Aim:  To develop an easy, rapid and efficient DNA extraction procedure for Staphylococcus aureus detection with a low number of steps and removing completely the PCR inhibitors, applicable to raw milk cheese samples, and to compare phenotypical and genotypical method to detect Staph. aureus isolates and staphylococcal enterotoxins (SEs) production. Methods and Results:  A total of 33 bovine and caprine raw milk cheese samples were analysed by means of both classic microbiological and molecular techniques. All samples were positive for Staph. aureus contamination. The DNA extraction protocol optimized was found to achieve a detection limit of 100 CFU g−1 for Staph. aureus. None of the samples tested with immunological assays contained SEs but in 14 of 33 samples a mixture of se positive (sea, sec, sed, seg, sel, sej) isolates were identified. Conclusions:  Staphylococcus aureus is a food‐borne pathogen mainly detected in finished dairy products. The rapid and efficient detection of Staph. aureus isolates from dairy products is essential for consumer safety. The direct detection of pathogens from food is possible with careful attention to sample preparation and nucleic acid amplification optimization. Significance and Impact of the Study:  This study shows that raw milk cheese samples can be tested for Staph. aureus contamination with a rapid, simple and reproducible procedure.

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Sheep production requires the constant assessment of parasitic burden and the efficacy of existing treatments for proper management. In this study, the administration of five different treatments was evaluated for the reduction of the percentage of eggs per gram of feces (EPG) shed by gastrointestinal nematodes (GIN) from sheep on three different sheep-breeding farms in Mexico (Texcoco, Estado de Mexico; Hueytamalco, Puebla; and Tlaltizapán de Zapata, Morelos). In these farms, ivermectin and benzimidazole derivatives had been routinely administered for two consecutive years. To determine whether drugs with different pharmacological properties decreased GIN fecal egg excretion, the treatments closantel (CLOS), albendazole (ABZ) and fenbendazole (FBZ) were administered alone and in combinations of CLOS + ABZ and CLOS + FBZ, to five groups of sheep, with an additional untreated control group on each farm (n = 28 per flock). Anthelmintic resistance was determined using Fecal Egg Count Reduction Tests (FECRT) as recommended in the guidelines of the World Association for the Advancement of Veterinary Parasitology. Fecal samples were collected 14 and 21 days after treatment. The anthelmintic resistance status was determined based on the reduction in the fecal egg count arithmetic mean and 95 % confidence limits. According to the FECRT, resistance developed to CLOS, ABZ, FBZ and CLOS + FBZ because the mean percentage of EPG reduction was ≤ 95 % with a lower confidence limit of ≤ 90 %. By contrast, nematode susceptibility was confirmed for the CLOS + ABZ combination, as it reduced the percentage of GIN fecal egg output by 96.46 ± 3.04 % (day 14) and 96.88 ± 3.04 % (day 21). Based on the morphometric identification of larvae, Haemonchus spp., Cooperia spp. and Teladorsagia spp. were the most abundant genera on all farms before the administration of these five treatments. In conclusion, the use of the anthelmintic combination of closantel plus albendazole may reduce the development of anthelmintic resistance in gastrointestinal nematodes.

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RESUMENEl objetivo de este estudio fue comparar el comportamiento de IFN- e IL-4 en ratones inoculados con proteína G recombinante del virus de la rabia, que se expresa en maíz transgénico o baculovirus. Para este propósito, grupos de ratones se inocularon de la siguiente manera: Grupo 1, vacuna contra el virus de la rabia inactivado vía im; Grupo 2, proteína G recombinante derivada de plantas por vía oral; Grupo 3, proteína G expresada en baculovirus vía im; Grupo 4, proteína G expresada en baculovirus por vía oral; Grupo 5, maíz no transformado por vía oral. Los niveles de IFN- e IL-4 y los anticuerpos específicos se evaluaron cada 15 días. El desafío se realizó a los 60 días post inoculación (pi). Los grupos 1 y 3 promovieron una mejor respuesta humoral. Por otro lado, los resultados mostraron que los mismos grupos mostraron los mejores niveles de IFN- en el día 10 pi; mientras que la IL-4 se detectó en el día 15 pi. Para el estudio de supervivencia, el 83 % de los ratones inmunizados con vacuna inactivada, maíz y los inoculados im con extractos de baculovirus sobrevivieron la infección viral. La proteína G de la rabia recombinante expresada en baculovirus promovió IFN- y los anticuerpos de una manera similar a la vacuna de rabia inactivada. A pesar de esto los ratones alimentados con maíz transgénico sobrevivieron al desafío en el mismo porcentaje que el grupo 3. PALABRAS CLAVE INTRODUCCIÓNUn gran número de las vacunas contra la rabia se han desarrollado utilizando diferentes sistemas, incluyendo baculovirus y plantas (1)(2)(3)(4)(5)(6)(7) . Una de las principales ventajas del sistema de expresión de células de insecto-baculovirus es el alto rendimiento de la proteína recombinante producida por litro de cultivo celular (8) . Aunque se ha informado de la expresión de la proteína G del virus de la rabia en diferentes sistemas vegetales (7,9) el desarrollo de una vacuna oral contra la rabia reduciendo el costo de producción y distribución sería muy útil, especialmente para los países en desarrollo, donde la enfermedad es endémica en humanos y animales domésticos. La glicoproteína es el antígeno principal del virus de la rabia, es una proteína transmembrana, que consiste en un dominio citoplásmico, un dominio transmembranal y un ectodominio expuesto como trimero. El ectodominio está involucrado en la inducción de anticuerpos neutralizantes y linfocitos T citotóxicos y cooperadores (10,11) . Muchos estudios han demostrado que los extractos crudos del antígeno recombinante purificado de los extractos puros de las plantas o la planta entera pueden inducir respuestas inmunes locales o sistémicas (1,7,12) . En la literatura existen pocos estudios que han evaluado el tipo de citocinas inducidas por las vacunas antirrábicas de nueva generación (13) .El objetivo de este estudio fue comparar la respuesta de IFN- e IL-4 en ratones inoculados con proteína G recombinante del virus de la rabia (rGpRV) que se expresó tanto en células de insecto infectadas con baculovirus como en maíz transgénico. Para este propósito, la...