Foram testadas diferentes fontes de nitrogênio na indução e enraizamento de brotações axilares de Chrysanthemum morifolium. Manteve-se constante o teor de nitrogênio total (60 mM) em todos os tratamentos realizados, variando-se apenas as fontes nitrogenadas. O tratamento E1 constituiu-se do meio MS (Murashige & Skoog 1962) completo. Os demais tratamentos foram: E2 = amônio; E3 = nitrato; E4 = nitrato+uréia (1,65 mM); E5 = nitrato+uréia (3,33 mM); E6 = uréia; E7 = uréia+glutamina e E8 = glutamina. Em nenhum tratamento foram adicionados fitorreguladores. No tratamento E1 houve um favorecimento de desenvolvimento de plantas de crisântemo in vitro tanto da parte aérea como de raízes. Porém, a utilização apenas de nitrato como única fonte de nitrogênio (tratamento E3) foi suficiente para sustentar o desenvolvimento das plantas, pois, para a maioria dos parâmetros analisados não foi observada diferença significativa em relação às plantas mantidas no meio básico de MS. A presença de uréia no meio de cultura incrementou o desenvolvimento de raízes de crisântemo, principalmente quando utilizada em adição ao nitrato (tratamentos E4 e E5), proporcionando um sistema radicular bastante denso. Quando utilizadas como única fonte de nitrogênio, tanto a glutamina (tratamento E7) como o íon amônio (tratamento E2) não se mostraram eficientes. O resultado do uso das fontes mencionadas foi um baixo desenvolvimento das plantas, como evidenciado pelos baixos valores de crescimento obtidos em todos os parâmetros analisados.
The effect of different nitrogen sources on the induction and rooting of axillary shoots in Chrysanthemum morifolium was tested. The total nitrogen concentration was maintained constant (60 mM) in all treatments, only the nitrogen source varying. Treatment E1 was a complete MS (Murashige & Skoog 1962) medium. The remaining treatments were: E2 = ammonium; E3 = nitrate; E4 = nitrate+urea (1.65 mM); E5 = nitrate+urea (3.33 mM); E6 = urea; E7 = urea+ glutamine, and E8 = glutamine. No phytohormones were added to the media. In treatment E1, both shoot and root development were promoted. The use of nitrate as the only source of nitrogen (treatment E3) was sufficient to maintain vigorous growth and no significant difference was found in any of the parameters measured when compared with the basic MS medium. The presence of urea promoted root development in Chrysanthemum, especially when used in addition to nitrate (treatments E4 and E5), hereby producing a dense root system. Both glutamine (treatment E7) and ammonium (treatment E2) were inefficient when used as the sole nitrogen source. Both of these sources resulted in a less vigorous plant growth, this being reflected in lower values for all of the parameters measured

RESUMO: "Ferramentas biotecnológicas para a produção de dihidro-epideoxiarteanuina B, um antiulcerogênico isolado de Artemisia annua L.". Foram desenvolvidas metodologias para o estabelecimento e cultivo de raízes de Artemisia annua L. (híbrido CPQBA 2/39 x PL5). Estas raízes foram submetidas a diferentes condições de luz e a transformação genética com Agrobacterium rhizogenes (cepas 8196 e 15834). As raízes transgênicas e não-transgênicas (normais) foram cultivadas em meios de Murashige e Skoog (1962), mantidas sobre diferentes condições de fotoperíodo e analisadas para avaliação do conteúdo do composto antiulcerogênico dehidro-epideoxiarteanuína B (composto A). A confi rmação do caráter transgênico das raízes foi obtida por Dot Blot. Os extratos dos materiais vegetais foram analisados por Cromatografi a Gasosa acoplada a um Espectômetro de Massas (CG/EM). Os cromatogramas dos extratos das raízes normais revelaram a presença de dehidro-epideoxiarteanuína B e de um outro composto (composto B). As condições fotoperiódicas de cultivo infl uenciaram na produção destes dois compostos, sendo que sobre condição de escuro contínuo, dehidro-epideoxiarteanuína B foi intensamente produzido e o composto B foi detectado em pequenas proporções, enquanto que sob fotoperíodo de 16 horas, o inverso ocorreu. A quantifi cação de dehidro-epideoxiarteanuína B por Cromatografi a Gasosa acoplada a um Detector de Ionização de Chamas (CG/FID) revelou um aumento de aproximadamente cinco vezes na produção deste composto pelas raízes normais cultivadas sobre escuro contínuo em relação às raízes cultivadas na presença de 16 horas de luz. O terpeno dehidro-epideoxiarteanuína B não estava presente nas raízes transgênicas.Unitermos: Artemisia annua, terpeno, cultura de raízes in vitro, raízes transgênicas, luz.ABSTRACT: Methodologies were developed for the establishment and cultivation of Artemisia annua L (CPQBA 2/39 x PL5 hybrid) roots submitted to light conditions and genetic transformation performed with Agrobacterium rhizogenes (15834 and 8196 strains). The transgenic and nontransgenic (normal) roots were cultured in Murashige and Skoog (1962) medium, kept under different photoperiodic conditions and analyzed for evaluation of the antiulcerogenic dihydroepideoxyarteannuin B (compound A) contents. The Dot Blot technique was used to confi rm the transgenic nature of the roots. The plants′s crude extracts were analyzed by Gas Chromatography coupled to Mass Spectrum (CG/MS). The chromatograms of the extracts taken from normal roots revealed the presence of dihydro-epideoxyarteannuin B and other compound (compound B). Photoperiods during cultivation infl uenced the production of these two compounds: under continuous darkness dihydro-epideoxyarteannuin B was intensely produced and the compound B present in small amounts, while on 16 h photoperiod, the inverse occurred. The quantifi cation of dihydro-epideoxyarteannuin B by Gas Chromatography coupled to Flame Detector Ionization (CG/ FID) revealed an approximately fi vefold increase in the prod...

