RESUMOA pesquisa da composição do meio de cultura mais adequado à espécie vegetal e ao tipo de explante empregado é o fator de maior relevância da cultura de tecidos. O cultivo de ápice caulinar com recuperação da planta matriz é uma técnica de grande impacto para a propagação de plantas in vitro, regeneração de plantas livres de vírus, conservação de germoplasma e modificação genética. Objetivou-se, neste trabalho, avaliar composições do meio de cultivo para organogênese direta in vitro a partir de ápices caulinares pertencentes à população FCA-UNESP-PB de mamoneira (Ricinus communis L.), com vistas à propagação clonal de genótipos elite. Foram testadas quatro formulações: MS básico (T1), MS modificado 1 (T2), MS modificado 2 (T3) e WPM (T4), em delineamento experimental inteiramente casualizado, com 20 repetições em cada tratamento, sendo a repetição 1 ápice caulinar/frasco. O T3 apresentou-se superior e diferiu significativamente dos outros tratamentos apresentando 35% dos ápices caulinares diferenciados e desenvolvidos; seguiu-se o T2 com 10% e os tratamentos T1 e T4 não apresentaram diferenciação de tecidos. Os resultados permitiram concluir que os balanceamentos de sais minerais nos meios de cultura avaliados, especialmente a relação NO 3 / NH 4 e ausência de FeSO 4 .7H 2 O, indicaram grande influência no desenvolvimento de ápices caulinares de mamoneira. Termos para indexação:Ápices caulinares, cultura de tecidos, organogênese direta. ABSTRACTThe research of the culture medium composition suitable for plant species and the type of explant to be used is the most significant factor in plant tissue culture. The culture of stem tips with plant donor recovery is a technique of great impact for the in vitro plant production, regeneration of virus-free plants, germoplasm conservation and genetic modification. The objective of this study was to evaluate culture media composition in vitro on direct organogenesis of the FCA-UNESP-PB population of castor bean (Ricinus communis L.), from stem tips for clonal propagation of elite genotypes. Four formulations were tested: basic MS (T1), modified MS 1 (T2), modified MS 2 (T3) and WPM (T4) in a completely randomized experimental design with 20 replicates pertreatment with 1stem tip/flask. The treatment T3was superior, and differed significantly from the other treatments, with 35% of stem tips developed, followed by 10% in T2. T1 and T4 showed no plant tissue differentiation. The results allowed to conclude that the balance of mineral salts and culture media evaluated especially the rate NO 3 / NH 4 and the absence of FeSO 4 .7H 2 O showed nigh influence on the development of stem tips of castor bean.
Resumo -O objetivo deste trabalho foi otimizar o cultivo e desenvolvimento de embriões, bem como avaliar a indução da micropropagação do pinhão-manso (Jatropha curcas) in vitro. Na primeira etapa, foi avaliada a influência da sacarose (concentrações 0, 15, 30 e 60 g L -1 ) no desenvolvimento de embriões em meio basal MS. Das plântulas geradas no cultivo de embriões, foram excisadas microestacas e colocadas em meio MS suplementado com os reguladores vegetais 6-benziladenina (BA), 6-benzilaminopurina (BAP), cinetina (6-furfuriladenina) (KIN) e ácido 4-(3-indolil) butírico (AIB), nas concentrações 0,5, 1,0, 2,0 e 3,0 mg L -1 . Os resultados evidenciaram que a faixa de 15 a 30 g L -1 de suplementação exógena da sacarose promove o melhor alongamento da parte aérea das plantas; a rizogênese, contudo, é mais vigorosa na faixa de 30 a 60 g L -1 , em que ocorre aumento significativo do número de raízes. Na fase de micropropagação, o BAP à concentração de 2,0 mg L -1 induz maior número de brotações, enquanto a KIN (1,0 e 2,0 mg L -1 ) promove maior número de folhas. Ocorre calogênese na base das brotações, mais significativa na suplementação com 2,0 mg L -1 de 6-BAP. A melhor concentração de sacarose, quanto ao vigor vegetal e rapidez na obtenção de explantes, é de 30 g L -1 . Na micropropagação, os melhores resultados da organogênese direta de brotações ocorrem à concentração de 2,0 mg L -1 de BAP.Termos para indexação: Jatropha curcas, auxinas, citocininas, germinação in vitro, organogênese, sacarose. Embryo culture and in vitro induction of shoots for micropropagation of physic nutAbstract -The objective of this work was to optimize the cultivation and embryo development, as well as to evaluate in vitro micropropagation induction of physic nut (Jatropha curcas). In the initial stage, the influence of sucrose (concentrations of 0, 15, 30 and 60 g L -1 ) on the development of embryos in basal MS medium was evaluated. From the seedlings generated in the embryo culture, microcuttings were excised and inoculated on MS medium supplemented with the plant regulators 6-benzyladenine (BA), 6-benzylaminopurine (BAP), kinetin (6-furfuryladenine) (KIN) and 4-(3-indolyl) butyric acid (IBA), in the concentrations of 0.5, 1.0, 2.0 and 3.0 mg L -1 . The results showed that the range of 15 to 30 g L -1 of exogenous supplementation with sucrose promotes the best shoot elongation of plants; however, rhizogenesis is more vigorous in the range from 30 to 60 g L -1 , in which a significant increase of the number of roots occurs. In the micropropagation phase, BAP at 2.0 mg L -1 concentration induces a higher number of shoots, while KIN (1.0 and 2.0 mg L -1 ) promotes a higher number of leaves. Callogenesis occurs on the shoot base, being more significant when supplemented with 2.0 mg L -1 of 6-BAP. The best sucrose concentration, for plant vigor and speed in obtaining explants, is 30 g L -1 . In micropropagation, the best results for direct shoot organogenesis occur at 2.0 mg L -1 BAP concentration.Index terms: Jatropha curcas, auxins, cytok...
