RESUMO

Agrobacterium tumefaciens é o agente causal da galha-da-coroa, doença que afeta a maioria das plantas dicotiledôneas e caracteriza-se pelo crescimento de tumores na junção entre o caule e a raiz (coroa). A formação desses tumores é o resultado de um processo natural de transferência de genes de Agrobacterium spp. para o genoma da planta infetada. Esses genes estão contidos em um plasmídio de alto peso molecular (120 a 250 kb), denominado Ti ("tumor inducing"), presente em todas as linhagens patogênicas de Agrobacterium spp. Duas regiões do plasmídio Ti estão diretamente envolvidas na indução do tumor: a região-T, que corresponde ao segmento de DNA transferido para a célula vegetal, e a região de virulência (região vir), que contém genes envolvidos na síntese de proteínas responsáveis pelo processo de transferência da região-T. Esta região, uma vez transferida e integrada no genoma da célula vegetal, passa a ser denominada de T-DNA ("transferred DNA"). Os genes presentes no T-DNA codificam enzimas envolvidas na via de biossíntese de reguladores de crescimento, auxinas e citocininas. A síntese desses reguladores pelas células transformadas causa um desbalanço hormonal, levando à formação do tumor no local da infecção. Outro grupo de genes presentes no T-DNA codifica enzimas responsáveis pela síntese de opinas, que são catabolisadas especificamente pela bactéria colonizadora, como fonte de nutrientes. O conhecimento preliminar das bases moleculares envolvidas no processo de infecção de uma planta hospedeira por Agrobacterium spp., permitiu a utilização desta bactéria como vetor natural de transformação genética de plantas.

O presente trabalho objetivou o estabelecimento de protocolos de desinfestação e germinação de sementes, bem como a indução da multibrotação in vitro da farinha-seca (Albizia niopoides) utilizando sementes e segmentos nodais de plântulas germinadas in vitro. Para avaliar a desinfestação e a germinação, foram testados os tempos de 0, 10, 20 e 30 minutos de imersão das sementes no hipoclorito de sódio a 8%. As avaliações das contaminações por fungos e/ou bactérias, assim como a germinação de sementes foram realizadas 20 dias após o início do teste. A indução da multibrotação foi realizada em meio de cultura WPM, suplementado com BAP, nas concentrações de 0,0; 0,5; 2,5 e 5,0 μM combinados com ANA na concentração de 0,5 μM. Avaliou-se o número de brotos e formação de calo. O teste F, não revelou diferença significativa, nas porcentagens de desinfestação e germinação, quanto ao tempo de imersão no hipoclorito de sódio. A porcentagem de desinfestação variou entre 93% a 97% e a de germinação de 67% a 73%. A maior taxa de regeneração de brotos axilares (2,6) foi obtida com a combinação de 5,0 μM de BAP + 0,5 μM de ANA, 30 dias após a inoculação. Observou-se também que sem a adição de reguladores de crescimento no meio WPM, plântulas de farinha-seca obtiveram significativas taxas de brotações (2,3 brotos)

A procedure for genetic transformation of the hybrid Eucalyptus grandis × E. urophylla using particle bombardment is described. Cotyledon- and hypocotyl-derived calli growing on SP medium supplemented with 2�m�thidiazuron or on MS modified (MSM) medium supplemented with 10 m 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and 2.5�m�6-benzylaminopurine (BAP), were used as target material for bombardment assays. Multiple preincubation and bombardment conditions were tested. Tungsten particles were coated with the plasmid pBI426 harbouring a β-glucuronidase (gus) and neomycin phosphotransferase II (npt II) gene fusion controlled by a double 35S cauliflower mosaic virus (CaMV) promoter. Four days after bombardment, the transient transformation efficiency was determined by expression of the gus gene. Fully GUS-positive calli were then obtained after 105 d in MSM medium supplemented with 2,4-D, BAP, and the selective agent kanamycin at 200 mg L-1. The presence of the gus gene in these kanamycin-resistant calli was confirmed by polymerase chain reaction analysis. Extensive experiments were performed aiming to identify conditions for the regeneration of these GUS-expressing calli. However, they were unable to regenerate transgenic shoots, suggesting that conditions suitable for regeneration are unsuitable for transformation and vice versa.

This study aimed to determine sorption isotherms of ingredient and poultry diet. The samples were encapsulated in capsules and dehydrated by oven-drying in a desiccator for more than 24 hours. The samples were transferred to desiccator containing water in the base and placed in the oven, with one sample of each material being removed at incremental intervals. The sample was weighed and for determination of water activity and for dry matter. The moisture and water activity data were evaluated by eight mathematical models. The GAB mathematical model fitted the experimental data to constitute the isotherm for each material. Type II sorption isotherms were found, except for BHT: demonstrated values that did not fit the isotherm determination. The hygroscopic behavior of the ingredients in ascending order were: L- threonine, limestone, BHT, DL- methionine, L-valine, L- tryptophan, phosphate, kaolin, vitamin supplement, salt, mycotoxin deactivator, pelleted rooster diet, mash rooster diet, mash layer diet, pelleted layer diet, corn, bacitracin zinc, vitamin mineral supplement, phytase, rice bran, wheat bran, mineral supplement, soybean meal, coccidiostat, L- Lysine HCl and choline chloride. Ingredients and diets have different hygroscopic behavior: can lead to deterioration and low accuracy in nutritional values of diet, since formulation is based on as-is fed basis.

Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a germinação de sementes de cedro in vitro e em casa de vegetação. Para germinação das sementes in vitro, utilizaram-se tubos de ensaio contendo 15ml do meio nutritivo WPM (Wood Plant Medium), suplementado com pó de rocha. Em casa de vegetação, as sementes foram plantadas em tubetes, contendo pó de rocha e Turfa fértil®. Para o estudo in vitro, a análise de regressão linear mostrou que há uma relação inversa entre os tratamentos analisados, sendo que a maior porcentagem de germinação (9,2%) ocorreu no controle, e a menor (8,7%), na concentração de 300mg L-1. Em casa de vegetação, há diferença na taxa de germinação das sementes de cedro em resposta aos diferentes substratos. A maior porcentagem de germinação foi de 75,36%, no tratamento com 30% de pó de rocha + 70% de turfa fértil®.

A tecnologia de isolamento de protoplastos é uma importante ferramenta para estudos da bioquímica e fisiologia da membrana plasmática e regeneração da parede celular. Protoplastos de laranja “Caipira” (Citrus sinensis L. Osbeck) foram enzimaticamente isolados a partir de células em suspensão e posteriormente cultivados em meio líquido. Este trabalho teve por objetivo avaliar a viabilidade de protoplastos de laranja “Caipira” recém isolados por meio do corante Diacetato de Fluoresceína (FDA), em que se observou 95% de protoplastos fluorescendo. Por intermédio da técnica de microscopia eletrônica de varredura, observou-se protoplastos recém isolados da variedade laranja “Caipira”. Utilizou-se o corante Calcofluor White (CFW) para visualizar a parede celular regenerada em protoplastos com oito dias de cultivo da mesma variedade citada, em que se observou a presença de parede celular por meio de um anel azulado de intensa fluorescência. Palavras-chave: Protoplastos. Cultura de células. Microscopia de fluorescência e varredura. Citrus.