Objectives: Downregulation of DIRAS3 (DIRAS family, GTP-binding Ras-like 3) is related to ovarian and breast cancer progression. A possible mechanism that silences this gene is the promoter region DNA methylation. The potential reversibility of this epigenetic mechanism makes it more attractive candidate for new mode of cancer treatment. DIRAS3 regulates cell cycle, tumor dormancy and inhibits cancer cell growth and motility, all of which may indirectly depend on interaction with STAT3 (Signal Transducer and Activator of Transcription 3) classified as a potential oncogene. The restoration of DIRAS3 expression could inhibit cell proliferation and invasiveness. Material and methods:Human ovarian carcinoma cell line (A2780) and human breast cancer cell line (MCF7) were exposed to two DNA methyltransferase inhibitors (DNMTi): decitabine (5-aza-2'-deoxycytidine) [25 μM and 12.5 μM] and RG108 [150 μM and 100 μM]. In vitro migration changes of cancer cells were examined with wound healing assay. After 7 days of DNMTi treatment cells were harvested and DNA and RNA was isolated. The methylation status of the promoter sequences of DIRAS3 and STAT3 genes was determined using methylation specific PCR (MS-PCR). Level of target genes' expression was quantified using quantitative reverse transcription PCR (QRT-PCR). Results and conclusions:The in vitro wound healing assay showed changes in the migration rate of both adherent cell lines after DNMTi treatment compared to the untreated cells. Relative balance between methylated and unmethylated variants of DIRAS3 after MS-PCR was shifted towards unmethylated version after DNMTi treatment in A2780 cells. Statistically significant dose dependent effect of decitabine and RG108 on DIRAS3 expression in A2780 cells was observed.
ST R ES ZCZ E NI EModyfikacje epigenetyczne są zmianami regulującymi ekspresję genów. Spośród tych modyfikacji metylacja DNA w regionach promotorowych genów jest najlepiej poznaną zmianą. Za metylację DNA odpowiada rodzina metylotransferaz DNA. Proces ten jest odwracalny w wyniku reakcji demetylacji, w których pośrednią rolę odgrywają białka TET. Hipometylacja DNA oraz hipermetylacja regionów promotorowych genów bogatych w wyspy CpG należy do epigenetycznych mechanizmów powszechnie występujących w wielu typach nowotworów. Epigenetyczny mechanizm transformacji nowotworowej związany jest nie tylko ze zmianami w poziomie metylacji poszczególnych onkogenów czy też genów supresorowych, ale także z potranslacyjnymi modyfikacjami białek histonowych wymuszających zmiany w strukturze chromatyny. Określone modyfikacje, takie jak: metylacja, acetylacja, fosforylacja, ubikwitynacja, biotynylacja, ADP-rybozylacja oraz sumoilacja, mogą wpływać na kondensację chromatyny oraz na białka i kompleksy enzymatyczne decydujące o dostępności DNA, co z kolei wpływa na upakowanie, replikację, rekombinację, procesy naprawy oraz ekspresję DNA. W mechanizmach modulacji ekspresji genów zaangażowanych w procesy prowadzące do rozwoju nowotworów znaczącą rolę odgrywają dwa główne rodzaje małych interferencyjnych RNA siRNA oraz miRNA. Uzyskiwane dane z prowadzonych badań pokazują, że mechanizmy epigenetyczne uczestniczą w procesach prowadzących do rozwoju nowotworów, a poszukiwanie epigenetycznych biomarkerów może być przydatne w terapii nowotworów. S Ł O W A K L U C Z O W Ezmiany epigenetyczne, nowotwory, metylacja DNA, białka histonowe, mikroRNA, ekspresja genów
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.
hi@scite.ai
10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614
Henderson, NV 89052, USA
Copyright © 2024 scite LLC. All rights reserved.
Made with 💙 for researchers
Part of the Research Solutions Family.