Two hundred-ninety species of reptiles are estimated to need urgent action for conservation, with at least 113 threatened species worldwide. The International Union for Conservation of Nature and Natural Resources (IUCN) Red List of Threatened Species includes 80 species of snakes, with six native Brazilian species, a number likely to be an underestimation. Some authors believe that assisted reproduction would be an important tool to improve reproduction in captivity of some reptiles. An efficient technique for semen collection and evaluation is an important step in development of protocols for cryopreservation of semen or artificial insemination in snakes, contributing to the conservation of endangered species. Although these techniques are important, some basic semen parameters are described for four of the approximately 2,900 snake species in the world. The Brazilian rattlesnake (Crotalus durissus terrificus) was chosen as a model for semen collection in snakes because it is found quite often in Sao Paulo State. Semen was collected once from each animal by the same investigator during the mating season of this species in Brazil. After antiseptic cleansing of the skin around the cloaca, the snakes were injected subcutaneously with a dose of 15 mg/kg of 1% solution of lidocaine around the cloaca. Semen was collected with ventral massages after cloacal relaxation and directly from genital papilla inside the cloaca. A total of 28 ejaculates from 39 animals were obtained, representing collection efficiency of 71.80%. Semen volume and concentration in Brazilian rattlesnakes ranged from 3-70 microl and from 0.94-2.23 x 10(9) spermatozoa/ml, respectively. Zoo Biol 0:1-6, 2007. (c) 2007 Wiley-Liss, Inc.

No abstract

Barros Vaz Guimarães, pela orientação, amizade, paciência, confiança e parceria. À Dr a. Barbara Durrant, pela co-orientação, amizade, carinho e por ter me recebido de braços abertos no Laboratório de Fisiologia Reprodutiva do CRES. A Don Boyer, curador do Departamento de Herpetologia do Zoológico de San Diego, pelo apoio incondicional neste trabalho e por ter me apresentado pessoalmente minha primeira Tuatara. A John Kinkaid do Departamento de Herpetologia do Zoológico de San Diego, pelo auxílio nas colheitas de sêmen e por ter gentilmente cedido as fotos da dança-combate entre dois machos de cascavel.

Os efeitos das enzimas hialuronidase e tripsina foram avaliados quanto à liquefação, motilidade, vigor e integridade do acrossoma, no sêmen de seis macacos pregos (Cebus apella), mantidos na Fundação Parque Zoológico de São Paulo. O sêmen foi colhido por eletroejaculação, após anestesia geral, e a fração líquida foi imediatamente avaliada. A fração coagulada do sêmen foi tratada com as enzimas hialuronidase e tripsina, na dose de 1mg/ml, diluídas em meio 199 (Nutricel, Campinas/SP, Brasil), na proporção 1:4 e examinada após 5 e 15 minutos. Test t de Student foi utilizado para comparar os tratamentos. Não houve diferença significativa quanto a motilidade, vigor e integridade de acrossoma (p >; 0.05), entre a fração de sêmen coagulado diluído em hialuronidase e tripsina, após cinco ou quinze minutos. No entanto, houve diferença significativa quanto a motilidade e vigor entre a fração líquida e a coagulada do sêmen (p < 0.05), após quinze minutos. Não houve diferença significativa com relação à integridade de acrossoma (p >; 0.05) entre a fração líquida e coagulada do sêmen, após 15 minutos. De acordo com os resultados, podemos concluir que não houve efeito aparente na fração coagulada do sêmen tratado com as enzimas hialuronidase e tripsina com relação a motilidade, vigor e integridade do acrossoma. No entanto, houve diferença significativa entre a fração líquida e coagulada do sêmen com relação a motilidade e vigor, porém não quanto à integridade do acrossoma. De maneira geral, em ambos os tratamentos, não houve a completa dissolução do coágulo.

