Self‐assembling surface layer (SL) proteins of bacteria have been widely studied, in particular their use as molecularly defined, 2D coatings of technical surfaces. An important prerequisite is the availability of a sufficient amount of protein. However, a detailed and optimized protocol for the complete SL extraction is so far not available. Here, we describe the complete purification and reassembly procedure of an SL protein of Lysinibacillus sphaericus NCTC 9602, starting from the cultivation of cells, the preparation and purification of SL proteins up to the long‐term storage and in vitro self‐assembly of the proteins. All crucial steps of the procedure are assessed by different microscopic techniques, such as light microscopy, atomic force microscopy, and scanning electron microscopy as well as by SDS‐PAGE as a biochemical method. We demonstrate that storage of the protein in the presence of sodium azide or upon lyophilization allows the preservation of the self‐assembly properties for at least 9 years. Additionally, we describe a method allowing the extraction of intact flagella with lengths in the range up to 4 μm. Flagella may have applications in bio‐nanotechnology, for example as templates for metallic nanowires.
Zusammenfassung
Einleitung Die perioperative Myokardischämie (PMI) stellt eine schwerwiegende postoperative Komplikation dar. Insbesondere die Aortenchirurgie gehört zu den Hochrisikoeingriffen in
Bezug auf das kardiale Operationsrisiko. Ziel dieser Arbeit ist es, die Krankheitsverläufe von Patienten mit PMI nach elektiven Aortenaneurysmen-Operationen zu untersuchen.
Patienten und Methoden Es handelt sich um eine retrospektive Datenanalyse von elektiv im Zeitraum Januar 2005 bis Januar 2012 in der Klinik für Gefäßchirurgie und Endovaskuläre
Chirurgie des Universitätsklinikums Heidelberg an der Aorta wegen Aneurysma operierten Patienten. Die Diagnose PMI wurde anhand einer Erhöhung des Serumtroponins gestellt. Es erfolgte eine
Charakterisierung der PMI bezüglich des Zeitpunkt ihres perioperativen Auftretens, der klinischen Symptomatik sowie Besonderheiten der durchgeführten Diagnostik. Des Weiteren wurden
Therapie-, Entlass- und Verlegungsmanagement analysiert.
Ergebnisse Insgesamt wurden im angegebenen Zeitraum 863 Patienten einem elektiven Aorteneingriff unterzogen. Eine PMI wurde bei 31 (3,6%) Patienten beobachtet, wobei in 21 von 31
(67,7%) Fällen eine konventionelle Operation erfolgt war. Bei 24 Patienten (77,4%) trat eine PMI während der ersten 3 postoperativen Tage auf. Mehr als die Hälfte der Patienten (16/31) waren
klinisch asymptomatisch, in 77,4% der Fälle (24/31) war das Elektrokardiogramm unauffällig. In 25,8% der Patienten (8/31) lag der primäre Serumtroponinwert im Normbereich. Eine rein
medikamentöse Therapie erfolgte in 17 Fällen (54,8%). Eine interventionelle Behandlung im Sinne einer Herzkatheteruntersuchung wurde in 12 Fällen (38,7%) durchgeführt, bei 2 (6,5%) Patienten
wurde eine notfallmäßige aortokoronare Bypassanlage durchgeführt. Insgesamt 14 (45,1%) Patienten konnten direkt nach Hause entlassen werden, weitere 14 (45,1%) Patienten wurden zur
Weiterbehandlung der PMI in ein Akutkrankenhaus (einschließlich hausinterne Verlegung) verlegt. Zwei Patienten verstarben während des Krankenhausaufenthalts an Multiorganversagen.
Schlussfolgerung Die PMI ist eine häufige Komplikation im Rahmen elektiver Aorteneingriffe. Die Diagnostik der PMI kann bei gering ausgeprägter/okkulter Klinik im Rahmen der
Intensivtherapie erschwert sein. Aufgrund der potenziell schwerwiegenden Folgen sollte eine Herzenzymdiagnostik frühzeitig eingeleitet werden, um eine zeitnahe kardiologische Therapie zu
ermöglichen.
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