Hepatitis C is one of the most common social diseases in the world. The improvements in both the early diagnostics of the hepatitis C and the treatment of acute viremia caused by hepatitis C virus are undoubtedly an urgent task. In present work, we offered the micro- and nanotraps for the capturing of HCV. As a capturing moiety, we designed and synthesized in E. coli a fusion protein consisting of large extracellular loop of CD81 receptor and streptavidin as spacing part. The obtained protein has been immobilized on the surface of PLA-based micro- and nanoparticles. The developed trapping systems were characterized in terms of their physico-chemical properties. In order to illustrate the ability of developed micro- and nanotraps to bind HCV, E2 core protein of HCV was synthesized as a fusion protein with GFP. Interaction of E2 protein and hepatitis C virus-mimicking particles with the developed trapping systems were testified by several methods.
Резюме. Исследовали иммуногенные свойства белков, связанных с полимерными биодеградабельными на-ногранулами. Описан способ получения сферических наногранул размером 20 мкм путем полимеризации молочной кислоты, а также оптимальный способ их поверхностной активации. Активированные нанограну-лы использованы для ковалентного связывания модельного белка слияния, содержащего последовательности β 2 -микроглобулина человека и зеленого флуоресцентного белка. Показано, что наногранулы способны связы-вать 3 мкг белка на 1 мг полимера. По данным конфокальной микроскопии и электрофореза, белок прочно сорбируется на поверхности гранул. Мышей линии F1 (CBA x C57BL) внутрибрюшинно иммунизировали наногранулами, модифицированными белком слияния, а также эквивалентной смесью немодифициро-ванных наногранул и свободного белка слияния. Кровь забирали через 2 недели после трехкратной внутри-брюшинной иммунизации. Уровень антител к модельному белку определяли в сыворотке крови мышей при помощи иммуноферментного анализа. Опытная и контрольная группы включали по 39 животных. Досто-верность полученных результатов оценивали при помощи критерия Манна-Уитни. Показано, что средний уровень антител в контрольной группе в 1,8 раза превышал таковой в опытной группе. Разница оказалась достоверной (p < 0,004). Обсуждается значимость полученных результатов для создания ловушек, способных связывать вирусные частицы в крови и обеспечивать иммунный ответ.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.