The possibilities of using fluorescent research methods and their advantages for visualization and determination of the type of programmed cell death of human tumor cells under the action of flavonoids in experiments in vitro were investigated. The object of the study were the tumor cells of cervical cancer HeLa and A498 kidney carcinoma, the flavonoid containing extract of hedge hyssop (Gratiola officinalis L.) was used for testing in the experiments. The following fluorescent methods were used: the "living and dead" test with double staining - - iodide propidium and acridine orange, the method of double staining with annexin and iodide propidium. The confirmation of autophagy induction was performed using Muse cell analyzer with fluorescent reagents MuseAutophagy LC3-Antibody Based Kit. The application of fluorescent staining methods using double staining with acridine orange and iodide propidium in the "living and dead" test compared to phase microscopy allows to visualize the formation of apoptotic cells and autophagosomes in cells and, therefore, can serve as one of the methods of evaluation screening of the effectiveness of various chemotherapy drugs.
Поступила в редакцию 11.12.2019 г. В окончательной редакции 17.02.2020 г. Принята к публикации 28.02.2020 г. С использованием флуоресцентных методов визуализации апоптоза и некроза в опухолевых клетках человека in vitro сравнивались эффективности противоопухолевого воздействия на клетки карциномы почки человека А498 флавоноидсодержащих экстрактов: аврана лекарственного и зеленого чая в сверхнизких концентрациях через 24 и 48 h. Флуоресцентные красители (йодистый пропидий и акридиновый оранжевый) использовались в тесте " живые и мертвые", что позволило выявлять общее количество погибших клеток путем некроза и апоптоза, а также клеток, в которых запустился апоптоз, при этом выявлялись апоптотические тельца или пикноз ядра. Наиболее выраженной цитостатической активностью через 48 h после воздействия обладал экстракт аврана, уменьшая количество клеток в поле зрения в 1.5 раза по сравнению с контролем. Наиболее выраженной цитотоксической активностью обладал экстракт зеленого чая в концентрации 0.0288 mg/ml, и выраженность ее нарастала через 48 h после воздействия. Экстракт аврана проявлял цитотоксическую активность при более низких концентрациях (0.0036 mg/ml).Ключевые слова: флуоресцентные методы визуализации, противоопухолевая активность, клеточная культура, цитостатическая активность, флавоноиды, рак почки, авран лекарственный.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.
hi@scite.ai
10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614
Henderson, NV 89052, USA
Copyright © 2024 scite LLC. All rights reserved.
Made with 💙 for researchers
Part of the Research Solutions Family.