resUmenIdentificación mediante PCR del sexo de la papaya (Carica papaya L.), híbrido "Pococí". el objetivo de la presente investigación fue identificar plantas hermafroditas del híbrido de papaya "Pococí". Para la identificación del sexo de las plantas del híbrido "Pococí", se utilizó el protocolo descrito por Deputy et al. (2002), con algunas modificaciones. esta metodología emplea un Pcr múltiple que permite la amplificación simultánea de dos fragmentos (1.300 y 800 pb respectivamente) para plantas hermafroditas y de un solo fragmento (1.300 pb) para plantas femeninas. el aDn se extrajo a partir de hojas de plantas de invernadero o campo con dos metodologías de extracción, cTaB y lisis alcalina (NaOH). La amplificación por PCR del ADN extraído de muestras foliares de papaya híbrido "Pococí", con ambos métodos de extracción, produjo los fragmentos del tamaño esperado. La determinación del sexo de 1.500 plántulas en almácigo mostró un 46 % de plántulas hermafroditas y un 54 % de plantas femeninas. La proporción observada de plantas femeninas: hemafroditas no varió de la esperada (1:1) según la prueba de chi-cuadrado (p= 0,4237). Las plantas hermafroditas fueron llevadas al campo y al momento de la floración se determinó su sexo. La correspondencia entre el sexado por PCR y la expresión sexual en campo fue de un 98 %.Palabras clave: Plantas hembra, hermafroditas, marcadores moleculares, extracción de aDn, genes ligados al sexo. abstractSex determination of papaya (Carica papaya l.) "Pococí" hybrid by PCR. The objective of this work was to identify papaya hermaphrodite plants of the hybrid "Pococí" at the seedling stage using the Polymerase Chain Reaction (PCR). Sex identification was achieved according to the methodology described by Deputy et al. (2002) with some modifications. This methodology employs a multiplex-PCR assay that allows simultaneous amplification of two fragments (800 bp and 1300 respectively) for hermaphrodite plants and one fragment (1300 bp) for female plants. genomic Dna was extracted from leaves and two extraction protocols were evaluated, CTAB and rapid alkaline lysis (NaOH). The amplification reaction yielded the expected size of the fragments with both methods of DNA extraction. PCR sex determination of 1500 seedlings yielded 46 % of hermaphrodite and 54 % of female plants. The female: hermaphrodite plant ratio observed did not vary from the expected (1:1) ratio according to the chi-square test (p = 0.4237). Hermaphrodite plants were planted in the field in san carlos region, costa rica, and sex was determined at flowering. The correspondence between the PCR sexed plants and sexual expression in the field was 98 %.
Itchgrass [Rottboellia cochinchinensis (Lour.) Clayton] is recognized as one of the most noxious and troublesome annual weeds in tropical and subtropical regions. Acetyl-coenzyme A carboxylase (ACCase)-inhibiting herbicides have been frequently used for managing R. cochinchinensis POST in a variety of crops, resulting in evolved resistance to these herbicides. Recently, resistance to fluazifop-P-butyl has been demonstrated for this weed, as the result of a G-to-C single-nucleotide polymorphism (SNP) that leads to the Trp-2027-Cys substitution in the ACCase enzyme. This study was conducted to develop a high-resolution melting analysis (HRMA) for the detection of the mutation underlying the Trp-2027-Cys substitution. The HRMA assay allowed differentiating between fluazifop-P-butyl-resistant (C mutant) and susceptible (G wild type) R. cochinchinensis plants. HRMA accuracy was confirmed with DNA sequencing of the target-site mutation, and no false positives or negatives were observed. Our results illustrated how HRMA is effective detecting the Trp-2027-Cys substitution in an R. cochinchinensis resistance, and how this technique can be of great value for developing high-throughput programs for monitoring evolution and dispersion of target site-based herbicide resistance at large scales.
Introducción. Los productores de papaya prefieren plantas hermafroditas por las características de sus frutos; pero deben esperar hasta el inicio de la floración para identificar y seleccionar las plantas. Actualmente, es posible determinar el sexo de las plantas de papaya en estado de plántula mediante marcadores moleculares. Objetivo. El objetivo de esta investigación fue comparar el crecimiento vegetativo y productivo de plantas de papaya híbrido Pococí, sexadas mediante dos sistemas: convencional (SC) y molecular (SM). Materiales y métodos. Para el sistema de sexado convencional se empleó el método tradicional de siembra de los agricultores, que consiste en plantar tres plántulas y determinar el sexo por inspección visual, eliminar las plantas femeninas y dejar una planta hermafrodita por sitio de siembra. En el sistema de sexado molecular se determinó el sexo en el almácigo con base en marcadores moleculares y luego se estableció una planta hermafrodita por sitio de siembra. El ensayo se realizó en la finca de un productor de papaya localizada en la Rita de Guápiles, provincia de Limón, Costa Rica, entre marzo y octubre del año 2010. Resultados. No se observaron diferencias significativas para altura de planta y diámetro de tallo con ambos sistemas de sexado, lo que indica que el periodo de competencia inicial a que fueron sometidas las plántulas en el sistema de SC no afectó el desarrollo vegetativo. Para las variables productivas, se encontraron diferencias significativas entre ambos sistemas de sexado. Las plantas con SM presentaron floración y cuaje de frutos a más temprana edad. La producción total y la calidad de fruta fueron similares entre ambos tratamientos. Conclusión. El sistema de sexado no influyó sobre el crecimiento, desarrollo y rendimiento de las plantas bajo las condiciones de este estudio, lo que indica la posibilidad de utilizar plantas SM para el cultivo del híbrido Pococí.
