Aumento da expressão do proto-oncogene ras no bócio multinodular: possível envolvimento na patogênese

Abstract

RESUMOA transformação neoplásica resulta de uma série de alterações genéti-cas, envolvendo ativação de proto-oncogenes e inativação de genes supressores tumorais. Ativação do proto-oncogene ras por mutações em ponto é a alteração genética mais freqüente em tumores espontâ-neos da tireóide. Avaliamos a expressão do gene ras no bócio nodular. Fragmentos de tecido tireoidiano normal e neoplásico foram coletados durante o ato cirúrgico, sendo que 79 pacientes tiveram diagnóstico histopatológico de bócio colóide e foram incluídos no estudo. O RNA total foi extraído pelo método de Trizol e o cDNA sintetizado através do Reverse Trancriptidase. Os genes H-ras e K-ras foram amplificados através de PCR com primers específicos. Do total da amostra, 62% apresentaram aumento da expressão de um dos genes ras estudados. Evidenciou-se aumento da expressão do H-ras em 9 dos 29 (31%) casos e do K-ras em 12 dos 32 (37,5%) tumores estudados. Os resultados demonstraram aumento da expressão do ras na doença nodular da tireóide e sugerem um papel importante desses genes na transformação neoplásica da tireóide. Neoplastic transformation results from a series of genetic alterations involving activation of protooncogenes and inactivation of tumor suppressor genes. Activation of ras protooncogenes by point mutation is the most frequent genetic alteration in spontaneous thyroid neoplasias. The goal of this study was to evaluate ras gene expression in the nodular goiter. Seventy-nine patients submitted to thyroidectomy and with a histological diagnosis of nodular goiter were included in the study. Tissues were obtained from both tumor and normal thyroid during surgery and frozen in liquid N 2 . Total RNA was isolated using TRIzol reagent and the cDNA was synthesized by reverse transcription. Twenty-one of the 34 (62%) nodules showed elevated expression of at least one of the ras genes studied. H-ras exhibited overexpression in 9 of 29 (31%) and K-ras in 12 of 32 (37.5%) tumor samples examined. Our results showed ras over expression in nodular disease, with different pattern of expression between H and K-ras genes, suggesting that control of these proto-oncogenes expression might play an important role on neoplastic transformation in thyroid cells. OBÓCIO MULTINODULAR (BMN) é definido como aumento da glându-la tireóide devido à proliferação multifocal de tireócitos, resultando em estruturas foliculares heterogêneas. É uma patologia comum, clinicamente detectada em 2-6% dos indivíduos em regiões com dieta suficiente de iodo (1).

Aspectos biológicos e atividade tumorigênica da família proto-oncogênica Ras

“…Estas, com peso de 21 kDa, podem ser denominadas também de p21. Proteínas p21 são produzidas na forma precursora citoplasmática e são encontradas ancoradas à superfície interna da membrana plasmática por lipídeos, adicionados por modificação pós-traducional (REUTER; MORGAN; BERGMANN, 2000; PACHECO; PASCHOAL; CARVALHO, 2002;GOLBERT et al, 2003).…”

“…Receptores de tirosino-quinase podem ativar ras pela ativação de um GEF, como a proteína sos, que estimula a conversão das formas GDP a GTP das proteínas ras (ALBERTS et al, 2004;CRESPO;LEÓN, 2000;DENAYER;RAVEL;LEGIUS, 2008). A ativação de um receptor de tirosino-quinase pode levar à ativação simultânea de várias vias de transdução de sinal (GRIFFITHS et al, 2002). Uma vez ativada, ras ativa várias outras proteínas sinalizadoras, e isso resulta na transmissão do sinal em diferentes vias.…”

“…A transversão GGC→GTC no códon 12 de RAS causa a substituição do aminoácido glicina por valina, dando origem à oncoproteína freqüentemente encontrada em cânceres humanos de bexiga (Figura 3a) (GRIFFITHS et al, 2002).…”

“…Dessa forma, p21 permanece ativa mesmo na ausência de sinais de regulação, e mantem sinalização contínua para o núcleo e uma forte estimulação para a proliferação celular (Figura 3b) (COTTI et al, 2000;GRIFFITHS et al, 2002;KUBRUSLY et al, 2002). Mutações nesses códons acabam conferindo vantagem proliferativa às células (CORRADINI et al, 1993;KAMMOUNI et al, 2002;SPANDIDOS et al, 2002).…”

“…Entre os membros da família RAS, o gene K-RAS tem sido o mais estudado, pois apresenta mutações mais freqüentes e os tumores que as contém são mais agressivos, e isso implica em menor sobrevida aos pacientes (DENHARDT, 1996;PACHECO;PASCHOAL;CARVALHO, 2002;GOLBERT et al, 2003). O gene K-RAS codifica um transdutor de sinal extracelular, a proteína k-ras, que transmite informações da membrana ao núcleo e é um elemento-chave na regulação da proliferação e diferenciação celular (ELLIS;CLARK, 2000;OLIVEIRA;CURY, 2002).…”