Streptococcus pneumoniae can be classified in more than 90 capsular types, as traditionally determined by serological methods and more recently by PCR-based techniques. Such methods, however, can be expensive, laborious or unable to accurately discriminate among certain serotypes. Therefore, determination of capsular types, although extremely important for epidemiological purposes and for estimating the impact of pneumococcal conjugate vaccines, is mainly restricted to research laboratories, being rarely performed in the clinical setting. In the present study, MALDI-TOF MS was evaluated as an alternative tool to characterize 416 pneumococcal isolates belonging to serotypes 6A, 6B, 6C, 9N, 9V or 14. For MALDI-TOF MS analysis, each isolate was submitted to an extraction protocol using formic acid and acetonitrile. Measurements were performed with a Bruker Microflex LT mass spectrometer using default parameters and generating spectra in the range of 2,000–20,000 m/z. Spectra were analyzed with the BioNumerics software v7.6. Isolates were mainly distributed according to the capsular type in a Neighbor Joining tree and serotypes investigated were successfully discriminated by the presence/absence of 14 selected biomarkers. The results suggest that MALDI-TOF MS is a promising alternative for typing pneumococcal strains, highlighting its usefulness for rapid and cost-effective routine application in clinical laboratories.
A case of a post-surgical patient who developed a fatal bloodstream infection caused by high-level vancomycin-resistant Enterococcus gallinarum is reported. The isolate was found to carry both the vanC1 and vanA genes. This is the first report of an invasive infection associated with a vanA E. gallinarum isolate in Brazil.
Os jalecos são um veículo potencial de transmissão microbiológica e seu uso inadequado traz riscos à saúde de profissionais e da população. O objetivo deste estudo foi o de conhecer as práticas de utiliza- ção e o perfil de contaminação dos jalecos brancos usados como uniforme por docentes e discentes do Centro Universitário Serra dos Orgãos (UNIFESO). Trata-se de um estudo quantitativo, transversal e exploratório. Respeitados os princípios éticos, aplicou-se questionário sobre o modo de uso e se realizou a análise microbiológica. Os dados foram analisados de forma manual, expressos em percentuais e demonstrados por meio de tabelas. Como resultado, 73 (setenta e três) jalecos estudados apresentaram variada flora, com predomínio de cocos Gram positivos. A região do punho, a mais contaminada, apresentou em média 23 UFC por campo. Quanto ao perfil de uso, a maioria, 42, (57%) tem idade entre 18 e 25 anos, 46 (63%) são do sexo feminino, 27 (37%) são acadêmicos de medicina do 3o período e apenas 13 (18%) são docentes. Sobre a frequência de troca do jaleco, 35 (48%) trocam uma vez por semana, entretanto com inadequado manuseio. Após uso, 36 (49%) não lavam o jaleco separadamente, 43 (58%) não usam produto desinfetante e 54 (73%) utilizam a passagem a ferro como medida complementar de contenção microbiológica. Conclui-se que há imperiosa necessidade de conscientização dos acadêmicos e docentes sobre adequados uso e manuseio do jaleco e importância da vestimenta na epidemiologia das infecções intra e extra-ambientes da saúde
Leptospirosis is a public health problem. Infection with pathogenic Leptospira occurs by exposure to many environments and is traditionally associated with occupational risk activities. Pulsed-field gel electrophoresis was used to investigate the epidemiological relatedness among Leptospira isolates. However, analysis by PFGE yielded inconclusive data as a result of extensive DNA degradation. This degradation can be significantly reduced by the inclusion of thiourea in the electrophoresis buffer, improving the analysis of DNA banding patterns.
INTRODUÇÃO: A leptospirose é uma zoonose endêmica, mundialmente distribuída, causada por bactérias do gênero Leptospira. Este gênero compreende espécies patogênicas e saprofíticas, com mais de 200 sorovares distintos, dificultando sua caracterização. A técnica de pulsed field gel electrophoresis tem sido empregada como uma ferramenta para auxiliar nesta caracterização. Os objetivos deste trabalho foram padronizar a técnica de PFGE, determinar os perfis moleculares das cepas de referência utilizadas pelo Laboratório de Referência Nacional para Leptospirose/Centro Colaborador da Organização Mundial de Saúde para Leptospirose e criar um banco de dados com estes perfis. MÉTODOS: Foram analisadas, por PFGE, dezenove cepas utilizando a enzima de restrição NotI. RESULTADOS: Cada cepa apresentou um perfil único que pode ser considerado como uma identidade genômica específica, com exceção dos sorovares Icterohaemorrhagiae e Copenhageni, cujos perfis foram indistinguíveis. CONCLUSÕES: Dessa forma, foi possível a criação de um banco de perfis moleculares que está sendo utilizado no Laboratório para a comparação e identificação de cepas isoladas de quadros clínicos.
Wohlfahrtiimonas chitiniclastica is an emerging zoonotic bacterium commensally living in larvae of particular flies. It has been associated with human and animal infections but never isolated from food. In the present study, a whole chicken carcass was rinsed in buffered peptone water which was then inoculated into BHI and the growth plated onto selective medium. Species identification was performed by MALDI-TOF MS. Those bacteria identified as W. chitiniclastica were subjected to 16S rRNA sequencing for confirmation and MEGA software was used to obtain their phylogenetic position. The findings of this study raise concerns regarding the abattoir, transport and stock practices of frozen meat carcasses and should be of interest with regard to microbiology, entomology and food production.
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