The aim of this study was to evaluate the effect of age of Nellore (Bos indicus) donors on the efficiency of in vitro embryo production (IVEP) and pregnancy rate. Thirty‐six donors, including 11 female calves (13 ± 0.61 months), 17 prepubertal heifers (25 ± 0.78 months) and 8 cows (83 ± 28 months), were submitted to 3 procedures of ovum pickup (OPU) on random days of the estrous cycle at intervals of 21 days. Caspase‐3 and IGFBP2 were quantified in oocytes and blastocysts for the evaluation of oocyte and embryo quality. The produced embryos were vitrified (n = 445) and transferred to synchronized recipients. Cows produced a larger number of follicles (cows: 54.5 ± 6.2; calves: 20.0 ± 0.57; prepubertal heifers: 20.8 ± 0.46), total oocytes (cows: 45.97 ± 7.22; calves: 28.93 ± 6.14; prepubertal heifers: 27.21 ± 4.94) and cleaved oocytes (cows: 21.14 ± 4.22; calves: 13.09 ± 3.72; prepubertal heifers: 12.4 ± 3.19). The cleavage rate was similar between age categories; however, cows tended (p < 0.07) to produce a larger number of blastocysts (9.74 ± 2.26) per OPU than calves (5.57 ± 1.99) and prepubertal heifers tended to have a higher blastocyst yield (35.4%) than calves (27.1%) (p < .07). The expression levels of IGFBP2 and caspase‐3 were higher in oocytes derived from calves compared to the other two categories. The pregnancy rate was higher in calves (43.1%) and cows (40.4%) than in prepubertal heifers (33.8%) (p = .03). Despite the larger numbers of follicles and viable oocytes in cows, the blastocyst production results and pregnancy rates obtained indicate that the use of young females as oocyte donors in IVEP is feasible and may contribute to reduce the generation interval.
ResumoO estudo teve por objetivo avaliar a possível influência do touro doador de sêmen sexado na taxa de formação de blastocistos e resultados de concepção de embriões produzidos in vitro. Para o estudo foram utilizadas 29 vacas holandesas doadoras de embriões oriundas de uma única fazenda pertencente à iniciativa privada. As doadoras foram selecionadas de acordo com sua produção leiteira, histórico reprodutivo e mérito genético e foram submetidas à aspiração folicular e posterior seleção de ovócitos viáveis, que foram fertilizados com material genético sexado de fêmea de 7 touros da raça Gir. A taxa de formação de embriões no cultivo in vitro e índices de concepção pós-transferência de embriões (TE) foram computados e analisados através de teste Qui-quadrado utilizando software Graph Pad Prism Instat 5.0®, considerando nível de significância de 5%. Foi observada grande variação na taxa de produção de embriões, que oscilou de 16,09% a 47,83%, com média de 31,97±8,57, havendo tendência de influência do touro/sêmen sexado sobre as taxas de formação de blastocistos (P=0.0659). Na taxa de concepção dos embriões transferidos observou-se efeito significativo exercido pelo sêmen sexado (p=0.0230), com resultados oscilando entre 12,5% a 77,78%, na dependência do touro doador do sêmen. Conclui-se que existe variação nas taxas de produção embrionária e na fertilidade de embriões produzidos in vitro de acordo com o touro doador do sêmen sexado. Sêmen bovino sexado: A produção in vitro de embriões pode ser influenciada pelo touro doador do material genético? Palavras AbstractThe objective of this study was to evaluate the influence of bull donor of sexed semen on in vitro blastocysts formation and pregnancy rates on bovine embryo transfer (ET) programs. For this experiment, 29 Holstein embryo donor cows from a single farm were selected based on milk production, reproductive history and genetic merit. The cows were submitted to follicular aspiration and selection of viable oocytes, which were fertilized with sexed semen from 7 Gir bulls. The rates of embryo production and the conception after ET were computed and analyzed using the Chi-square test (Graph Pad Prism Instat 5.0® software; P<0.05). A significative variation was observed on the embryo production rates, ranging from 16.09% to 47.83%, with a mean of 31.97 ± 8.57. Tendency of bull/sexed semen influence was observed in the in vitro blastocyst formation (P=0.0659), and bull effect was observed for the conception rates of transferred embryos (P=0.0230), with the results ranging from 12.5% to 77.78%, depending on the donor of genetic material. In conclusion, there is huge variation in vitro embryo production rates and in the fertility index after ET, according to the donor of bull sexed semen.Keywords: Bull; Embryo; In vitro fertilization; Sexed semen. IntroduçãoAs biotecnologias da reprodução são utilizadas como ferramenta para acelerar a produção, aumentar a eficiência reprodutiva além de promover o melhoramento genético do rebanho. A eficiência reprodutiva dos anim...