RESUMOO curauá (Ananas erectifolius L.B. Smith) é uma planta característica do Norte e Centro-oeste do Brasil e produz uma fibra de alta resistência, com aplicações nas diversas áreas, principalmente na indústria automobilística. Pertencente à família das Bromeliaceae, contém níveis significativos de bromelina, conjunto de enzimas proteolíticas com aplicação em diferentes áreas, tais como em indústrias alimentícias, farmacêuticas e de cosméticos. Neste trabalho avaliou-se a purificação da enzima presente nas folhas do curauá (Ananas erectifolius L.B. SMITH), através de sistema bifásico aquoso PEG 4000/Fosfato de potássio e se mediu a atividade enzimática em cada fase, pelo método de Biureto, obtendo-se o fator de purificação (FP), com o objetivo de otimizar as condições de purificação da bromelina. Utilizaram-se 3 valores de pH 7,0; 8,0 e 9,0 variando-se a composição proporcional entre a fase polimérica e a salina (tie-lines), Foi utilizada a variedade roxa do curauá, em que os resultados mostraram que o sistema PEG 4000/Fosfato de potássio com maior concentração polimérica e em pH 7,0, apresentou melhor resultado na purificação enzimática. Palavras-chave:Ananas erectifolius, bromelina, purificação, sistema bifásico aquoso, pH PURIFICATION OF BROMELAIN ENZYME FROM CURAUÁ (Ananas erectifolius LB Smith) PURPLE VARIETY, BY AQUEOUS TWO-PHASE SYSTEM PEG 4000/POTASSIUM PHOSPHATE ABSTRACT Curauá (Ananas erectifolius LB Smith) is a typical plant of northern and central-western Brazil.It produces a highly strong fiber with applications in several areas, mainly in the automotive industry. Belonging to the family of Bromeliaceae, it contains significant levels of bromelain, a group of proteolysis' enzymes with application in several areas such as in the food, pharmaceutical and cosmetics industries. In this work we evaluated the purification of the enzyme present in the leaves of Curauá by means of an aqueous two-phase system PEG 4000/Potassium phosphate. The enzyme had its activity measured in each phase by the Biuret method. The purification factor (PF) was obtained in order to optimize the conditions for purification of the bromelain. It was used 03 pH 7.0, 8.0 and 9.0 values, varying the proportional composition in between the polymeric and the saline phases (tie-lines). It was used the purple variety of Curauá. The results showed that PEG system 4000/ potassium phosphate polymer with a higher concentration and at pH 7.0 produced better results in enzyme purification.
O curauá (Ananas erectifolius) é uma planta fibrosa encontrada no Norte e Centro-Oeste do Brasil, uma bromeliácea de características físico-químicas que lhe conferem grande potencial de utilização na indústria automobilística, como fonte de fibras. Como toda planta da família Bromeliaceae contém níveis significativos da enzima bromelina, de alto valor comercial e com ampla aplicação também na indústria farmacêutica, alimentícia e cosmética. Neste trabalho, foram realizados testes experimentais de extração da enzima proteolítica do curauá sob diferentes condições de pH e temperatura, medindo-se a atividade enzimática para cada um dos ensaios, utilizando-se o reativo de Biureto e determinando-se a temperatura e pH ótimos de sua utilização, ou seja, valores em que a atividade enzimática da enzima é máxima, com o objetivo de otimizar as condições de uso do resíduo para posterior purificação. Foram utilizadas as duas variedades comercialmente encontradas (branca e roxa). Os resultados mostraram que o curauá possui enzimas com atividade proteolítica, sendo o pH ótimo 8,5 para as duas variedades e temperaturas ótimas de 30 ºC para a espécie branca, e 10 °C, 20 °C e 35 ºC, para a roxa.
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