The thrombospondin related adhesion protein (TRAP) is

Characterization of the insecticidal and hemolytic activity of solubilized crystal proteins of

No abstract

Mosquitoes are vector of serious human and animal diseases, such as malaria, dengue, yellow fever, among others. The use of biological control agents has provide an environmentally safe and highly specific alternative to the use of chemical insecticides in the control of vector borne diseases. Bacillus thuringiensis and B. sphaericus produce toxic proteins to mosquito larvae. Great progress has been made on the biochemical and molecular characterization of such proteins and the genes encoding them. Nevertheless, the low residuality of these biological insecticides is one of the major drawbacks. This article present some interesting aspects of the mosquito larvae feeding habits and review the attempts that have been made to genetically engineer microorganisms that while are used by mosquito larvae as a food source should express the Bacillus toxin genes in order to improve the residuality and stability in the mosquito breeding ponds.

La caracterización de la actividad hemolítica e insecticida de las proteínas del cristal de Bacillus thuringiensis subsp. medellin (Bt­med) se realizó y se comparó con las proteí­nas solubilizadas de las cepas 1884 de B. thuringiensis subsp. israelensis (Bti) y PG­14 de B. thuringiensis subsp. morrisoni (Btm). En general, a valores de pH ácidos, la solubilización de las inclusiones cristalinas paraesporales (ICP) fue menor que a valores de pH alcalinos. La actividad larvicida demos­trada por las ICP de Btmed indica que la solubilización óptima tuvo lugar a un valor de pH de 11,3, en Bti a un pH entre 5,03 y 11,3, mientras que en Btm a un pH entre 9,05 y 11,3. La actividad hemolítica de estas pro­teínas en glóbulos rojos de carnero fundamen­talmente se presentó a un valor de pH de 11,3. Electroforesis en gel de poliacrilamida bajo condiciones denaturantes indica que la solu­bilización de los ICP en todas las cepas de Bt probadas tuvo lugar a valores alcalinos de pH entre 9,05 y 11,3. Se prepararon soluciones enriquecidas de las proteínas de Btmed y se separaron por exclusión de tamaño en una columna de Sephacryl S-200. Se observaron tres picos de proteínas en el cromatograma. En el primer pico se detectaron dos proteínas con pesos moleculares entre 90 y 100 kDa. Estas proteínas aparentemente no se presen­tan en otras subespecies de Bt. En el segundo y tercer pico se observaron proteínas de 68 y 28-30 kDa, respectivamente. Por separado, las proteínas de cada pico mostraron toxicidad en larvas de primer instar de Culex quinquefas­ciatus. Los resultados sugieren que la proteí­nas de 90-100 kDa son un componente muy importante de las toxinas de Btmed. Las com­binaciones de las proteínas de 68 y 28-30 kDa mostraron una mayor toxicidad que las otras mezclas. Cuando se evaluaron las proteínas de Bti con antisueros preparados contra las proteínas tóxicas de Btmed se encontró que la única proteína que mostró reacción cruzada fue la de 28 kDa de Bti. Estos datos sugieren que Btmed podría representar una alternativa para los programas de control de mosquitos en caso de que se presente resistencia a las toxinas de Bti.