O aquecimento de soros chagásicos a 56 grausC por 30 minutos, não só inativa o complemento, como altera a mobilidade iônica das proteínas séricas. Com a inativação, os títulos dos soros por fixação de complemento decrescem sendo a queda do poder fixador relacionada com a diminuição da avidez do complexo-imune, formado com o antígeno de Trypanosoma cruzi para o complemento. Não se observaram diferenças na reatividade específica dos soros chagásicos, antes e depois de inativados, quando os títulos foram determinados por técnicas que não envolvem o complemento, tais como a imunofluorescência e a hemaglutinação.
U m ensaio para a avaliação da reatividade de antígenos de Trypanosoma cruzi, baseado na medida do com plem ento livre pelo tem po necessário à hemólise d e 50% pôde ser aplicado na determ i nação da dose d e m áxim a reatividade de antígenos, em reações com o sôro chagásico de referência.Quando se avalia, p o r m étodo cinético, as quantidades de com plem ento livre, em reações incubadas, p o r vários períodos de tem po e se projetam em logaritm os os tempos necessários para 50% de h e m ó lise, contra os tempos de incubação, determinam -se pontos sobre um a reta, cujos parâmetros caracterizam a capacidade fixado ra do com plem ento, dos com plexos imunes.O m étodo cinético se recomenda pela sua precisão, fácil execução e rapidez, na comparação de antígenos, em reações de fixação do com plem ento.
INTRODUÇÃOA fixação de complemento pelo complexo antígeno-anticorpo pode ser apreciada pela medida do complemento livre durante o perío do de incubação, desde que se conheça a quan tidade de complemento inicialmente presente. A medida do complemento livre é feita pelo tempo necessário para 50% de hemólise de um volume estipulado de hemácias sensibiliza das (1,5).Dessa forma, o ensaio de antígenos de T. cruzi, pode ser feita em reações com um sôro de referência para moléstia de Chagas, baseado nas seguintes premissas: 1? Reações de fixação de complemento feitas nas mesmas condições, e com os mes mos terão deixado livre a mesma quantidade de complemento que levará o mesmo tempo para hemólise de 50%.2? Quando as reações são feitas, nas mes mas condições, mas com antígenos que dife rem quali ou quantitativamente, as suas veloci dade de hemólises são diferentes.
Os dados sugerem que o uso de antígenos de T. cru zi para reações de fixação do complem ento de vem ser empregados quando reconstituídos, evitando-se sua manutenção em estado líq uid o, pela queda do seu p o der fixador.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.