The objective of this study was to evaluate characteristics of the testicular parenchyma and vascular parameters of the pampiniform plexus obtained by ultrasound, semen quality parameters, and sperm freezability in Nellore bulls classified based on residual feed intake (RFI). Twenty-seven bulls (21.82±0.88 months of age) evaluated for feed efficiency were sampled for the study, including 15 with low RFI (−0.592±0.09 kg dry matter/day) and 12 with high RFI (0.792±0.10 kg dry matter/day). In ultrasound and Doppler assessment, the most efficient animals (low RFI) showed higher pulsatility and resistive indexes, as well as a tendency towards greater heterogeneity of the testicular parenchyma (0.625±0.032 vs. 0.508±0.032, 1.012±0.072 vs. 0.802±0.072, and 12.9±0.96 vs. 10.2±0.96, respectively, for low vs. high RFI). However, these animals tended to have lower peak diastolic velocity (5.19±0.50 for low RFI vs. 6.54±0.50 for high RFI). Analysis of fresh semen showed a lower percentage of minor defects in low RFI animals (2.67±1.19%) compared with high RFI animals (8.10±1.19%), without differences in the other parameters in fresh or thawed semen and after thermoresistance testing. Evaluation of flow cytometry parameters showed a higher quality of mitochondrial respiration in semen samples of low RFI animals (22.04±2.50%) compared with high RFI animals (12.29±2.71%). Therefore, although RFI exerts an effect on the Doppler parameters of the pampiniform plexus, it is not sufficient to affect the quality of fresh or thawed semen.
Diversos métodos podem ser utilizados para a determinação da concentração espermática, o que pode gerar variabilidade em estimativas conduzidas através de diferentes técnicas. Dentre as diferentes opções, o NucleoCounter® (NC) se destaca como método de maior acurácia para determinação da concentração de espermatozoides; no entanto, o alto custo do equipamento e seus insumos torna a técnica pouco acessível a muitos laboratórios de andrologia. Nesse contexto, o objetivo do trabalho foi comparar a sensibilidade de diferentes métodos para a determinação da concentração de espermatozoides bovinos. Para o estudo foram selecionados 120 ejaculados de diferentes touros. Após a coleta cada ejaculado foi submetido a análise de concentração espermática em três métodos distintos, NucleoCounter®, técnica espectrofotométrica (AccuRead®) e sistema portátil de análise computadorizada de sêmen (CASA, iSperm®). Os resultados gerados por cada avaliação foram submetidos à análise estatística descritiva, sendo as médias comparadas a através de análise de variância (PROC-GLM, SAS®). Menores concentrações espermáticas foram observadas a partir do teste espectrofotométrico (P<0,0001), sendo constatada baixa concordância com os sistemas iSperm® e NC. No entanto, alta concordância foi observada para a estimativa da concentração espermática conduzida nos sistemas NC e iSperm®. Conclui-se que o sistema portátil de análise computadorizada representa uma alternativa ao NC para acesso a concentração espermática de touros.
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