Introducción. El cultivo in vitro permite el mejoramiento de Rosa hybrida, no obstante, la sobrevivencia de plántulas es difícil durante la aclimatación en sustrato sólido, el proceso conlleva a que las plantas presenten malfuncionamiento de los estomas y por ende, baja asimilación del dióxido de carbono. Objetivo. El objetivo de esta investigación fue evaluar tres medios de enraizamiento in vitro y diferentes sustratos para la aclimatación ex vitro mediante medios sólidos y líquidos de la rosa transgénica. Materiales y métodos. Se utilizaron plantas de rosa (Rosa hybrida L.) cv. Classy transgénica, a partir de embriones somáticos, cultivadas in vitro durante dos años y se sometieron a enraizamiento in vitro y ex vitro, seguido de aclimatación. Para enraizar in vitro tres medios diferentes y para los experimentos ex vitro, se utilizaron siete combinaciones diferentes de sustratos. El estudio se llevó a cabo de agosto de 2012 a enero de 2013 en el Centro de Investigación y Asistencia de Tecnología y Diseño del Estado de Jalisco, A.C. Resultados. Los resultados de los experimentos in vitro y ex vitro demostraron que los mejores resultados se obtuvieron en el medio MS adicionado con sacarosa (30 g/l) y carbón activado (0,5 g/l), y el sustrato compuesto de turba de musgo (70%) y perlita (30%), con 20% de enraizamiento. El sustrato con 25% de humus produjo el mayor contenido de clorofila, sin embargo, no hubo enraizamiento. Los tratamientos con sustrato sólido mostraron mayor porcentaje de sobrevivencia de plántulas, alto promedio de hojas por planta, alto contenido de clorofila y buena calidad del brote en comparación con los hidropónicos. La sobrevivencia en estos últimos fue de 40% sin aireación y 0% con aireación a los dieciséis días de establecimiento; ambos tratamientos no presentaron enraizamiento. Tratamientos sin aireación no mostraron enraizamiento. Conclusión. Mayores contenidos de materia orgánica en sustrato y la presencia de aireación en una solución hidropónica pueden no garantizar una mayor sobrevivencia durante la aclimatación. Los resultados suponen una optimización en la aclimatación de las plantas y el cultivo hidropónico de rosa.
Chromosome visualization is a technique used in many modern applications such as classification, in situ hybridization and genetic improvements, etc. Algal biotechnology grew steadily into an important global industry. Dunaliella salina (Teodoresco, 1905) is a model microalgae having tremendous potential for production of carotenoids for commercial use. The chromosomal size of microalgae is very small, and techniques for karyotype analysis are still unclear. In this work, it tried to simplify the techniques and establish a detailed step-by-step protocol using Dunaliella salina as a model and proved the technique in Tetraselmis chuii (Stein, 1878) which can be reproducible. The most important points were considered in the techniques as metaphase resting, fixation, dehydration and rehydration, hydrolysis and preparation of chromosomes for microscopic observations. During standardization, various concentration and duration of colchicine treatment were tested for metaphase arrest, replaced ethanol for methanol during fixation and dehydration, used a rehydration solution before hydrolysis and observed acid, base and enzymes impact on partial hydrolysis process of the cells. Colchicine treatment was found to be species dependent, and optimum concentration was 0.1% for 6 h (h) for Dunaliella salina, and methanol proved better to dehydrate for the preservation of algal cells. The low 500 mM concentration of HCl, 30 mM KOH and 5% enzyme proved to be suitable for the hydrolysis process for algal chromosome visualization. The technique permits clear visualization and counting of the smallest chromosome from unicellular algae. This technique described detail step by step without ambiguity and steps can be adapted on a species-specific manner.
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