Micellar microemulsions are thermodynamically stable self-emulsifying systems that have been used to successfully improve the low oral bioavailability of several bioactive phytochemicals, such as antioxidant polyphenols. However, most studies have reported the micellization of single-compounds or purified chemical fractions; thus, the stability, phytochemical-loading efficiency, and bioactivity of complex crude extracts remain largely unexplored. In this study, we evaluated the effects of micellar emulsification of tropical apple (Malus domestica cv. Anna), plum (Prunus domestica cv. Satsuma), and guava (Psidium guajava L.) extracts regarding particle size and stability, polyphenol-loading efficiency, antioxidant capacity, and cytotoxic activity in human and murine cells. Simple food-grade extraction protocols were implemented to obtain apple, plum, and guava extracts. Total polyphenols, flavonoids, and antioxidant activity (DPPH) were determined in the fruit extracts, and their polyphenol profile was further characterized by liquid chromatography (HPLC-DAD). The dried extracts were mixed into a food-grade, self-emulsifying system, and their cytotoxicity in human and murine cell lines was compared. Our research showed that complex fruit matrixes were successfully emulsified into thermodynamically stable polysorbate-based nanometric micelles with uniform size distribution and consistent pH stability, with potential applications in food and biomedical industries.
El Laboratorio de Ingeniería de Tejidos (LAINTEC) del Centro de Investigación en Biotecnología (CIB) de la Escuela de Biología del Instituto Tecnológico de Costa Rica (TEC) nació en el 2005 con el objetivo de desarrollar terapias celulares para aplicaciones en medicina regenerativa. Actualmente, el LAINTEC aloja más de una decena de proyectos multidisciplinarios, realizados en colaboración con otros centros de investigación del TEC y con otras universidades a nivel nacional e internacional. Estas investigaciones se enfocan en el desarrollo y evaluación de implantes, biomateriales y terapias regenerativas de piel, músculo y hueso, incluyendo el aislamiento y caracterización de células madre mesenquimales de tejido adiposo. Además, se han establecido modelos celulares y tisulares para la evaluación del potencial bioactivo de distintos agentes con potenciales aplicaciones en biomedicina.
Las células madre se caracterizan por autorrenovación y diferenciación en varios tipos de células. Las primeras células madre identificadas fueron las hematopoyéticas; sin embargo, existen diferentes tipos, de diferente origen y potencial de diferenciación, por ejemplo, las células madres adultas mesenquimales, aisladas de médula ósea a mediados del siglo pasado. Actualmente se sabe que son población quiescente de muchos tejidos adultos, como el tejido adiposo. Estas células cuentan con gran potencial de diferenciación in vitro, son fuente de factores de crecimiento y citoquinas que participan en la reparación de tejidos. Por lo anterior, son protagonistas investigaciones preclínicas y clínicas para tratar heridas en piel, lesiones de médula espinal, isquemia en el miocardio, con resultados prometedores. Para este estudio, se extrajo tejido adiposo de ratones y se aisló la fracción vascular estromal. Esta, se cultivó in vitro para que las células que tuvieran adherencia al plástico crecieran. Posteriormente se les analizó la cinética de crecimiento, expresión de los marcadores de células madre y potencial de diferenciación. Las células lograron crecer y proliferar in vitro y mostraron una cinética similar a la reportada para estas células. Un veinticinco por ciento de las células cultivadas, mostraron positividad para los marcadores de células madre y se lograron diferenciar eficientemente en linajes adipogénico, condrogénico y osteogénico. El protocolo establecido en el presente trabajo permitió cumplir con la mayor parte de los criterios establecidos por la Sociedad Internacional para Terapia Celular y Génica, dando pie a futuras investigaciones para el desarrollo de terapias alternativas al tratamiento de heridas.
El aislamiento y selección de linfocitos T puros de cultivo primario de bazo de ratón puede obtenerse de manera rápida y fácil utilizando kits comerciales con microesferas magnéticas para capturar y purificar las células. A pesar de estas ventajas, la carga financiera que puede representar para el presupuesto de un laboratorio, la adquisición constante de estos kits justifica la evaluación de otras opciones de menor costo. Por ello, se comparó el porcentaje de recuperación celular, viabilidad y pureza de tres métodos de aislamiento y purificación de linfocitos T; dos de bajo costo y fácil implementación (aislamiento con amortiguador de amonio- cloruro-potasio (ACK)-adhesión celular y aislamiento con Ficoll), y un kit comercial de selección negativa con microesferas magnéticas. Con el método de amortiguador ACK-adhesión celular se obtuvo un porcentaje de recuperación y purificación de linfocitos T viables comparable al obtenido con el kit. Aunque este método requiere más tiempo, dado que las células deben ser incubadas durante toda la noche, es de fácil implementación y tiene una eficiencia comparable al kit, así como un menor costo. Este método puede ser tomado en cuenta para utilizar en experimentos que puedan trabajar con linfocitos activados.
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