Mycobacterium vaccae represents an alternative mycobacterial cloning host that has been largely overlooked to date. The main reason for this may be the reported non-transformability of this species, specifically the so-called Stanford strain (NCTC 11659), with expression vectors that use kanamycin resistance as a selection method. However, this strain can be transformed using hygromycin resistance as an alternative selectable phenotype. The present study has shown that in contrast to previous reports, M. vaccae (ATCC 15483) is capable of being transformed with a range of vectors encoding kanamycin resistance as the selectable marker. Thereafter, the expression of the lacZ reporter gene in M. vaccae, Mycobacterium bovis BCG and Mycobacterium smegmatis mc 2 155 was evaluated using a range of characterized mycobacterial promoter sequences (hsp60, hsp70, PAN, 18kDa and 16S rRNA) cloned in the same promoter probe vector. In general, the promoters showed similar levels of activity in the three species, demonstrating that existing expression systems can readily be employed with M. vaccae (ATCC 15483). This was further confirmed by the observation that M. vaccae was capable of stable, in vitro expression of recombinant S1 subunit of pertussis toxin at levels equivalent to those obtained with BCG and M. smegmatis. Analysis of structural and functional stability of a range of vectors demonstrated that the incidence of instability noted for M. vaccae was lower than that recorded for M. smegmatis. Taken together, the results indicate that M. vaccae is an additional cloning host which may prove useful for specific aspects of mycobacterial biology and provide increased flexibility to the field of recombinant protein technology for mycobacteria.
O artigo apresenta um relato da experiência realizada durante a sindemia de COVID-19, a partir das ações de implantação de sistemas agroflorestais voltados para a inclusão produtiva, a saúde e a qualidade de vida na Aldeia Koyakati - Terra Indígena Mãe Maria -, em Bom Jesus do Tocantins-sudeste do Pará. Essas ações integram o projeto ArticulaFito e resultam de um diagnóstico da base produtiva nacional de plantas medicinais e produtos da sociobiodiversidade, onde a necessidade de recuperação e conservação de áreas degradadas foi apontada como um fator de fragilidade das relações produtivas, especialmente no que tange aos territórios de populações e comunidades tradicionais, pressionados por modelos produtivos predatórios que impactam negativamente os modos de vida e a saúde dessas populações. A metodologia Value Links-B foi aplicada no diagnóstico com vistas à elaboração de um plano de ação voltado para os desafios diagnosticados na cadeia da castanha-do-brasil (Bertholletia excelsa Bonpl.), espécie categorizada como ameaçada de extinção por declínio populacional. Em seguida, indica os sistemas agroflorestais, para garantir o manejo adequado das espécies agroextrativistas nativas e, desse modo, conservar a biodiversidade, bem como garantir o acesso à matéria-prima. As ações de implantação de Unidade de Experimentação Agroecológica (UEA) são aqui descritas, com o objetivo de fortalecer os sistemas produtivos e, assim, gerar emprego e renda, no intuito de melhorar os indicadores de saúde nesses territórios.
INTRODUÇÃO: Fatores genéticos podem desempenhar um importante papel na susceptibilidade à tuberculose (TB) ativa, e polimorfismos de base única (SNPs) em diferentes genes que codificam para citocinas têm sido descritos e associados com doenças. OBJETIVOS: Investigar o quanto polimorfismo na região promotora do gene que codifica para TNF-alfa (-238 e -308) estão associados a ocorrência de TB ativa. MÉTODOS: SNPs dentro do gene de TNF-alfa foram analisados por PCR- RFLP em dois grupos de indivíduos: pacientes com TB (n = 234) e pacientes com pneumopatias não TB (n = 113). RESULTADOS: Neste estudo, o alelo -238A esteve associado significantemente com susceptibilidade à ocorrência de TB e gravidade das formas clínicas (p = 0,00002; OR = 0,15; IC = 0,06-0,36). Por outro lado, o alelo -308A esteve associado significantemente com a proteção a outras formas de doença pulmonar (p = 0,02; OR = 1,95; IC = 1,07-3,58). CONCLUSÕES: Estes resultados preliminares sugerem a importância de estudos genéticos na ocorrência da TB. São necessários outros estudos para melhorar a compreensão sobre a patogênese do M. tb.
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