Tyrosinase is an enzyme of industrial interest. The production and characterization of tyrosinase from P. sanguineus CCT-4518 were investigated. The selection of inductors, luminosity influence, inoculum size and type of culture medium on the production of tyrosinase and the effect of inhibitors on enzyme activity were performed. Optimum conditions for intracellular tyrosinase production was observed after 2 days using 0.15% L-tyrosine as inducer, in the presence of light, with inoculum size of 10 mycelium discs, using 2% malt extract broth medium, incubated at 30°C, and constant agitation of 150 rpm. Tyrosinase activity was completely inhibited by the addition of 6 mM salicylhydroxamic acid or phenylthiourea, however an inhibition of 4.15% was recorded by the addition of 0.1 mM sodium azide. No inhibition could be detected in case of 0.1 mM phenyl methanesulfonyl fluoride addition. Optimal conditions for intracellular tyrosinase activity using L-dopa as substrate were observed at pH 6.6 and 45°C. Thermal stability studies indicated that the enzyme is stable at 45°C for 15 minutes. Higher temperatures decreased tyrosinase activity. Enzyme production was confirmed by non-denaturing polyacrylamide gel electrophoresis and the protein profile was investigated by denaturing polyacrylamide gel electrophoresis.
Agradeço aos meus amigos por me possibilitarem renovar as energias em meio a essa rotina tão atribulada.Quero agradecer às minhas tias pelo auxílio enquanto estive em Goiânia e Ipameri, especialmente à tia Renata pela colaboração na busca e contato com a entrevistadas. Agradeço à minha irmã Luciana pelos conselhos acadêmicos e à minha mãe Márcia por revisar essa obra. Obrigada por estarem sempre presentes na minha vida.Agradeço também ao Mateus, meu companheiro, por me acompanhar nesse percurso de mestrado e tantos outros caminhos.Por fim queria agradecer a você leitor dessa pesquisa, esteja você lendo essa seção ou não. "A metáfora do nascimento aplicada ao trabalho de escrita nunca pareceu convincente para mim. A metáfora da tecelagem soa mais eficaz. Escrever é uma das próteses que inventamos para dar poder a nosso corpo. Escrever é uma habilidade, um forçar de nossos limites naturais que requer longo treinamento para assimilar técnicas que nós usamos com perícia crescente e, se for preciso, inventamos novas. A tecelagem representa bem essa ideia. Nós trabalhamos por meses, por anos, tecendo um texto, o melhor que somos capazes naquele momento. E quando está pronto, está lá, para sempre o mesmo, enquanto nós mudamos e continuaremos a mudar, prontos para tentar criar outras tessituras."
RESUMO:O mebendazol é um fármaco que atua como anti-helmíntico de amplo espectro de ação contra nematóides e cestóides. Entre as metodologias utilizadas para sua determinação, destaca-se a possibilidade de determinação quantitativa de mebendazol por meio de métodos espectrofotométricos, por apresentarem boa sensibilidade e ter custos mais acessíveis. O presente trabalho teve como objetivo desenvolver e validar uma metodologia analítica para determinação deste fármaco em matéria-prima e suspensão oral, utilizando a espectrofotometria de ultravioleta. O método mostrou ser simples, rápido, específico, linear, exato, preciso e robusto para ser executado na rotina de um laboratório de controle de qualidade, sendo uma alternativa aos métodos utilizados.
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