Transplante isogênico de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos: metodologia para separação e purificação das ilhotas de Langerhans

Chaib, Eleazar; Papalois, Apostolos; Brons, I. G. M.; Calne, R. Y.

doi:10.1590/s0004-28032000000100010

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“…O método de isolamento, purifi cação e transplante isogênico das ilhotas de Langerhans em ratos já fora descrito (5) ; assim, passou-se à investigar o transplante alogênico (entre espécies), em animais manipulados no timo com injeção de células alogênicas apresentadoras de antígenos como as células dendríticas extraídas do baço (6) e no presente estudo, com células não-parenquimatosas hepáticas com intuito de induzir-se tolerância imunológica.…”

Section: Discussionunclassified

“…A digestão do pâncreas, o método de purifi cação de ilhotas de Langerhans, sua separação, contagem e identifi cação bem como a indução do diabetes mellitus já foram descritos previamente (5) . Os procedimentos cirúrgicos para retirada do pâncreas do doador bem como para o transplante de ilhotas de Langerhans no receptor também foram descritos previamente (6) .…”

Section: Methodsunclassified

“…de Langerhans: a grande atração desta modalidade terapêutica é de que as ilhotas podem ser injetadas, por via endovenosa, em órgão bem vascularizado (como por exemplo o baço ou o fígado), evitando-se assim, a necessidade de intervenção cirúrgica, como também, as inconveniências imunológicas e inflamatórias conseqüentes do transplante de tecido exócrino pancreático (4,5) . Apesar dos resultados encorajadores em roedores, o transplante alogênico de ilhotas de Langerhans em grandes animais como também no homem, não tem demonstrado produção signifi cativa de insulina por longos períodos (18,24) .…”

Section: Gastroenterologia Experimentalunclassified

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Alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos submetidos a manipulação tímica com células não-parenquimatosas

Chaib¹,

Papalois²,

Brons³

et al. 2006

Arq. Gastroenterol.

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RACIONAL: A maior indicação do transplante de pâncreas ou de ilhotas de Langerhans é o diabetes mellitus do tipo I. O processo deve suprir as necessidades de insulina, mantendo os níveis glicêmicos dentro da normalidade OBJETIVOS: Estudar o alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos Lewis (RT1¹), tendo como doadores de ilhotas ratos Wistar (RT1u). No grupo controle (n = 8) injetava-se, no timo, solução de Hanks e no grupo de estudo(n = 8), células não-parenquimatosas hepáticas MATERIAL E MÉTODOS: No grupo controle com o método de separação e purificação das ilhotas de Langerhans obteve-se 3.637 ± 783,3 ilhotas com pureza de 85 ± 3,52%. No grupo de estudo obteve-se 3.270 ± 770 ilhotas de Langerhans com pureza de 84,25 ± 2,76% e com o método de isolamento e purificação das células não-parenquimatosas hepáticas obteve-se 2 x 10(6) células RESULTADOS: No grupo controle, o transplante de 3.637 ± 783,3 ilhotas de Langerhans no fígado, quase normalizou a glicemia que chegou a 17,95 ± 5,33 mmol/L no 2º dia do pós-operatório (diferença significante com relação ao pré-operatório). Do pós-operatório imediato até o 8º dia do pós-operatório a glicemia não se elevou significativamente, porém a partir do 10º dia do pós-operatório houve aumento significativo deste parâmetro, o que pode ser compatível com rejeição aguda do enxerto. No grupo de estudo, o transplante de 3.270 ± 770 ilhotas de Langerhans no fígado, quase normalizou a glicemia que chegou a 17,95 ± 5,33 mmol/L no 2º dias do pós-operatório (diferença significante com relação ao pré-operatório). Do 4º ao 10º pós-operatório a glicemia elevou-se significativamente, o que pode ser compatível com quadro de rejeição aguda do enxerto e certamente precoce CONCLUSÃO: A inoculação de células alogênicas apresentadoras de antígenos (células não-parenquimatosas hepáticas) no timo de ratos imunossuprimidos e diabéticos, antes do alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado, ao contrário de inibir a reação do receptor contra o enxerto, prolongando a sobrevida média das ilhotas e, possivelmente, levando ao estado de tolerância imunológica, induziu ao processo de rejeição aguda precoce.

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Section: Discussionunclassified

Section: Methodsunclassified

Section: Gastroenterologia Experimentalunclassified

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Alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos submetidos a manipulação tímica com células não-parenquimatosas

Chaib¹,

Papalois²,

Brons³

et al. 2006

Arq. Gastroenterol.

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“…O método de isolamento, purificação e transplante isogênico das ilhotas de Langerhans em ratos, já foi descrito por CHAIB et al (4) , assim passou-se a investigar o transplante alogênico (entre espécies), Chaib E, Papalois A, Brons IGM, Calne RY. Alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos submetidos a manipulação tímica com células dendríticas…”

Section: Discussionunclassified

Alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos submetidos a manipulação tímica com células dendríticas

Chaib¹,

Papalois²,

Brons³

et al. 2005

Arq. Gastroenterol.

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Induction of xenogeneic islet transplantation tolerance by simultaneously blocking CD28-B7 and OX40-OX40L co-stimulatory pathways

et al. 2005

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It has been demonstrated that prolonged graft survival can be achieved through inhibiting the activation of T cells, and addition of soluble CTLA4Ig and OX40Ig proteins to mixed lymphocyte reactions can effectively inhibit T cell proliferation. To explore the potential of this type of treatment in xenotransplantation, we infected streptozotocin-induced diabetic BalB/c mice (H-2d) (200 mg/kg, IV) with 5 x 10(8) pfu AdCTLA4Ig-IRES-OX40Ig on day 1 before islets transplantation through the tail vein. The results showed that this treatment prolonged the islet xenografts survival significantly. The reaction to exogenous glucose stimulation was normal and the cytokine secretion of the type Th1 cells was inhibited. The AdCTLA4Ig-IRES-OX40Ig-mediated treatment effectively induced the T cells into anergy and the Th1/Th2 cells into deviation. These results strongly supported the therapeutic potential of blockade of costimulation by AdCTLA4Ig-IRES-OX40Ig genes transfer in inducing the organ transplantation tolerance.

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Transplante isogênico de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos: metodologia para separação e purificação das ilhotas de Langerhans

Abstract: RESUMO -A maior indicação do transplante de pâncreas ou de ilhotas de Langerhans é o diabetes mellitus do tipo

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Alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos submetidos a manipulação tímica com células não-parenquimatosas

Alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos submetidos a manipulação tímica com células não-parenquimatosas

Alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos submetidos a manipulação tímica com células dendríticas

Induction of xenogeneic islet transplantation tolerance by simultaneously blocking CD28-B7 and OX40-OX40L co-stimulatory pathways

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