Drosophila Pnut protein belongs to the family of septins, conservative GTPases participating in cytokinesis and many more other fundamental cellular processes. Because of their filame tous appearance, membrane association and functions, septins are considered as the fourth component of the cytoskeleton, along with actin, microtubules and intermediate filame ts. However, septins are much less studied than the other cytoskeleton elements. We had previously demonstrated that deletion of the peanut (pnut) gene leads to mitotic abnormalities in somatic cells. The goal of this work was to study the role of pnut in Drosophila spermatogenesis. We designed a construct for pnut RNA interference allowing pnut expression to be suppressed ectopically. We analyzed the effect of pnut RNA interference on Drosophila spermatogenesis. The most sensitive to Pnut depletion were germ line cells at the earliest stages of spermatogenesis: the suppression of pnut expression at these stages leads to male sterility as a result of immotile sperm. Testes of those sterile males did not show any significa t meiotic defects; axonemes and mitochondria were normal. We also analyzed the effect of mutations in Pnut conservative domains on Drosophila spermatogenesis. Mutations in the GTPase domain resulted in cyst elongation defects. Deletions of the C-terminal domain led to abnormal testis morphology. Both GTPase domain and C-terminal domain mutant males were sterile and produced immotile sperm. To summarize, we showed that Pnut participates in spermiogenesis, that is, late stages of spermatogenesis, when major morphological changes in spermatocytes occur.Key words: Drosophila; RNA interference; spermatogenesis; septin; peanut; Pnut.Белок Pnut дрозофилы принадлежит к семейству септинов -консервативных ГТФаз, участвующих в цитокинезе и других фундаментальных клеточных процессах. В связи с их способностью формировать комплексы, которые могут затем полимеризоваться в филаменты, а также на основе их взаимодействия с клеточной мембраной и выполняемыми функциями септины стали рас-смат ри вать как четвертую составляющую цитоскелета наряду с актином, микротрубочками и промежуточными филаментами. Однако в отличие от других цитоскелетных компонентов септины изучены гораздо слабее. Ранее нами было показано, что удаление септина, кодируемого геном peanut (pnut), в соматических тканях приводит к аномалиям митоза. Задачей данной работы было выяснение роли pnut в сперматогенезе дрозофилы. Нами была получена плазмидная конструкция для РНК-интерференции pnut, позволяющая эктопически подавлять экспрессию данного гена. Был исследован сперматогенез при подавлении экспрессии гена pnut при помощи РНК-интерференции. Установлено, что чувствительными к РНК-интерференции гена pnut являются генеративные клетки на самых ранних этапах сперматогенеза: снижение уровня экспрессии данного гена в генеративных клетках семенников на этих стадиях приводило к стерильности самцов, причиной которой является неподвижность спермиев. При этом в семенниках таких стерильных самцов не обнаруж...
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.
hi@scite.ai
10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614
Henderson, NV 89052, USA
Copyright © 2024 scite LLC. All rights reserved.
Made with 💙 for researchers
Part of the Research Solutions Family.