drug injection in the brainstem of Wistar rats Blood-brain barrier breakdown following gliotoxic drug injection in the brainstem of Wistar rats Blood-brain barrier breakdown following gliotoxic drug injection in the brainstem of Wistar rats ABSTRACT -Ethidium bromide (EB) causes local astrocytic disappearance, with glia limitans disruption and supposed blood-brain barrier (BBB) breakdown The aim of this study was to investigate the BBB integrity after the injection of 0.1% EB (group E) or 0.9% saline solution (group C) into cisterna pontis of Wistar rats. Brainstem fragments were collected from 24 hours to 31 days post-injection for ultrastructural study and GFAP immuno-histochemical staining. Some animals received colloidal carbon ink by intravenous route at the same periods. In rats from group C, there was no sign of astrocyte loss and no leakage of ink from blood vessels in the injection site. In group E, astrocyte disappearance began at 48 hours and some areas were still devoid of astrocytic processes 31 days after. Leakage of carbon particles was seen from 48 hours to 7 days in the EB-induced lesions. Tight junctions did not show any detectable ultrastructural change due to the lack of perivascular astrocytes.

Estudo da imunorreatividade astrocitária para GFAP e vimentina no tronco encefálico de ratos Wistar submetidos ao modelo gliotóxico do brometo de etídio

“…Observações ultra-estruturais de investigações anteriores com o gliotóxico [9][10][11][12][13] , confirmam a ação seletiva do agente sobre as células gliais e revelam resposta astrocitária a partir das margens lesionais, por entre axônios preservados, remielinizados ou não, em padrão sugestivo de astrocitose isomórfica 22 .…”

“…Nestes estudos [9][10][11][12][13] , porém, observou-se que as áre-as de maior trauma à arquitetura tecidual, induzidas pelo trajeto da agulha utilizada para injeção da droga, os processos astrocitários hipertróficos assumiam uma orientação irregular a fim de preencher o espaço deixado pela passagem da seringa de Hamilton, o que conferia ao local aspecto de resposta glial mais próxi-ma daquela relatada como anisomórfica…”

“…O brometo de etídio (BE), quando utilizado no SNC, é capaz de induzir desmielinização primária ao provocar a perda local de oligodendrócitos, assim como determina o desaparecimento focal dos astrócitos. A consequência disso é a ruptura da glia limitans e o dano à integridade da barreira hematoencefálica no sítio de injeção [5][6][7][8][9][10][11][12][13] . O presente estudo teve como objetivo observar a imunorreatividade astrocitária para GFAP e VIM no tronco encefálico de ratos Wistar após injeção intracisternal deste agente gliotóxico.…”

“…Nossos resultados, assim, confirmam e complementam muitas observações ultra-estruturais anteriormente descritas com o modelo do BE no tronco encefálico de ratos Wistar [8][9][10][11][12][13] , demonstrando a ação tóxica da droga sobre a neuróglia e a subseqüente reação dos astrócitos sobreviventes nos bordos lesionais, conforme demonstrado pela reexpressão de VIM e pelo aumento de reatividade para a GFAP.…”

Effects of aquatic exercises in a rat model of brainstem demyelination with ethidium bromide on the beam walking test

“…Group 1 showed fewer errors till day 5 and then, more errors on day 6. discussion In the present study, eB was used as a demyelinating agent in order to mimic the pathophysiologic process of demyelinating diseases such as Ms. The injection of a 0.1% eB solution in the cisterna pontis determines the disappearance of local astrocytes and the formation of primary demyelinating lesions with the invasion of schwann cells and lymphocytes in the damaged area 16 . The intracisternal injection of eB in sprague-dawley rats determined oligodendrocyte degeneration 72 hours after drug injection and, 6 days after the surgical procedure, the center of the lesion had most of the axons demyelinated with oligodendrocyte disappearance and the presence of abundant macrophage infiltrate containing myelin debris 17 .…”