Prevalência de ABSTRACTCryptosporidium is a protozoan found in a wide variety of animal species which is responsible for gastritis and

The increasing number of endangered snake species, isolation of small fragmented populations with associated inbreeding and mating or conception problems in captivity underscore the need to develop assisted reproductive techniques such as semen cryopreservation and artificial insemination to enhance conservation efforts. However, no efficient protocols for semen evaluation, cooling, or freezing are described in the 4 known publications on snake semen cryopreservation. In this initial study, semen was collected noninvasively from 4 live adult red diamond rattlesnakes (Crotalus ruber) by ventral massage. An aliquot of each ejaculate was diluted in Ham's F10 and evaluated for motility and speed of progression (SOP, scale of 1–5, 5 being fastest) before and after freezing. Because ejaculate volumes were very small, each one was subjected to 2 to 4 treatments only. Samples were diluted in Lake's extender with 2 or 4% dimethyl sulfoxide or Test-Yolk extender with 4%, 8%, or 10% glycerol before cooling to 4°C. Semen extended with Lake's (a common avian semen extender) was then frozen by one of two protocols (FP): FP1, pelleted in liquid nitrogen vapor; FP2, placed in cryovials in an alcohol bath for 4 h in a –80°C freezer (cooling rate of 1°C min–1). Semen extended with Test-Yolk (a widely used mammalian semen extender) was frozen by one of two protocols: FP3, placed in cryovials in a controlled-rate freezer and cooled at 1°C min–1 to –20°C, then 50°C min–1 to –80°C; FP4, placed in cryovials in a controlled-rate freezer and cooled at 1°C min–1 to –8°C, then 3°C min–1 to –16°C, then 5°C min–1 to –80°C. Interestingly, semen frozen in Lake's extender exhibited no post-thaw motility, regardless of dimethyl sulfoxide concentration or FP (Table 1). In contrast, all semen frozen in Test-Yolk exhibited motility post-thaw. Semen from male 42 frozen by FP3 with 8% glycerol resulted in the greatest post-thaw motility of all treatments for both males. However, the same treatment for male 122 was not as successful, suggesting a possible male effect on semen cryosurvival (Table 1). The single sample frozen with 4% glycerol exhibited the lowest post-thaw motility, indicating that higher concentrations of the cryoprotectant may be beneficial to snake sperm. The exciting results of this preliminary study may guide future research in the long-neglected field of snake semen cryopreservation. Table 1.Motility/speed of progression for fresh and cryopreserved semen of red diamond rattlesnakes frozen with Test-Yolk extender and glycerol

RESUMO.-[Células gliais do sistema nervoso central de Bothrops jararaca (Reptilia, Ofidae): um estudo ultraestrutural.] Muito embora as características ultraestruturais da neuróglia madura do sistema nervoso central (SNC) sejam bem descritas em mamíferos, muito pouco é conhecido em répteis, especialmente em serpentes. Neste contexto, dois espécimes de Bothrops jararaca foram eutanasiados para análise morfológica das células gliais presentes no SNC. Amostras de telencéfalo, mesencéfalo e medula espinhal foram coletadas e processadas para investigação por microscopia de luz e eletrônica de transmissão. Astró-citos, oligodendócitos, células microgliais e ependimárias, bem como bainhas de mielina, apresentaram caracterís-ticas ultraestruturais similares àquelas já observadas em mamíferos e tenderam a manter seu aspecto geral pelas diferentes regiões observadas no SNC. Similaridades morfológicas entre as células gliais de mamíferos e de répteis estão provavelmente ligadas a sua conservação evolutiva ao longo da filogenia dos vertebrados.

Óbitos por infecções causadas por protozoários intestinais são indesejáveis para programas de manejo de fauna, exigidos no âmbito do licenciamento ambiental e que demandam a captura e quarentena de primatas não humanos. Exames coproparasitológicos, necroscópicos, microbiológicos e moleculares foram utilizados para a confirmação do diagnóstico de uma severa enterite necrótica que levou a óbito três fêmeas e dois machos de Alouatta (A.) caraya capturados e mantidos em quarentena prévia à translocação. Exames coproparasitológicos revelaram a presença de cistos de Entamoeba (E.) histolytica/dispar (5/5), Entamoeba (E.) coli (5/5) e Giardia (G.) duodenalis (1/5). A avaliação necroscópica revelou áreas de necrose multifocal severa na mucosa e submucosa intestinal. A análise microscópica revelou a presença de estruturas morfologicamente compatíveis com trofozoítos do gênero Entamoeba spp. em todos os indivíduos examinados. Além disso, G. duodenalis (1/5) foi demonstrada pela técnica de Nested PCR. Sugere-se que quando for necessário o cativeiro temporário de primatas, deverão ser adotados protocolos de manejo adequados buscando a destinação imediata dos animais, de moto a mitigar os efeitos negativos do estresse e reduzir o risco da ocorrência de infecções.