Streptococcus sanguinis is a commensal pioneer colonizer of teeth and an opportunistic pathogen of infectious endocarditis. The establishment of S. sanguinis in host sites likely requires dynamic fitting of the cell wall in response to local stimuli. In this study, we investigated the two-component system (TCS) VicRK in S. sanguinis (VicRK Ss ), which regulates genes of cell wall biogenesis, biofilm formation, and virulence in opportunistic pathogens. A vicK knockout mutant obtained from strain SK36 (SKvic) showed slight reductions in aerobic growth and resistance to oxidative stress but an impaired ability to form biofilms, a phenotype restored in the complemented mutant. The biofilm-defective phenotype was associated with reduced amounts of extracellular DNA during aerobic growth, with reduced production of H 2 O 2 , a metabolic product associated with DNA release, and with inhibitory capacity of S. sanguinis competitor species. No changes in autolysis or cell surface hydrophobicity were detected in SKvic. Reverse transcription-quantitative PCR (RT-qPCR), electrophoretic mobility shift assays (EMSA), and promoter sequence analyses revealed that VicR directly regulates genes encoding murein hydrolases (SSA_0094, cwdP, and gbpB) and spxB, which encodes pyruvate oxidase for H 2 O 2 production. Genes previously associated with spxB expression (spxR, ccpA, ackA, and tpK) were not transcriptionally affected in SKvic. RT-qPCR analyses of S. sanguinis biofilm cells further showed upregulation of VicRK targets (spxB, gbpB, and SSA_0094) and other genes for biofilm formation (gtfP and comE) compared to expression in planktonic cells. This study provides evidence that VicRK Ss regulates functions crucial for S. sanguinis establishment in biofilms and identifies novel VicRK targets potentially involved in hydrolytic activities of the cell wall required for these functions.
Candida-associated denture stomatitis is the most common form of oral candidal infection, with Candida albicans being the principal etiological agent. Candida adheres directly or via an intermediary layer of plaque-forming bacteria to denture acrylic. Despite antifungal therapy to treat denture stomatitis, infection is reestablished soon after the treatment ceases. In addition, many predisposing factors have been identified as important in the development of oral candidiasis, including malnourishment, common endocrine disorders, such as diabetis mellitus, antibacterial drug therapy, corticosteroids, radiotherapy and other immunocompromised conditions, such as acquired immunodeficiency syndrome (AIDS). These often results in increased tolerance to the most commonly used antifungals. So this review suggests new therapies to oral candidiasis.
Dedico este trabalho,A D De eu us s, fonte de toda a sabedoria, pela a oportunidade de viver, a possibilidade de realizar esta pesquisa e a felicidade de nascer em uma família tão maravilhosa. Aos meus pais, A An nt tô ôn ni io o O Ol li iv ve ei ir ra a d de e M Mo or ra ae es s e E Ev vâ ân ni ia a M Ma ar ri ia a S So ou uz za a d de e C Ca ar rv va al lh ho o, que sempre se fizeram presentes na distância. Ensinaram-me valores imprescindíveis para a vida como a honestidade, sinceridade, dentre tantos outros. Grandes incentivadores e provedores de meus sonhos. Aos meus irmãos, A An nt to on ni io o O Ol li iv ve ei ir ra a d de e M Mo or ra ae es s F Fi il lh ho o, M Ma ar ri ia an nn na a d de e C Ca ar rv va al lh ho o M Mo or ra ae es s e A An na a C Cl lá áu ud di ia a T To or rr re es s C Co or rr re ei ia a d de e M Mo or ra ae es s, que são meus amigos mais antigos. É um privilégio tê-los em minha vida. Ao meu noivo, M Ma at te eu us s d de e C Ca am mp po os s B Ba al ld di in n, por toda a compreensão com minha ausência constante e com o namoro nada convencional que temos, além de todo o incentivo à minha profissão e o amor que me dedica todos os dias. A todos os M Me es st tr re es s com quem convivi durante toda a minha vida. Muitos me ensinaram lições que não se aprendem em livros e formaram o meu caráter, moldaram o ser humano que sou hoje. Com carinho, dedico. vi vii A AG GR RA AD DE EC CI IM ME EN NT TO OS S Agradeço À U Un ni iv ve er rs si id da ad de e E Es st ta ad du ua al l d de e C Ca am mp pi in na as s na pessoa do Reitor P Pr ro of f. . D Dr r. . F Fe er rn na an nd do o F Fe er rr re ei ir ra a C Co os st ta a, e à F Fa ac cu ul ld da ad de e d de e O Od do on nt to ol lo og gi ia a d de e P Pi ir ra ac ci ic ca ab ba a, através do Diretor P Pr ro of f. . D Dr r. . J Ja ac ck ks s J Jo or rg ge e J Jú ún ni io or r, a oportunidade concedida em estudar nesse centro que é referência para a Odontologia. À C Co oo or rd de en na ad do or ri ia a d de e P Pó ós s--G Gr ra ad du ua aç çã ão o d da a F Fa ac cu ul ld da ad de e d de e O Od do on nt to ol lo og gi ia a d de e P Pi ir ra ac ci ic ca ab ba a, na pessoa da Coordenadora P Pr ro of fª ª. . D Dr rª ª. . R Re en na at ta a C Cu un nh ha a M Ma at th he eu us s R Ro od dr ri ig gu ue es s G Ga ar rc ci ia a e da secretária É Ér ri ic ca a A A. . P Pi in nh ho o S Si in nh ho or re et ti i, pela atenção dispensada ao longo de todo o curso de Doutorado. À P Pr ro of fª ª. . D Dr rª ª. . R Re en na at ta a d de e O Ol li iv ve ei ir ra a M Ma at tt to os s--G Gr ra an ne er r, por aceitar o desafio de orientarme e guiar-me em meus primeiros passos em pesquisas laboratoriais. Agradeço a orientação sempre presente, o auxílio constante na elaboração deste trabalho, e a total dedicação ao ensino e à pesquisa, além da paciência em ensinar-me, ainda que repetidas vezes, noções tão básicas. Agradeço a contribuição sem medidas que teve em minha formação profissional e pessoal, e serei eternamente grata por todos os ensinamentos que obtive. Ao P ...
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