In the nuclei of 4% of peripheral blood or spleen mononuclear cells (MNC), Aleutian disease virus (ADV)-specific antigens were found by a direct immunofluorescence test. The MNC were further fractionated by nylon wool, affinity chromatography using Staphylococcus aureus protein, or Percoll gradient techniques. ADV and specific antigens were detected in MNC fractions enriched in either the B or T lymphocytes. In the bone marrow, up to 40% antigen-positive cells were demonstrated over a period of 15 months. These findings were confirmed by the detection of infectious virus in the MNC of blood and spleen and in bone marrow cells. Adherent cells from mink and control cells from ADV-negative ferrets were negative in both tests. These findings indicate that ADV exhibits a lymphotropism and can persist in the B- and T-cell fractions from ADV-infected mink over a long period of time. Furthermore, co-cultivation of mink MNC and bone marrow cells with the CCC clone 81 cells was shown to be a reproducible method for the detection of ADV in persistently infected mink.
Aleutian disease parvovirus (ADV), mutant Gorham of the Utah-1 strain, was grown and comparatively assayed in feline cell lines CRFK and CCC clone 81 at 31.8 degrees C. The maximum virus titres as determined by a fluorescent focus assay were found to be about 10(5) FFU/ml in CRFK at day 6 p. i. and 10(6) FFU/ml at day 4 p. i. in CCC clone 81 cells. Shifting of the incubation temperature from 31.8 to 37 degrees C led to a reduced virus production after three passages. The synchronization of the CCC clone 81 cells by 1 X 10(-3) M hydroxyurea followed by infection with low (less than or equal to 0.8) multiplicities of infection (MOI) did not significantly influence the virus titres. Several mammalian cell lines such as MiCl 1 (S+L-), Mv1-Lu, 64F3 clone 7 and FEF or fish cell lines such as BB and CHSE 114 developed abortive infections after inoculation with the temperature-sensitive mutant Gorham of the ADV strain Utah-1 (ADV-G). Three new isolates designated ADV-Sl1--ADV-Sl3 were isolated from spleen and blood lymphocytes and bone marrow cells of ADV-infected mink and were adapted to grow in CCC clone 81 cells at 31.8 degrees C with virus titres between 10(4) and 10(4.7) FFU/ml. ADV particle populations varying in their bouyant density between 1.32, 1.36 and 1.43 g/ml were isolated from infected cells and culture supernatants. By protein blotting and immunodetection two major protein components with apparent M. W. of 85 and 75 KD and three minor polypeptides of 33, 28.9 and 27.5 KD were detected.
No abstract
Zusammenfassung Die Fähigkeit zur Persistenz ist im Sinne der Evolution eine notwendige Voraussetzung für das Fortbestehen und die Weiterentwicklung (Perpetuation) von Viren. Populationsepidemiologische Untersuchungen haben gezeigt, daß Viren in kleinen Wirtspopulationen nur durch Persistenz perpetuieren können. Akute Infektionen hingegen verlangen das Vorhandensein großer Kollektive (Nathanson u. Mitarb., 1980). Unter Berücksichtigung dieser Grundeinsicht ist zu erwarten, daß prinzipiell die Vertreter aller Virusfamilien, wenngleich aufgrund unterschiedlicher Mechanismen, die Fähigkeit zur Persistenz besitzen. Es wurde versucht, die bisher bei persistierenden Infektionen aufgetretenen Mechanismen zu abstrahieren und sie am Beispiel einzelner Erkrankungen zu beschreiben. Dabei mußte teilweise auf die Ergebnisse von in vitro‐Unter‐suchungen, wie z. B. bei DI‐Partikeln, Selektion von Virusmutanten und Interferon, zurückgegriffen werden. Es ist aber zu erwarten, daß diese Mechanismen auch in vivo eine grundlegende Bedeutung bei der Etablierung persistierender Infektionen haben. Weiterhin ist es als gesichert anzusehen, daß in vivo vielfältige Wechselwirkungen zwischen den beschriebenen Mechanismen bestehen und persistierende Infektionen das Endergebnis dynamischer Interaktionen sind. Bezüglich der Konsequenzen einer persistierenden Infektion hat das Schicksal des Einzeltieres im allgemeinen keine wesentliche epidemiologische Bedeutung. Im Sinne der Definition latenter und persistierender Infektionen gelingt der Virusnachweis lebenslang, obwohl das absolute Lebensalter häfig nicht vermindert ist. Wesentlicher ist die Bedeutung persistierend‐infizierter Tiere als Virusreservoir für ihre Umwelt. Die Literatur weist zahlreiche Beispiele aus, wo von Einzeltieren seuchenartige Erkrankungen an Europäischer und Afrikanischer Schweinepest, Aujeszky'scher Krankheit oder Infektiöser Anämie ausgegangen sind. Die Zielsetzung, Seuchenausbrüche zu verhüten und Krankheitserreger eventuell sogar zu tilgen, erfordert zum einen die sichere Feststellung persistierend‐infizierter Tiere und zum anderen das Verhindern neu auftretender persistierender Infektionen. Die Diagnose latent‐ oder persistierend‐infizierter Tiere wird durch die modernen sensitiven und automatisierbaren Verfahren zur serologischen und virologischen Untersuchung von Probematerialien erleichtert. Insbesondere durch die Einführung des Enzym‐Immun‐Assays (EIA) wurde die Durchführung von Massenuntersuchungen technisch erleichtert. Im Sinne der Verhinderung der Schaffung neuer Virusträger sind konsequente Importkontrollen und Quarantänen, Desinfektions‐ sowie andere veterinärpolizeiliche Maßnahmen, die die Einschleppung und Weiterverbreitung von Krankheitserregern vermeiden sollen, unerläßlich. Andererseits verlangt das gewachsene Wissen um die Tendenz bestimmter Virusarten zur Persistenz, daß der Einsatz von Lebendvakzinen in der Veterinärmedizin auf das notwendige Mindestmaß reduziert bleibt. Insbesondere bei animalen Herpes‐ und Togaviren gebieten die potentiellen Risi...
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