O objetivo deste estudo foi investigar a atividade antitumoral de Prosopis juliflora contra células tumorais humanas da linhagem B16-F10 (melanoma) para buscar novos medicamentos derivados de fontes naturais. Testes in vitro foram conduzidos com os extratos brutos de folhas e de casca de caule frente às linhagens de células B16-F10 e linhagem de células J774 através do teste de citotoxicidade de MTT (3- (4,5-dimetiazol-2il) 2,5-difenil tetrazólio de brometo) com monitorização após 24 e 48 h de exposição das células tumorais e não tumorais a diferentes concentrações dos extratos (100; 50; 25; 12,5 μg/mL). O extrato de casca de caule e o extrato de folha de P. juliflora inibiram a proliferação de células B16-F10 a partir da menor concentração testada 12,5 Mg/ml e não apresentaram citotoxidade frente às células não tumorais. Entretanto, o extrato de folha de P. juliflora apresentou diminuição sobre a viabilidade celular de forma considerável a partir de 50 Mg/ml. Sugere-se o estudo químico para extração e isolamento de compostos ativos oriundo dos extratos de folha e da casca de caule de P. juliflora, para investigar a possível atividade antitumoral destes compostos em ensaio in vitro e in vivo.