Introducción. La guayaba es uno de los principales frutales de la familia Myrtaceae por su alto valor nutricional. Es originario de América tropical y los principales países productores son: México, India, Brasil y Tailandia. El interés generado en los últimos años por el mejoramiento genético de este cultivo, ha propiciado el empleo de herramientas moleculares que permitan determinar la variabilidad genética y seleccionar genes de interés agronómico de una forma rápida y confiable. Sin embargo, el aislamiento de ADN de alta pureza es un requisito previo para poder emplear las técnicas moleculares de última generación. Objetivo. Aislar ADN genómico (ADNg) de alta calidad de guayaba, en cantidad e integridad adecuados. Materiales y métodos. El experimento se realizó en el Laboratorio de Biología Molecular de la Estación Experimental Agrícola Fabio Baudrit Moreno, entre enero y diciembre del 2019. Se compararon tres métodos diferentes para aislar ADN: Promega (ReliaPrep™ gDNA Tissue Miniprep Kit), Qiagen (DNeasy Plant Mini Kit) y CTAB (Doyle y Doyle, 1990) con modificaciones. Para la extracción de ANDg se utilizó material fresco y liofilizado de hojas jóvenes de guayaba (Psidium guajava L.; 2n = 22). Para determinar el mejor método se midieron la calidad, cantidad e integridad del ADNg de cada uno. Resultados. Se logró obtener ADNg con los tres métodos evaluados, los mejores resultados en cantidad de ADNg (ng μl-1) se obtuvieron con el material liofilizado y con el método CTAB. Los métodos CTAB y Qiagen mostraron mayor grado de pureza (relaciones A260/280 con valores óptimos) en comparación con el método Promega. Conclusión. Se logró obtener ADNg en cantidad, calidad e integridad adecuada. Esto se logró con base en extracciones en tejido liofilizado de hojas jóvenes y con el método de extracción del kit de Qiagen.
Introducción. La segregación distorsionada (SD) ocurre cuando los genotipos esperados no corresponden a los observados, lo que favorece alelos de un solo parental. Este fenómeno se observó en poblaciones intermedias provenientes del cruce entre Solanum pimpinellifolium y el cultivar Moneymaker deSolanum lycopersicum, desarrolladas durante el proceso de construcción de una genoteca de líneas de introgresión. Objetivo. Obtener recombinantes informativos que permitan mapear físicamente una región con SD asociado a la especie silvestre Solanum pimpinellifolium. Materiales y métodos. La investigación se desarrolló en el Instituto de Biología Molecular y Celular de Plantas (IBMCP) adscrito al Consejo Superior de Investigaciones Científicas (CSIC) con sede en la Universidad Politécnica de Valencia, España. Se cribó una población de 2000 plantas para identificar recombinantes en dicha región, con una modificación de la técnica fusión de alta resolución (high resolution melting, HRM-Multiplex). Estos recombinantes se autofecundaron, y mediante el estadístico Chi-cuadrado se determinó si marcadores SNP identificados dentro de la región diana tenían una segregación normal (1:2:1) o distorsionada para cada recombinante informativo seleccionado. Resultados. Se generaron e identificaron 54 recombinantes informativos, que se agruparon en 10 bins de acuerdo con el sitio físico de recombinación. Se logró acotar la región con segregación distorsionada hasta obtener un tamaño final de 84 Kb, la cual se localizó en el extremo distal del brazo largo del cromosoma 4. Esta región contiene gran cantidad de genes, algunos de los cuales están relacionados con procesos de fecundación, esterilidad y división celular entre otros, que podrían estar relacionados con el fenómeno estudiado. Conclusión. Se localizó un gen que provoca una distorsión en la segregación en un intervalo de 84 Kb y que posiblemente sea el gen Ge descrito por Rick en 1966.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.
hi@scite.ai
10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614
Henderson, NV 89052, USA
Copyright © 2024 scite LLC. All rights reserved.
Made with 💙 for researchers
Part of the Research Solutions Family.