Epigenetic engineering shows H3K4me2 is required for HJURP targeting and CENP-A assembly on a synthetic human kinetochoreHere, centromeric histone marks on a human artificial chromosome are found to resemble the chromatin landscape in transcribed genes, and selective manipulation shows them to govern the incorporation of the centromere-specifying CENP-A histone variant.
Assessment of protein dynamics in living cells is crucial for understanding their biological properties and functions. The SNAP‐tag, a self labeling suicide enzyme, presents a tool with unique features that can be adopted for determining protein dynamics in living cells. Here we present detailed protocols for the use of SNAP in fluorescent pulse‐chase and quench‐chase‐pulse experiments. These time‐slicing methods provide powerful tools to assay and quantify the fate and turnover rate of proteins of different ages. We cover advantages and pitfalls of SNAP‐tagging in fixed‐ and live‐cell studies and evaluate the recently developed fast‐acting SNAPf variant. In addition, to facilitate the analysis of protein turnover datasets, we present an automated algorithm for spot recognition and quantification. Curr. Protoc. Cell Biol. 55:8.8.1‐8.8.34. © 2012 by John Wiley & Sons, Inc.
<p><strong>RESUMEN. </strong><strong><em>Antecedentes</em></strong>: El gen noggin (Nog) es uno de los antagonistas de las proteínas morfogénicas óseas (BMPs) y tiene como función modular la señal de estas. Cuando su acción no es efectiva, ocurre una actividad excesiva de las BMPs que causa serias anormalidades en el desarrollo. Estudios han demostrado que Nog es crítico para la condrogénesis, osteogénesis y formación de las articulaciones y parece estar involucrado con el crecimiento de estructuras craneofaciales, entre ellas, la mandíbula. Existen en la literatura pocos estudios acerca de la relación entre Nog y su papel en el desarrollo mandibular. <strong><em>Objetivo</em></strong>: Esta revisión hace una descripción de los factores moleculares que intervienen en la formación de la mandíbula. Se hace un énfasis principalmente en las BMPs, su función, vía de señalización y cómo Nog regula esta vía, para conducir a formular una hipótesis del posible papel de este gen en el desarrollo mandibular y cómo su alteración podría llegar a causar el micrognatismo mandibular.</p><p><strong>ABSTRACT. </strong><strong><em>Background</em></strong>: Noggin (Nog) gene is one of the antagonists of bone morphogenic proteins (BMPs) and its function is to modulate the signs. When Nog’s action is ineffective, an excessive activity of BMPs occur causing serious developmental abnormalities. Studies have shown that Nog is critical for chondrogenesis, osteogenesis, and joint training and appears to be involved in the growth of craniofacial structures, including the jaw. There are in the literature, few studies about the relationship between Nog and its role in the mandibular development. <strong><em>Purpose</em></strong>: This article reviews the molecular factors involved in the jaw development, focusing primarily on BMPs, their function, signaling pathway as Nog regulates this path. It leads to hypothesize the Nog’s possible role on the mandibular development and how its alteration can cause mandibular micrognatism.</p><p><strong>RESUMO. </strong><strong><em>Antecedente</em></strong>: O gene Noggin (Nog) é um dos antagonistas das proteínas morfogênicas ósseas (BMPs) e tem como função modular o sinal das mesmas. Quando sua ação não é efetiva, ocorre uma atividade excessiva das BMPs causando sérias anormalidades no desenvolvimento. Estudos veem demonstrando que Nog é essencial para a condrogênesis, osteogênesis, formação das articulações e parece estar envolvido com o crescimento de estruturas craniofaciais, incluindo a mandíbula. Na literatura há poucos estudos sobre a relação entre Nog e seu papel no desenvolvimento mandibular. <strong><em>Objetivo</em></strong>: Esta revisão fornece uma descrição do desenvolvimento da mandíbula, os fatores moleculares envolvidos na sua formação, com ênfases principalmente nas BMPs, sua função, via de sinalização e como Nog regula esta via, levando-nos a formular uma hipóteses do possível papel de Nog no desenvolvimento mandibular e como sua alteração poderia causar micrognatismo mandibular.</p><p> </p>
La familia Phyllostomidae presenta una gran diversidad de dietas que requieren adaptaciones fisiológicas para metabolizar los diferentes alimentos que consumen. En frugívoros de la familia Pteropodidae e insectívoros de las familias Vespertilionidae y Molossidae se han reportado proteínas salivales distintivas de cada dieta. Por ello, se planteó determinar moléculas salivales asociadas con las diferentes dietas de los filostómidos. Los organismos se encontraban en ayuno al tomar la muestra, a la cual se le adicionó un buffer inhibidor de proteasas y se almacenó a -20°C hasta su uso. Las proteínas se identificaron por medio de SDS-PAGE y se evaluó si su presencia en los individuos estaba asociada con la historia evolutiva de las especies. Además, se determinó si las proteínas encontradas estarían relacionadas con la dieta del individuo. Se capturaron 15 especies con dietas nectarívora, insectívora y frugívora. Se encontró una proteína de 60kDa en filostómidos herbívoros y una de 50kDa en vespertilionidos y filostómidos con alto consumo de insectos. Además, se registró una proteína de 30kDa en todos los filostómidos y en 2 de las 3 especies de vespertilionidos. Los análisis indicaron que la presencia de las proteínas no estaría relacionada con la cercanía filogenética y que, para las proteínas de 30 y 50kDa, tampoco sería explicada por la dieta como sí ocurre con la proteína de 60kDa. Los filostómidos habrían retenido de su dieta ancestral insectívora la proteína de 30kDa y adquirido evolutivamente la de 60kDa para procesar plantas y lograr la amplia diversificación ecológica que presentan.
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