-(Callus induction and betacyanin quantification by HPLC/MS-MS in Alternanthera brasiliana (L.) Kuntze).The objective of this study was to establish a protocol for callus induction and betacyanin production in plants of Alternanthera brasiliana. Explants of A. brasiliana and five combinations of cytokinin and auxin were used for callus induction. Calli were transferred to a Betacyanin Induction Medium (MIB), composed of MS, with 0.5 mg L -1 of thidiazuron (TDZ) and 1 mg L -1 of naphthaleneacetic acid (NAA), and kept in the light for 45 days. The aspect and intensity of pigments were assessed and total betacyanins were quantified in high performance liquid chromatography (HPLC). The combination of internodal segments and a medium containing equilibrium concentrations of auxins and cytokinins was the most efficient metod to induce calli and increased production of betacyanins. The presence of amaranthine in calli of A. brasiliana justifies its medical use and the consequent need for future studies for the large-scale production of this molecule. Keywords: in vitro growth, medicinal plants, phyto-regulators, pigments RESUMO -(Indução de calo e quantificação de betacianinas por CLAE/MS-MS em Alternanthera brasiliana (L.) Kuntze). O objetivo deste estudo foi estabelecer um protocolo para indução de calos e produção de betacianinas em plantas de Alternanthera brasiliana. Para indução da calogênese foram utilizados explantes de A. brasiliana e cinco combinações de citocinina e auxina. Posteriormente os calos foram transferidos para Meio de Indução de Betacianinas (MIB), formado por meio MS, com 0,5 mg L -1 de tidiazuron (TDZ) e 1 mg L -1 de ácido naftalenoacético (ANA), onde permaneceram na luz por 45 dias. Avaliou-se oaspecto e a intensidade de pigmentos e quantificação de betacianinas totais em Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). Os segmentos internodais combinados com o meio que contém equilíbrio na concentração de auxinas e citocininas foi mais eficiente para obtenção de calogênese e maior produção de betacianinas. A presença de amarantina, em calos de A. brasiliana, justifica seu uso medicinal e contribui para futuros estudos para produção em larga escala desta molécula. Palavras-chave: cultivo in vitro, fitorreguladores, plantas medicinais, pigmentos
AgradecimentosPrimeiramente agradeço ao meu querido orientador Paulo Eugênio Oliveira, por ter aceitado me orientar e ter me recebido tão bem desde o início, inclusive oferecendo um espaço em sua sala para que eu pudesse estudar. Obrigada por dar atenção para minhas ideias, compartilhar seus livros, seu conhecimento e experiências, transmitir sua tranquilidade, paciência, e me impulsionar a sempre buscar o melhor, contribuindo assim para minha formação pessoal e profissional.Ao João Custódio meu sincero agradecimento por sua colaboração neste estudo.Tuas ideias e sugestões foram fundamentais para o desenvolvimento do trabalho. Obrigada pelas caronas até o campo, pela amizade, parceria, ensino em estatística e conhecimento compartilhado. Aos professores do estágio à docência Francismeire Telles, Vinícius Brito e Pietro Maruyama que tive o imenso prazer de conviver ao longo desse tempo. Pelos ensinamentos, conversas e palavras de apoio quando precisei. E à professora Renata do Carmo Oliveira por me mostrar o maravilhoso caminho da docência. Às amigas e colegas do mestrado, Ana Flávia, Andressa, Lilian e Larissa pelos ótimos momentos de convivência, alegrias e ajuda sempre que possível. Vocês tornaram os dias mais leves e divertidos. Ao amigo e colega Mateus Lacerda, por toda ajuda e disponibilidade desde o período de seleção para o mestrado e também por ter sido um ótimo professor de inglês. À Larissa Oliveira, por ter ajudado desde minha chegada em Uberlândia e ter me acompanhado em vários momentos do mestrado e da vida, tornando-se uma grande amiga. Às pessoas especiais que não estão perto fisicamente, mas que estiveram comigo durante esse período e sempre proporcionaram alegrias, apoio, diversão e iv 7 companheirismo. Nathália, Paola, Professora Raquel, Giovanna, Silvia, Emanuele, Jefferson, Pedro e Paulo. À amiga Meire Telles por proporcionar momentos especialmente incríveis e divertidos. Por dividir seu conhecimento, ensinamentos e principalmente pela confiança e amizade. Aos principais responsáveis por essa conquista, meus pais Anita e Celso. Por sempre me influenciarem a estudar e a seguir firme nos meus objetivos. Pela compreensão da distância e dos dias difíceis. E aos meus irmãos, Cristina e Elias Miguel, pelo incentivo e apoio durante esse percurso e pela amizade e companheirismo de todos os dias.
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