Aos meus familiares por me incentivaram a não desistir no meio da jornada.Ao amigo Marcos Vinicius Nucci Capone que participou ativamente no meu processo de seleção para o ingresso nas atividades científicas.Ao amigo Flávio Sousa Silva pelas ideias trocadas.À amiga Letícia do Centro de Lasers e Aplicações (CLA) pela preciosa ajuda na disciplina de física nuclear À companheira Thais Cristina dos Anjos Sevilhano por estar sempre por perto nos momentos em que precisei.
Aos amigos do Centro de Biotecnologia do Instituto de Pesquisas Energéticas eNucleares-Arlete, Dra. Beatriz, Dra. Claudia, Caroline Elias, Dr. Daniel Perez, Daniela, Eliana, Eliza, Ed, Flávia, Fernanda Arthuso, Geiza, Hugo, Ivete, José Maria, Junqueira, Dra. Kayo, Karina Corleto, Laura, Mayara, Dra. Miriam, Dra. Marina, Mosca, Dra. Nanci, Neia, Gisleine, Sandra, Natan, Dr. Nélio, Neide, Dra. Olga, Dr. Patrick, Patrícia, Rute, Dra. Natália Malavasi, Dra. Renata, Rosangela, Dr. Vincent, Tamara, pelos bons momentos, colaboração, amizade e compreensão.À todos os funcionários do Centro de Biotecnologia que colaboraram direta ou indiretamente para a realização deste trabalho.Ao Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares, pela oportunidade de realizar este trabalho.Ao IPEN, FAPESP, CNPq, CAPES pelo apoio financeiro e técnico.Eu tentei 99 vezes e falhei, mas na centésima tentativa eu consegui, nunca desista de seus objetivos mesmo que esses pareçam impossíveis, a próxima tentativa pode ser a vitoriosa.
(Albert Einstein)No que diz respeito ao empenho, ao compromisso, ao esforço, à dedicação, não existe meio termo. Ou você faz uma coisa bem feita ou não faz. is in danger of disappearing due to exploitation by the fishing industry and increasing human presence in its natural habitat. In the present work the cDNAs of the gonadotropin α-subunit (ag-GTH) and of follicle-stimulating hormone β subunit (ag-FSHβ) were isolated and cloned for the first time. As a consequence, a better understanding of the diversity and evolution of this glycoprotein in fish and its future biotechnological synthesis for reproductive and alimentary purposes will be possible. Both cDNAs of ag-GTHα and ag-FSHβ have been synthesized via reverse transcriptase reaction (RT-PCR) and polymerase chain reaction (PCR) using as a template total RNA extracted from A. gigas pituitary glands. Ag-GTHα-subunit has a coding sequence (open reading frame, ORF) of 348 bp, corresponding to a 115 amino acid protein, with a putative signal peptide of 24 aminoacids and a mature peptide of 91 amino acids. Ten cysteine residues, responsible for the formation of five disulfide linkages, two N-glycosylation sites and three proline residues were found highly conserved when compared to other fish species. A comparison based on the amino acid sequence of the GTHα-subunit from 38 different species of fish showed high identity of A. gigas with members of the following orders: Acipenseriformes, Siluriformes and Cypriniformes (87.1-89.5%), while the lowest identity was found with Gadiformes and Cyprinodontiformes (55...