Evaluation of Giardia duodenalis viability after metronidazole treatment by flow cytometry

Abstract

Giardia duodenalis (syn. lamblia; syn. intestinalis) susceptibility testing is not routinely performed because the classical culture methods are very time-consuming and laborious. We developed a novel flow cytometry (FC) assay to evaluate the susceptibility of G. duodenalis trophozoites to metronidazole (MTZ). Different concentrations of MTZ were added to cultures of trophozoites (10 5 /mL) and the cultures were incubated for different periods. The 50% inhibitory concentration was calculated and propidium iodide (PI) was used to quantify the number of dead cells. After treatment, PI-positive trophozoites increased with increasing drug concentration and exposure time. An excellent correlation was found between FC and the classical method. A novel, accurate and reliable method is now available to evaluate G. duodenalis viability.

Métodos rápidos para avaliação da susceptibilidade antimicrobiana em bacilos Gram-negativos

“…A redução no tempo para o diagnóstico de infecções, identificação do agente infeccioso e tratamento do paciente, principalmente aqueles com infecções sistêmicas e causadas por microrganismos resistentes, é fundamental para a diminuição da mortalidade e do tempo de permanência do paciente no hospital (BARENFANGER;KACICH, 1999;CHANDRASEKARAN et al, 2018;CHOI et al, 2017;DOERN et al, 1994;INGLIS;EKELUND, 2019;MACHEN;WANG, 2014;PEREZ et al, 2013;TRENHOLME et al, 1989 Em microbiologia clínica, a citometria de fluxo pode ser utilizada em análises de detecção direta, testes sorológicos e testes de susceptibilidade de bactérias, fungos, parasitas e vírus (ALVAREZ-BARRIENTOS et al, 2000). Há na literatura diversos trabalhos que aplicam a metodologia de diversas maneiras para os diferentes microrganismos, principalmente em testes de susceptibilidade (Tabela 2) (BARBOSA et al, 2014;FREDRICKS et al, 2006; PINA-VAZ, C.;…”