Miltefosine (MT) is an alkylphospholipid approved for breast cancer metastasis and visceral leishmaniasis treatments, although the respective action mechanisms at the molecular level remain poorly understood. In this work, the interaction of miltefosine with the lipid component of stratum corneum (SC), the uppermost skin layer, was studied by electron paramagnetic resonance (EPR) spectroscopy of several fatty acid spin-labels. In addition, the effect of miltefosine on (i) spherical lipid vesicles of 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine (DPPC) and (ii) lipids extracted from SC was also investigated, by EPR and time-resolved polarized fluorescence methods. In SC of neonatal Wistar rats, 4% (w/w) miltefosine give rise to a large increase of the fluidity of the intercellular membranes, in the temperature range from 6 to about 50°C. This effect becomes negligible at temperatures higher that ca. 60°C. In large unilamelar vesicles of DPPC no significant changes could be observed with a miltefosine concentration 25% molar, in close analogy with the behavior of biomimetic vesicles prepared with bovine brain ceramide, behenic acid and cholesterol. In these last samples, a 25 mol% molar concentration of miltefosine produced only a modest decrease in the bilayer fluidity. Although miltefosine is not a feasible skin permeation enhancer due to its toxicity, the information provided in this work could be of utility in the development of a MT topical treatment of cutaneous leishmaniasis.
No abstract
Cellular membranes have relevant roles in processes related to proteases like human kallikreins and cathepsins. As enzyme and substrate may interact with cell membranes and associated co-factors, it is important to take into account the behavior of peptide substrates in the lipid environment. In this paper we report an study based on energy transfer in two bradykinin derived peptides labeled with the donor-acceptor pair Abz/Eddnp (ortho-aminobenzoic acid/N-[2,4-dinitrophenyl]-ethylenediamine). Time-resolved fluorescence experiments were performed in phosphate buffer and in the presence of large unilamelar vesicles of phospholipids, and of micelles of sodium dodecyl sulphate (SDS). The decay kinetics were analyzed using the program CONTIN to obtain end-to-end distance distribution functions f(r). Despite of the large difference in the number of residues the end-to-end distance of the longer peptide (9 amino acid residues) is only 20 % larger than the values obtained for the shorter peptide (5 amino acid residues). The proline residue, in position 4 of the bradykinin sequence promotes a turn in the longer peptide chain, shortening its end-to-end distance. The surfactant SDS has a strong disorganizing effect, substantially broadening the distance distributions, while temperature increase has mild effects in the flexibility of the chains, causing small increase in the distribution width. The interaction with phospholipid vesicles stabilizes more compact conformations, decreasing end-to-end distances in the peptides. Anisotropy experiments showed that rotational diffusion was not severely affected by the interaction with the vesicles, suggesting a location for the peptides in the surface region of the bilayer, a result consistent with small effect of lipid phase transition on the peptides conformations.
André, pelo companheirismo, compreensão e apoio, sempre. iv AGRADECIMENTOS Ao Professor Amando, em primeiro lugar, pela confiança depositada em mim e pela oportunidade oferecida, pela orientação e apoio, e além de tudo pela paciência e compreensão com as minhas limitações pessoais, permitindo que eu concluísse esse trabalho. À Giusi, professora de italiano, e amiga, pelos jantares e conversas descontraídas. À Cássia, ex-coleguinha de laboratório, pelas lições e dicas nos experimentos, discussões de resultados durante minha iniciação na ciência, e amiga, pelas aulas de italiano e sessões de terapia gratuitas, além das saídas para comer.Ao Gustavo Pudimm, amigo e conselheiro, pelas ajudas com o computador, idas à cantina, fofocas inocentes, caminhadas na pista do CEFER e a ajuda na correção e impressão desse trabalho.Ao Jorge, pelas fofocas e conversas intermináveis e sem conclusão, pelas aulas de "portuñol", e pelos cafés diários.Ao Sérgio, pelas risadas e empolgação, e pelo apoio técnico com o computador. À Ana, pela correção do texto dessa dissertação, a companhia, os papos sem-fim, e pelos passeios sem rumo e sem objetivo.Ao Danilo, pelas músicas finlandesas e pelas estórias divertidas.Aos coleguinhas do Grupo de Fotobiofísica, em especial aos alunos e ex-alunos do professor Amando: Wallance, Gabriela, Larissa "Morango", Ana Paula Ao professor Iouri e seus alunos: Andrea, Érika, Jefferson, pelas conversas, cafés e almoços no bandex. Aos companheiros de bandejão, já citados acima, sem os quais eu não almoçaria todos os dias, sozinha. À Marina Ness, pela companhia de viagem, as caminhadas sem fim, os lanches do Mc Donald's, as fotos, a paciência com minha teimosia. Aos meus tios Paulo e Elza, pelo presente de formatura, a oportunidade de viagem e pelo carinho dedicado. À Stela e à Maristela, pela amizade e, apesar da distância, o apoio. À Ivana, pelas confissões e a disposição em me ouvir em qualquer momento. À minha família, que considero essencial, em especial ao meu avô, pela admiração e carinho, mas principalmente à minha avó, pela ajuda na minha criação e pelo apoio irrestrito. v Aos meus pais, que são meu apoio, meu exemplo, minha força. Sem eles não teria tido a oportunidade de estar escrevendo essa dissertação hoje. Ao meu irmão, pelas brigas sempre terminadas com um abraço e pelos "papos-cabeça" e conselhos nos momentos difíceis. Ao André, meu eterno namorado, sempre companheiro, amigo, paciente, apoiando os meus sucessos e evitando meus fracassos. Aos meus sogros (futuros), pelo apoio e pelo carinho. Aos técnicos Carlão e Adriano pelas dúvidas tiradas na preparação das amostras. À Ana Paula Ramos, pela colaboração nos experimentos de medida de tensão superficial e na análise de resultados. À Professora Bete Zaniquelli, pela utilização dos equipamentos do Laboratório de Físico-Química do Departamento de Química da USP em Ribeirão Preto e pelas dicas e discussões dos experimentos e dos resultados. Ao Professor Ulises Acuña, pelo análogo fluorescente sintetizado e pela conversa e direcionamento dos experim...
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.
hi@scite.ai
10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614
Henderson, NV 89052, USA
Copyright © 2024 scite LLC. All rights reserved.
Made with 💙 for researchers
Part of the Research Solutions Family.