-(Sinningia allagophylla (Gesneriaceae): in vitro cultivation of a native plant of the Brazilian cerrado). We used axillary buds as initial explants for hormone interaction studies required for in vitro cultivation of S. allagophylla. Callus production was achieved on gelled Murashige & Skoog medium (MS) supplemented with indole-3-acetic acid (IAA= 0.1 and 0.5 mg.l -1 alone or combined with 6 benzylaminopurine) (BA= 0.01 and 0.1 mg.l -1 ). A hormone balance between IAA and BA that would encourage shoot bud development was not found. Nodal segments from axenic cultures grown in the presence of cytokinin (0.1 mg.1 -1 of BA) without any auxin on MS medium with half-strength macronutrients were used as a standard explant source for subsequent experiments on optimum mineral culture media composition for S. allagophylla in vitro cultivation. We found that explants kept in vitro on gelled Gamborg et al. (B5) mineral composition culture medium showed better shoot and specially root growth than on MS medium. Comparisons of the ammonium and nitrate ratios of MS and B5 media indicate that B5 medium has a substantial reduced ammonium ion when compared to MS medium, as well as a lower total nitrogen level. The growth response pattern obtained in vitro may be evidence of the adaptation of this species to soils of poor mineral composition as found in the Brazilian cerrado, as well as an indication that nitrogen levels play a key role for S. allagophylla growth.RESUMO -(Sinningia allagophylla (Gesneriaceae): cultivo in vitro de uma planta nativa do cerrado brasileiro). Gemas axilares de plantas coletadas em casa de vegetação foram utilizadas como explantes iniciais para os estudos das interações hormonais visando ao cultivo in vitro de S. allagophylla. Calos foram produzidos a partir destes explantes, em meio geleificado de Murashige & Skoog (MS) suplementado com ácido 3 indol-acético (AIA = 0,1 e 0,5 mg.l -1 ) sozinho ou combinado com 6 benzilaminopurina (BA = 0,01 e 0,1 mg.l -1 ). O desenvolvimento de partes aéreas não foi obtido com os balanços hormonais de AIA e BA testados. Para os experimentos subseqüentes de otimização da composição mineral para o cultivo in vitro de S. allagophylla, utilizamos como explantes padrões de segmentos nodais de parte aérea de culturas axênicas acrescidas apenas da citocinina (BA a 0,1 mg.l -1 ) sem auxina no meio MS, de composição mineral diluída à metade. Observamos que os explantes mantidos em meio geleificado de Gamborg et al. (B5) tiveram melhor crescimento da parte aérea e principalmente das raízes do que aqueles explantes mantidos no meio MS. Comparando-se as razões entre amônio e nitrato dos meios MS e B5 pode-se observar que o meio B5 tem uma redução substancial do íon amônio, assim como um nível de nitrogênio total menor que o meio MS. Desta maneira, o padrão de resposta obtido in vitro atua como evidência da adaptação desta espécie a um solo de composição mineral pobre como o encontrado no cerrado brasileiro, além de ser uma indicação de que níveis de nitrogênio desempenham...

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