Целью данной работы явилось изучение клеточной гибели (апоптоза и нетоза) и функциональной активности нейтрофилов у больных хронической сердечной недостаточностью с эндотоксемией. Проведено исследование 20 пациентов с диагнозом хроническая сердечная недостаточность (ХСН), у которых LALтестом выявлена эндотоксемия. Также были обследованы здоровые индивидуумы (n = 19) обоих полов. Уровень эндотоксинов в крови больных определяли с использованием LAL-теста. Генерацию активных форм кислорода (АФК) в клетках определяли с использованием красителя нитросинего тетразолия (НСТ). Апоптоз, некроз и нетоз регистрировали методом флуоресцентной микроскопии. Уровни TNFα и интерлейкинов IL-1β и IL-6 были определены с использованием метода иммуноферментного анализа ELISA. Уровень рецепторов TLR4 в клеточной мембране нейтрофилов определяли на проточном цитометре с использованием аnti-TLR4 антител. Полученные нами результаты по сравнению функциональных показателей контрольных нейтрофилов и нейтрофилов больных ХСН показали, что при эндотоксемии значительно увеличивается уровень TNFα, IL-1β, IL-6, АФК, уровень рецепторов TLR4 в клеточной мембране нейтрофилов. Также при эндотоксемии значительно снижается апоптоз нейтрофилов и увеличивается их нетоз, что важно в патогенезе хронической сердечной недостаточности.
2 Федеральное государственное автономное учреждение здравоохранения Больница Пущинского научного центра Российской академии наук, Пущино Хроническая сердечная недостаточность (ХСН) является актуальной проблемой здравоохранения и одной из основных причин смертности во всем мире. В публикации приведена оценка влияния адреноблокаторов фентоламина и пропранолола на апоптоз и продукцию активных форм кислорода (АФК) нейтрофилов у больных хронической сердечной недостаточностью при действии липополисахаридов. Измерение продуцируемых нейтрофилами АФК производили методом хемилюминесценции. Жизнеспособность и апоптоз нейтрофилов определяли методом флуоресцентной микроскопии. Участие отдельных сигнальных путей (p38MAPK, PI3K, ERK) в механизме действия адреноблокаторов изучали с использованием специфических ингибиторов. Установлено, что пропранолол в диапазоне концентраций от 10 мкМ до 400 мкМ увеличивает продукцию АФК нейтрофилами -как контрольных клеток, так и при действии LPS. Фентоламин в этом же диапазоне концентраций значительно снижает продукцию АФК нейтрофилами. Было выявлено, что среди использованных ингибиторов наиболее эффективно снижают пропранолол-индуцированную продукцию АФК нейтрофилами SB203580, Wortmannin и LY294002, в то время как PD98059 практически не ингибирует продукцию АФК клеток как с LPS, так и без него. Пропранолол и фентоламин ускоряют апоптоз нейтрофилов в присутствии и отсутствие LPS. Результаты, полученные с использованием ингибиторов сигнальных путей действия LPS на нейтрофилы, показали, что в механизме активации клеток пропранололом важную роль играют сигнальные пути с участием p38MAPK и PI3K. ERK не участвуют в активации клеток пропранололом. В механизме действия фентоламина значимая роль принадлежит p38MAPK, ERK, при этом действие PI3K менее выражено.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.
hi@scite.ai
10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614
Henderson, NV 89052, USA
Copyright © 2024 scite LLC. All rights reserved.
Made with 💙 for researchers
Part of the Research Solutions Family.