Cellulosimicrobium cellulans is one of the microorganisms that produces a wide variety of yeast cell wall-degrading enzymes, β-1,3-glucanase, protease and chitinase. Dried cells of Saccharomyces cerevisiae were used as carbon and nitrogen source for cell growth and protease production. The medium components KH2PO4, KOH and dried yeast cells showed a significant effect (p<0.05) on the factorial fractional design. A second design was prepared using two factors: pH and percentage of dried yeast cells. The results showed that the culture medium for the maximum production of protease was 0.2 g/l of MgSO4.7H2O, 2.0 g/l of (NH4)2SO4 and 8% of dried yeast cells in 0.15M phosphate buffer at pH 8.0. The maximum alkaline protease production was 7.0 ± 0.27 U/ml over the center point. Crude protease showed best activity at 50ºC and pH 7.0-8.0, and was stable at 50ºC.
Recebido em 31/1/08; aceito em 25/8/08; publicado na web em 26/1/09 ISOLATION OF POLYMERS FROM Saccahromyces cerevisiae CELL WALL AND EVALUATION OF ANTIOXIDANT ACTIVITY OF ISOLATED MANNAN-PROTEIN. Yeast cell wall contains polymers glucan and mannan-protein that have received much attention with respect to their biological activities. Conventional isolation process involving treatments with hot alkali and acids cause degradation of these polymers. The aim of this paper was to study a low-degrading process for the isolation of glucan and mannan-protein from S. cerevisiae cell wall comprising physic and enzymatic treatments. Yeast cell glucan was obtained in a purity of 87.4% and a yield of 33.7%. The isolated mannan-protein presented antioxidant activity that was increased after thirty minutes of protease treatment. Antioxidant activity was determined by β-carotene/linoleate model system. Keywords: yeast glucan; antioxidant activity; mannan-protein. IntroduçãoA parede celular da levedura Saccharomyces cerevisiae é organizada em duas camadas que são compostas por três macromoléculas principais: manana-proteína, um complexo no qual o polissacarídeo manana está covalentemente ligado à proteína; glucana, um polissacarídeo de β-1,3 e β-1,6 glicose e, quitina, um polímero de β-1,4 N-acetilglicosamina. [1][2][3][4] Estes componentes estão unidos por ligações covalentes. A manana-proteína corresponde a aproximadamente 30% do peso seco da parede celular, 5 e compõe a camada mais externa da parede, estando ligada covalentemente a cadeias de β-1,6-glucana. A β-1,6-glucana corresponde à cerca de 5% do peso seco da parede celular e são moléculas relativamente pequenas, com cerca de 140 resíduos de glicose. Mais da metade da parede celular (50-60%) é formada por β-1,3-glucana, 6 que é composta predominantemente por moléculas lineares com cerca de 1500 resíduos de glicose, dos quais cerca de 40 a 50 resíduos estão envolvidos em ligações através do carbono C-6 com moléculas de β-1,6-glucana e quitina. 7 A β-glucana é encontrada também na parede celular de fungos, em cereais como aveia, trigo, centeio, milho, entre outros. 8 Os estudos sobre a composição das β-glucanas tiveram grande avanço após a identificação de problemas em filtros utilizados nos processos de produção de cerveja, onde se observou o aparecimento de um material gelatinoso. Este material foi identificado como o polissacarídeo β-glucana. 9 As β-1,3-glucanas apresentam habilidade para estimular o sistema imunológico. 5,10 Devido a esta função biológica, esse polissacarídeo pode exercer efeito benéfico contra uma série de doenças, como infecções virais, bacterianas e fúngicas, além de tumores, efeitos de radiações e supressão imune devido ao stress. 11 O problema que as glucanas apresentam e que inviabiliza sua utilização em alguns casos é sua insolubilidade. Por isso, alguns processos de derivação, como carboximetilação e sulfoetilação, e alguns processos físicos, como tratamento com ultrassom, têm sido propostos com o objetivo de aumentar a solubilidade das glucana...
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