A Leucemia Mieloide Crônica (LMC) é uma neoplasia mieloproliferativa originada, em 95% dos casos, por uma anormalidade citogenética que se caracteriza pela translocação recíproca entre os cromossomos 9 e 22 t(9; 22) (q34; q11), resultando no cromossomo Philadelphia (Ph). Considerando que a cura da LMC só é possível com um transplante de medula óssea bem-sucedido e que existem casos de resistência ao inibidor de tirosina quinase Mesilato de Imatinibe, fármaco de primeira escolha para o tratamento, é importante que se conheça detalhadamente os genes e proteínas alterados na LMC, favorecendo a efetividade de estratégias terapêuticas, a otimização do diagnóstico e a detecção de doença residual mínima. Dentre as novas abordagens terapêuticas para a LMC está a terapia gênica, que dependendo do gene alvo, pode também ser eficiente para o tratamento de outras neoplasias. Dentro deste contexto, os objetivos do trabalho foram: realizar a clonagem molecular de um fragmento de DNA do gene EZH2, alvo promissor da terapia gênica, que provoca alteração epigenética na LMC e em diversas neoplasias; bem como contribuir para outros trabalhos de manipulação gênica interespécies, os quais tem grande contribuição para a área da saúde. Para isso, o gene EZH2 foi isolado a partir do DNA genômico de sangue periférico de pacientes com LMC e posteriormente clonado em sistemas procariotos. Dessa forma, foram realizados, definidos e comprovados os procedimentos de manipulação gênica interespécies e discutido o futuro da biotecnologia no auxílio a pesquisas e a tratamentos, com foco na LMC. Palavras-chave:Biotecnologia. Leucemia Mieloide Crônica. Clonagem Molecular. Terapia Gênica. AbstractChronic myeloid leukemia (CML) is a myeloproliferative neoplasia, caused in 95 % of the cases by a cytogenetic abnormality characterized by the reciprocal translocation between chromosomes 9 and 22 t(9; 22) (q34; q11), resulting in Philadelphia chromosome (Ph).Considering that CML cure is only possible with a successful bone marrow transplantation and that there are resistance cases to the tyrosine kinase inhibitor Imatinib Mesylate, prescribed in first line drug treatment; it is important to know in detail the genes and proteins that are possibly altered in CML, favoring effective therapeutic strategies, optimized diagnosis and minimal residual disease detection. Among the new therapeutic approaches to CML is gene therapy, which, depending on the target gene, can be efficient to other neoplasms treatment. In this context, the aims of this work were: to proceed the molecular cloning of a DNA fragment from EZH2 gene, potential target for gene therapy, that promotes epigenetic alteration in CML and in many neoplasms; as well as to contribute to studies related to interspecies gene transfer that have high contribution to health. For this reason, the EZH2 gene was isolated from peripheral blood genomic DNA from CML patients and cloned in prokaryotic systems. Therefore, in this study, we proceed, defined and proved the interspecies gene transfer procedures and ...
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