Es wird eine Übersicht über ein Methoden-Prinzip gegeben, bei dem in einem Arbeitsgang durch Einsatz einer 25-Kanal-Proportionierpumpe 25 Proben auf 25 parallelen Säulen Chromatographisch aufgetrennt werden können. Das Auftragen der einzelnen Proben, Reagenzien und Elutionspuffer, sowie das Sammeln der Eluate in Fraktionen läuft dabei jeweils zeitgesteucrt automatisch ab. Dieses Prinzip der simultanen Säulenchromatographie hat sich bei uns inzwischen für die mechanisierte Routine-Bestimmung des GesamtThyroxins im Serum (kompetitive Proteinbindungsmethode), T 3 -in vitro-Test (Dextrangelfiltration), Gesamt-T 3 (Radioimmunoassay) und Cortisol im Serum (kompetitive Proteinbindungsmethode und Radioimmunoassay) bewährt. Der Hauptvorteil liegt hierbei neben höherer Kapazität und geringerem Kostenaufwand in der besseren Spezifität und Standardisierung dieser Methoden, welche die Gemeinsamkeit aufweisen, daß das zu bestimmende Hormon vor dem Meßvorgang aus dem Serum mechanisiert extrahiert werden kann. Simultaneous column chromatography for the automatic determination of hormonesThe automatic determination of hormone levels in serum by column Chromatographie methods using a 25 channel peristaltic pump, allows the simultaneous chromatography of 25 samples. The different volumes which are necessary for the successive elution steps are set by the tubing size of the pump and by a preset switch clock. The eluatcs from the 25 columns are collected simultaneously in fractionated volumes which are also determined with the same electronic clock device. The assays so far adapted to this principle are reviewed: Serum thyroxine (competitive protein binding assay), T 3 -uptake test (dextran gel filtration), triiodothyronine (radioimmunoassay) and cortisol (competitive protein binding assay or radioimmunoassay). The main advantages of this procedure are increased frequency, improved specificity and standardization at lower costs for these methods. The principle of simultaneous column chromatography appears to be most suited for assays, which require various extraction steps prior to the determination of the hormone, since it allows extraction, specific protein binding and bound/free separation on only one column.
The increasing number of determinations performed by radioimmunoassays necessitates rationalization of the procedures. An analyzer system has been developed in order to fully mechanize double antibody radioimmunoassays, which is essentially composed out of four independently working modules. The samples, in microliter vials, are carried in sample chains of up to 650 links. The first pipetting step is performed by syringes with displacement pistons. Additional reagents are rapidly added by an electronically controlled Hamilton repeating dispenser, which makes shaking procedures for mixing unnecessary. The bound/free separation is achieved discontinuously by use of Nuclepore-filters, which are carried in 3 inches distance (76 mm) by a 35 mm dark leader film. After covering the radioactive filter positions with an adhesive plastic foil from both sides, the film spool is directly inserted into a specially constructed gamma-counter. The results of the evaluation of the efficiency and of the precision of each module are presented in this paper. Ein modulares A nalysensystem fur Doppelantikorper-RadioimmunoassaysZusammenfassung: Die wachsende Anzahl radioimmunologischer Bestimmungen erfordert die Rationalisierung der Arbeitsgänge. Zur Vollmechanisierung von Doppel-Antikörper-Radioimmunoassays wurde ein Analysensystem entwickelt, das aus vier unabhängig voneinander arbeitenden Modulen besteht. Als Probenträger werden Mikrolitergefäße in Reaktionsketten bis zu 650 Gliedern verwendet. Der erste Pipettierschritt wird mit Verdrängungskolben-Dosiervorrichtungen vorgenommen, weitere Reagentien werden unter Verwendung einer elektronisch gesteuerten Hamilton-Repitierspritze in scharfem Strahl zugefügt, was Schüttelvorgänge erübrigt. Zur bound/free-Trennung wird diskontinuierlich über Nuclepore-Membranen filtriert, die in 3 Zoll Abstand (76 mm) von einem 35 mm Vorspannfilm getragen werden. Die radioaktiven Filterpositionen werden beidseitig zur Vermeidung von Kontamination mit Klebefolie abgedeckt. Die Film-Auffangspule kann direkt in einen eigens konstruierten Gamma-Zähler eingelegt werden. Die Ergebnisse der Präzisionsprüfung und die Leistung der einzelnen Module werden in der Arbeit aufgeführt.
Exereise enhanced the uptake of glucose and FF A in healthy men. The arteriovenous insulin gradients were positive at rest and in the recovery per iod. During and after exereise the arteriovenous insulin differences reversed, regardless whether the insulin concentrations were elevated or not. The reversal of the arteriovenous insulin differences during and after exercise is consistent with arelease of insulin from peripheral stores. The mechanism of exercise enhanced uptake of both glucose and FFA are discussed.
The influence of lactic acid on rat adipose tissue lipolysis was studied in vitro. Good correlation was found between lactic acid concentration in the medium and inhibition of lipolysis. The correlation was equally good between pyruvate production into the medium and/or lactate to pyruvate ratios and inhibition of lipolysis. So far no answer can be given whether the observed inhibition of lipolysis is a direct or indirect (pyruvate) metabolic effect of lactic acid. The possibility of an inhibition of lipolysis mediated by lactic acid during muscular exercise is discussed.Etude de l'aetion antilipolytique de l'acide lactique in vitro l~sumg. L'in~uence de l'acide lactique sur la lipolyse a 6t6 6tudide in vitro sur le tissu adipeux du rat. L'acide lactique inhibe la lipolyse ell proportion de la dose appliqugc. I1 y avait 6galement une bonnc eorrglation entre t'inhibition de la lipolyse et la production de pyruvate duns le milieu et/ou les rapports lactate sur pyruvate. On ne peut distingucr, si l'inhibition de la lipolyse est un effet m6taboIique direct de l'acide lactique ou d6pend de la production de pyruvate. L'inhibition de la lipolyse par l'acide lactique pendant le travail musculaire in vivo est discut6e. Zusammenfassung. Der Einflul] yon 1Viilchs/~ure auf die Lipolyse wird in vitro am isolierten Fettgewebe untersucht. Milchsaure bewirkt eine dosisabh/~ngige tIemmung der Lipolyse. Es kann nicht entschieden werden, ob die Antilipolyse ein direkter Stoffwechseleffekt der Mflchsaure ist oder nut durch diese vermittelt wird. Auffallig ist die zunehmende Itemmung der Lipolyse mit Anstieg des Redox-Potentials. Die M6glichkeit einer laetatbedingten Lipolysehemlnung in vivo w~ihrend muskuli~rer Arbeit wird diskutiert.
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